"ECV-304 Adherent人臍靜脈內(nèi)皮細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
一般使用trypsin-EDTA 濃度為0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液濃度過高時,易造成培養(yǎng)基中細胞碎片增多,黑渣子增多,常規(guī)細胞傳代時建議用0.05%的胰酶進行消化,對于難消化的細胞可采用0.25%胰酶進行消化,細胞密度過高超過80%時,采用分步消化法。胰酶儲存在-20°C,解凍在4°C進行,次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中,保存于-20°C,避免反復(fù)冷凍解凍造成trypsin之活性降低,并可減少污染之機會。胰酶消化的程度是細胞培養(yǎng)中的一個關(guān)鍵步驟:消化過度細胞碎片增多,黑渣子增多,細胞會成片脫落,嚴(yán)重影響細胞活性,并有部分細胞漂浮,隨棄去的胰酶流失;消化不足則細胞難于從瓶壁上吹下,反復(fù)吹打同樣也會損傷細胞活性。不同細胞對消化液的敏感性不同,胰酶消化的時間也會有差異。胰酶消化時間與胰酶的濃度,是否含EDTA,胰酶的儲存時間,胰酶的儲存溫度,是否反復(fù)凍融,消化加入的胰酶體積,消化溫度及細胞的密度有關(guān)。對于新購買的細胞,建議客戶先用低濃度的胰酶仔細去摸索一下消化時間,可每隔1分鐘鏡下觀察細胞是否變圓,記錄消化時間,下一次操作參考之前的記錄來控制時間即可。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
ECV-304 Adherent人臍靜脈內(nèi)皮細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
常見培養(yǎng)細胞預(yù)防污染的有效措施:體外培養(yǎng)的細胞受到嚴(yán)重污染時,有時即使想盡各種辦法也難以挽回。因此,防止污染,預(yù)防是關(guān)鍵。只有將預(yù)防措施貫穿于整個細胞培養(yǎng)的始終,才能將發(fā)生污染的可能性降到最小程度。一般預(yù)防可從以下幾方面著手:1)添加抗生素:各種抗生素性質(zhì)不同,對各種微生物的作用也不同,聯(lián)合應(yīng)用比單用效果好,預(yù)防性應(yīng)用比污染后使用好(但迄今尚無對抗支原體特效抗生素)。但反復(fù)使用抗生素會使微生物產(chǎn)生耐藥性,且對細胞本身也有一定影響,因此為避免誘導(dǎo)抗藥細菌,應(yīng)定期更換培養(yǎng)系統(tǒng)中的抗生素,或盡可能不用抗生素處理;2)從物品、用品消毒滅菌著手:細胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要徹底,各種溶液滅菌除菌要仔細,并在取樣檢菌一周后確認無菌才能使用。同時,在無菌過濾操作中,隨著濾過體積的增大,濾膜破損的可能性增加,故應(yīng)選擇最后過濾的液體進行檢測。定期對二氧化碳培養(yǎng)箱進行消毒。具體操作:75%的酒精搽拭培養(yǎng)箱后,使用可移動的紫外燈至少消毒30min,加入高壓滅菌過的超純水于培養(yǎng)箱水槽中保持濕度。也可配制300ml的飽和酸銅加3L滅菌超純水混合成酸銅溶液加入水槽中。
SUM-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG 9細胞、B16/F0細胞、HCC 2185細胞
TE 32.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 767細胞、WEHI-3B細胞、C1498細胞
H-1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV 1063細胞、ZR75_1細胞、C-Lu65細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
ST細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGF-1細胞、THPI細胞、RGM-1細胞
ST細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGF-1細胞、THPI細胞、RGM-1細胞
Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1088細胞、NK92-MI細胞、HAEC細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
ECV-304 Adherent人臍靜脈內(nèi)皮細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細胞培養(yǎng)成功以后,需要進行分離培養(yǎng),否則細胞會因生存空間不足或密度過大,營養(yǎng)障礙,影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株),可以進行細胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料,便于實驗。傳代細胞培養(yǎng)操作步驟:1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液;2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進行消化,2-5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后,應(yīng)立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶內(nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液,按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞,使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔,以防用力過猛損傷細胞;6)用計數(shù)板計數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng);7)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般2-3d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。
3T3-A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBE細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、SupB15WT細胞
Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GH3細胞、DrG細胞、Hs 819.T細胞
HFL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIA Paca2細胞、Panc 04.03細胞、HCC-1937細胞
B16 F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-704細胞、253JBV細胞、LNCaP subline C4-2細胞
HL 60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 948細胞、B-104細胞、RERFLCMS細胞
PNT-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV40 MES 13細胞、A9 (Hamprecht)細胞、GMK,BSC-1細胞
HepaRG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/O細胞、HRVEC細胞、HEMCSS細胞
RTMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL 45細胞、J-111細胞、KMH-2細胞
NCI H929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 159細胞、J82COT細胞、CCRF-CEM細胞
CL40細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293H細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞、B16BL-6細胞
SW 1116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM239A細胞、PF382細胞、MCF-12A細胞
RS(4;11)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、MUTZ1細胞、THLE2細胞
HLEC-B3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT 16細胞、BN-CL2細胞、MTEC1細胞
ECV-304 Adherent人臍靜脈內(nèi)皮細胞系
GM00637H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A101D細胞、SUDHL16細胞、IM-95細胞
SNU-182細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-104細胞、Hep 3B細胞、MDA-MB-175細胞
NCI-ADR-RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wayne State University-Head and Neck 13細胞、RPMI1846細胞、WEHI164細胞
NCI-ADR-RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wayne State University-Head and Neck 13細胞、RPMI1846細胞、WEHI164細胞
NCI-H441-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1975細胞、BNL.1ME A.7R.1細胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細胞
H-1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFPAC1細胞、NCIH1581細胞、KOSC-2 cl3-43細胞
NIH-3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM-4細胞、CAL-85-1細胞、HA1800細胞
C6661細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP-8細胞、THLE-3細胞、NS1細胞
TOG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Epidermoid carcinoma #2細胞、H441細胞、CCRF-SB細胞
MM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit225細胞、Rabbit Kidney 13細胞、C3A細胞
AML 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit225 K6細胞、NCI-H1882細胞、NCIN87細胞
HT 1080.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Hep1細胞、HANK細胞、HFL細胞
MOLT 16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R.K.13細胞、HANK1細胞、NS20-Y細胞
TU 686細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NF639細胞、KOPN8細胞、N-Tera-2細胞
H-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC-82細胞、RT-4細胞、B16F0細胞
TJ905細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HEL-1細胞、SNU-407細胞、Pa017C細胞
NK-92.05細胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D-Cl3細胞、H1573細胞、NCI-H146細胞
EAC-E2G8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR3細胞、TM-3細胞、A9 (Hamprecht)細胞
SW-948細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1573細胞、CL-34細胞、SKG-3a細胞
SHIN-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ball 1細胞、N2a細胞、HTR8細胞
hFOB 1.19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR8細胞、MiaPaCa2細胞、THP-1(ATCC)細胞
PNT1-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL4細胞、GC-1細胞、MSTO-211細胞
LS 174T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS 445T細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞、L 540細胞
8505C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC823細胞、NCI-H1930細胞、Danio rerio Gill細胞
H-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞
NCI-H1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS1728細胞、NCI-SNU-C2A細胞、GBC-SD細胞
Porcine Kidney-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA801C細胞、LS-1034細胞、8305C_1細胞
MKN7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 1細胞、HS-445細胞、WM266mel細胞
P-388D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV1063細胞、L-Wnt3A細胞、Neuro 2a細胞
HTR-8/SV neo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BDCM細胞、RMa-bm細胞、NCI-H747細胞
COLO 206細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1650細胞、MC-3T3-E1細胞、HEC-1-A細胞
HTR-8/SV neo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BDCM細胞、RMa-bm細胞、NCI-H747細胞
NTERA-2cl.D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHBE細胞、MDA PCa 2b細胞、KCL22S細胞
H8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-354細胞、HCC-78細胞、Jurkat Clone E6-1細胞
H35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV 2008細胞、6T-CEM細胞、OVCAR8細胞
HSC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc3_27細胞、NCI-H498細胞、HuTu-80細胞
SNUC2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu 8988 S細胞、H-727細胞、C-28/I2細胞
SNUC2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu 8988 S細胞、H-727細胞、C-28/I2細胞
U-266 AR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DI TNC1細胞、SU86.86細胞、H1819細胞
IBRS2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2-4510細胞、NCI-H1092細胞、SW780細胞
SK-N-BE(2)C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB157細胞、NCI-H64細胞、J-111細胞
SKNBE(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-0WT細胞、HEL細胞、MDCK-2細胞
ECV-304 Adherent人臍靜脈內(nèi)皮細胞系
GES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293FT細胞、Hs832.Tc細胞、MG-HU-3細胞
VMM-5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CC-LP-I細胞、AtT20細胞、PL-9細胞
SK-GT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-407細胞、KP-N-RT-BM-1細胞、H-774細胞
EOC20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV-434細胞、AgC11x3A細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞
H-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH295R細胞、HEL 299細胞、PG-BE1細胞
DMS-273細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs840_T細胞、2780細胞、201T細胞
H-187細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs27F細胞、MDA-MB468細胞、JTC-39細胞
SUM190細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 780細胞、JURKAT E-61細胞、SCC15細胞
NCIH1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU-565細胞、H498細胞、H-847細胞
GM05887A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK Type II細胞、SNUC2B細胞、G422細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM17219細胞、SupB15W細胞、HEC1A細胞
HFF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAEC細胞、HepG2/C3A細胞、MJ細胞
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