"APRE-19 Adherent人視網(wǎng)膜上皮細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒有搖勻,或者放入時搖勻,但在細胞貼壁前,又移動了培養(yǎng)瓶,頻繁開關(guān)培養(yǎng)箱引起的振動或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過少,培養(yǎng)箱擱板表面不平整,這些因素會導致細胞生長不均勻。研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。運輸過程對細胞有嚴重影響。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C 太久。一些懸浮細胞抱團生長是正?,F(xiàn)象,大部分懸浮細胞在細胞密度很高的情況下,很可能會出現(xiàn)部分細胞抱團生長的現(xiàn)象,聚團細胞很容易死亡并演化成絮狀物,殃及周圍的懸浮細胞,因此在培養(yǎng)懸浮細胞時需控制好細胞密度。如果出現(xiàn)了細胞團,可以通過細胞篩去掉部分較大的細胞團,也可以嘗試一下方法:將細胞懸液收集到15ml離心管中,靜置20min左右,小心取上層細胞上清培養(yǎng)(該方法只能去除部分較大的細胞團)。部分細胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐藥株等),這個是正?,F(xiàn)象。如果只有少數(shù)細胞有內(nèi)出現(xiàn)極少空泡,則很可能是細胞狀態(tài)不佳,可以通過調(diào)整血清濃度,控制消化,控制傳代比例及時間等方法來調(diào)整細胞狀態(tài);如果大部分細胞出現(xiàn)空泡,且單個細胞內(nèi)空泡數(shù)目偏多,則可能細胞代次較高,細胞老化所致,需更換代次較早的細胞。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
APRE-19 Adherent人視網(wǎng)膜上皮細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇:細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-196℃液氮中,儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融?!緝龃婕毎浚?選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染),在凍存前1d換液;2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液,計數(shù),使細胞密度達5×10/ml左右密度,離心,去上清;3)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑10%二甲基亞砜(DMSO)或甘油,可使冰點降低,使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外;4)分裝于無菌凍存管中,每管加1.5m懸液;5)旋好凍存管并仔細檢查,一定要蓋緊,做好標記;6)凍存:在特殊的儀器或簡易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min時間內(nèi),下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度,過快能影響細胞內(nèi)水分透出,太慢則促進冰晶形成。操作時應戴防護眼鏡和手套,以免液氮凍傷?!緩吞K細胞】1)從罐中取出凍存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不時搖動,使其急速融化,30~60s內(nèi)完成;3)凍存管用70%酒精擦拭消毒后,打開蓋子,用吸管將細胞懸液注入離心管中,再滴加10ml培養(yǎng)液;4)低速離心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培養(yǎng)液洗一次;5)用培養(yǎng)液適當稀釋后,裝入培養(yǎng)瓶37℃培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后,繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分,密度應達到10/ml,在融后稀釋20倍時,仍能保持5×10/ml數(shù)量。
MAD109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas422細胞、S16細胞、Hs-940細胞
MDA-MB415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMCUB-1細胞、CAL 85-1細胞、Y-1細胞
SNU-368細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML12細胞、MS 751細胞、5-8F細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
VP 267細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞、ELD-1細胞、GM03190細胞
P388細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG1細胞、H-378細胞、NH-6細胞
H2107細胞系相關(guān)產(chǎn)品:38C-13細胞、HIT T-15細胞、KB細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
APRE-19 Adherent人視網(wǎng)膜上皮細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:1)CO2培養(yǎng)箱:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要;2)烘箱(干燥箱):用于細胞培養(yǎng)的一些器械、器皿必須烘干后才能使用,玻璃器皿等須干熱消毒。干熱消毒時,烘箱內(nèi)溫度一般要達到160℃以上,通常使用鼓風式烘箱。其優(yōu)點是溫度均勻、效果較好,缺點是升溫過程較慢。升溫時不能先升溫后鼓風而應鼓風與升溫同時開始,至100℃時,停止鼓風。需注意避免包裹器皿的紙或棉花燒焦,燒焦的碎屑可影響細胞的生長。消毒后不能立即打開箱門,以免驟冷導致玻璃器皿破裂,應等溫度自然下降至100℃以下后可開門。3)超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質(zhì)量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。4)液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。5)超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉(zhuǎn)放-20℃ 1 hour,再轉(zhuǎn)入-70至-80℃過夜,之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。6)恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾毎麅龃婀苄枰⒓捶庞冢常贰嫠≈锌焖購吞K之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。7離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機。除上述儀器外,移液器、高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡、熒光顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。
MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLRK 13細胞、EJ1細胞、HTR-8/SVneo細胞
EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Okayama University Medical School-27細胞、H929細胞、SW480E細胞
SDBMSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hSCC-25細胞、HSAS4細胞、VMM39細胞
Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:451Lu細胞、BNL CL.2細胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞
Caco-2/ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1944細胞、R D細胞、SUD4細胞
H2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARPE19細胞、TW01細胞、COLO 741細胞
BA/F3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DSL-6A-C1細胞、HEP-3B2細胞、MDA-MB468細胞
H2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep G2-Luc細胞、SKOV-3細胞、CEMC7細胞
CEM/0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1734細胞、GM01232E細胞、NTera-2D1細胞
H735細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 934.T細胞、IPLB-Sf21AE細胞、CAL 12細胞
NCIH1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU-565細胞、H498細胞、H-847細胞
P3/NS1/1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EU-3細胞、GM 2132細胞、SHP-77細胞
CII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLFC細胞、bEnd3細胞、HEL92.1.7細胞
APRE-19 Adherent人視網(wǎng)膜上皮細胞系
M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品:1E8-H細胞、H548細胞、Panc-03.27細胞
CCD 1112SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-432細胞、OV1-P細胞、H-1650細胞
KP-N-YN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-954細胞、Bovine ENDometrial cells細胞、COV504細胞
KP-N-YN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-954細胞、Bovine ENDometrial cells細胞、COV504細胞
NCI-H2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2286細胞、HC11細胞、FAT細胞
HCC827細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 148細胞、CHO-S細胞、NTERA-2/D1細胞
OV2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-Ag4/1細胞、HRC-99細胞、NCI-H727細胞
CEM-CCRF (CAMR)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-358細胞、SKM-1細胞、Epstein-Barr-3細胞
JiyoyeP-2003細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA SO M14細胞、B5537SKIN細胞、Panc813細胞
Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QBC(939)細胞、JB 6細胞、HIT T15細胞
MLE 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLA144細胞、MDA MB 453細胞、GM03569細胞
MESSA-DX5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC-15細胞、PLA801D細胞、OCI-AML2細胞
GEO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1373細胞、BSC-40細胞、OCI-LY-7細胞
H-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV522細胞、EOC20細胞、RBL 1細胞
MCF-12F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-741細胞、FHL 124細胞、GRSL細胞
MC-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE-21細胞、SUDHL8細胞、HeLa S3細胞
ID8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPI-2I細胞、RA 1細胞、FHs 74 Int細胞
BCaP-37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-FET細胞、High Five細胞、H22-H8D8細胞
Clone M-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB435細胞、MOPC細胞、SNU-368細胞
TOV-112D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECGI10細胞、HEK293-H細胞、Hs68細胞
D341 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A172細胞、ZR-75-30細胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞
LAN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-8細胞、AD-293細胞、U373細胞
HCET細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H295R細胞、FM88細胞、EA.hy 926細胞
NCI-H2330細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 403細胞、NCI-H820細胞、MFC細胞
NH-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE-2細胞、HS0578T細胞、SK-MES1細胞
HEL-92_1_7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG-IIIa細胞、H4-IIE-C3細胞、NCI H226細胞
Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa S-3細胞、RPMI-8402細胞、G-Olig2細胞
NCIH460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc02-H0細胞、COLO-357細胞、NCIH292細胞
U-hth74細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEL-526細胞、HuT-78細胞、P3HR1細胞
NS1-Ag4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHH-CALL2細胞、MDA-MB-175細胞、BHK細胞
SUM-102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1651細胞、NRK 49F細胞、SKN-AS細胞
SNU1040細胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE14o-細胞、PLA-801D細胞、RSC 96細胞
OUMS27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu-177細胞、SK-GT-2細胞、Panc_02_03細胞
H341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MTEC1細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞、MDAMB435細胞
MOLP-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H157細胞、H-510A細胞、HCC-2935細胞
ST486細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GalK1細胞、BNCL-2細胞、CHP100細胞
HSC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1105細胞、mIMCD-3細胞、NSH細胞
HSC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1105細胞、mIMCD-3細胞、NSH細胞
Det 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Loucy細胞、G402細胞、NCI-H1882細胞
Kit225細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)-M17細胞、CAL-27細胞、NCIH2107細胞
Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hx-147細胞、H510A細胞、NIH:OVCAR3細胞
H22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 70細胞、Y3Ag1.2.3細胞、Glioma 261細胞
APRE-19 Adherent人視網(wǎng)膜上皮細胞系
293-EBNA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-1-Ag4-1細胞、RAW264.7細胞、Blotchy fibroblast-11細胞
LS-174T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4-II-EC3細胞、NCIH1869細胞、SKCol1細胞
P3X63Ag8-6-5-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM102PT細胞、RINm5F細胞、RT112細胞
HL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EM-3細胞、KU-812F細胞、Human Foreskin Fibroblast細胞
RSC96細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG [Human lung carcinoma]細胞、H-322細胞、Y 1細胞
Capan 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-K1細胞、NCI-H128細胞、ACC-3細胞
NCI-SNU-601細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87 MG細胞、NIH3T3-L1細胞、H2591細胞
266 Bl細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03671C細胞、KM-H2細胞、SACC-83細胞
TE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2228細胞、COLO-320HSR細胞、Med 341細胞
NUGC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCEpiC細胞、PCI-04B細胞、HUT 125細胞
PL 45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RK 13細胞、D-324MED細胞、HPAF-II/CD18細胞
SDBMSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hSCC-25細胞、786-0細胞、MDA PCa 2b細胞
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