"HPDE6c7 Adherent人正常胰腺導管上皮細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良好,當補液時,需避免反復吹打。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HPDE6c7 Adherent人正常胰腺導管上皮細胞系
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代注意事項:①傳代培養(yǎng)時注意無菌操作并防止細胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進行一種細胞的操作。每種細胞使用一套器材;②每天觀察細胞形態(tài),掌握好細胞是否健康的標準:健康細胞的形態(tài)飽滿,折光性好,生長致密時即可傳代;③如發(fā)現(xiàn)細胞有污染跡象,應立即采取措施,一般應棄置污染的細胞,如果必須挽救,可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復清洗,隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素,并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細胞的建系和維持:細胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細胞種子凍存來實現(xiàn)。對每一個細胞系來說都有其自身的特點,要做好建系的維持必須記錄好細胞檔案,換液傳代和做好細胞系的管理工作。培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇:細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-196℃液氮中,儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。
PA I細胞系相關產品:GM00637H細胞、P3J.HR1K細胞、EU-2細胞
HT144-mel細胞系相關產品:MDA MB 436細胞、C6細胞、IHH細胞
MPC5細胞系相關產品:COLO-HSR細胞、CCRF.CEM細胞、H-2052細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MC57G細胞系相關產品:HTR8svn細胞、MIA Paca2細胞、HT144細胞
DMS-114細胞系相關產品:MDAMB-231細胞、253J細胞、293AD細胞
H1836細胞系相關產品:H-1581細胞、MUGCHOR1細胞、GM00215A細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
HPDE6c7 Adherent人正常胰腺導管上皮細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細胞培養(yǎng)成功以后,需要進行分離培養(yǎng),否則細胞會因生存空間不足或密度過大,營養(yǎng)障礙,影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株),可以進行細胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料,便于實驗。傳代細胞培養(yǎng)操作步驟:1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內舊培養(yǎng)液;2)向瓶內加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進行消化,2-5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察,當發(fā)現(xiàn)胞質回縮、細胞間隙增大后,應立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶內加入Hanks液少量,輕輕轉動培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶內培養(yǎng)液,按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞,使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔,以防用力過猛損傷細胞;6)用計數(shù)板計數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng);7)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般2-3d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。
52PE細胞系相關產品:Panc04.03細胞、BT-20細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞
LAN6細胞系相關產品:TE-8細胞、AD-293細胞、U373細胞
MGC-803細胞系相關產品:NMC-G1細胞、Leukemic 1210細胞、SKMEL-24細胞
SKRC-42細胞系相關產品:H-1618細胞、Ra No. 1細胞、NK-92MI細胞
YH細胞系相關產品:NL-20細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞、NCIH596細胞
H-2029細胞系相關產品:NCTC-929細胞、UM-UC3細胞、SK MES 1細胞
MUTZ-1細胞系相關產品:SKM1細胞、HEK293-EBNA細胞、HIT-T15細胞
H-841細胞系相關產品:SUM 102PT細胞、MES-SA細胞、CEM/0細胞
TB1 Lu細胞系相關產品:SK_HEP1細胞、P3HR-1細胞、LA-N-1細胞
RA.1細胞系相關產品:TT細胞、H-1092細胞、COLO 680N細胞
NU-GC-2細胞系相關產品:NCI-460細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞
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TSU-Pr1細胞系相關產品:H1568細胞、COLO-829細胞、R.K.13細胞
HPDE6c7 Adherent人正常胰腺導管上皮細胞系
beta-TC6細胞系相關產品:BCPAP細胞、TE3細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞
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P30/Ohkubo細胞系相關產品:OVCAR 433細胞、SUM 149細胞、CEM T4細胞
HHFK細胞系相關產品:HEMCSS細胞、MDA-MB-134細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞
FLC7細胞系相關產品:GM00346B細胞、OVCAR8細胞、Nb2細胞
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L428細胞系相關產品:Roswell Park Memorial Institute 2650細胞、MCF-7/AdrR細胞、H82細胞
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RIN-14B細胞系相關產品:Uhth-74細胞、TE11細胞、TE10細胞
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hTERT RPE1細胞系相關產品:RPMI-8226細胞、MHCC97-H細胞、H-2108細胞
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HKBML細胞系相關產品:HL-1細胞、8226細胞、SW 962細胞
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BL6細胞系相關產品:UO-31細胞、MC-38細胞、NIH:OVCAR-8細胞
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MAC1細胞系相關產品:MuM-2B細胞、HCC-1428細胞、SACC-LM細胞
BSC-40細胞系相關產品:MC/9細胞、WiDrTC細胞、ANA1細胞
X63細胞系相關產品:MPASMC細胞、C8-D1A細胞、SU4細胞
NCIH1417細胞系相關產品:SUP-T1細胞、E.L.4細胞、Panc 2.03細胞
MHCC-LM3細胞系相關產品:C-28I2細胞、JROECL19細胞、Hs934T細胞
NPA'87細胞系相關產品:Lewis-Lung細胞、HBZY1細胞、87 MG細胞
2BS細胞系相關產品:alphaTC1 Clone 6細胞、NCI-H2030細胞、H69細胞
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KBM-7細胞系相關產品:KY-50細胞、GS-9L細胞、SK-N-MC細胞
H295R細胞系相關產品:Mia PACA 2細胞、MM134細胞、H660細胞
HRIF細胞系相關產品:CV-1細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MCF-10A細胞
MIN6細胞系相關產品:NCIH1568細胞、10RGB細胞、LS 123細胞
RTE細胞系相關產品:ECC-1細胞、UACC 893細胞、H-250細胞
OVCAR 432細胞系相關產品:ME16C細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞、HEI193細胞
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Centre Antoine Lacassagne-39細胞系相關產品:Mv 1 Lu (NBL-7)細胞、High 5細胞、CD 18細胞
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BALB/3T3 (clone A31)細胞系相關產品:OVCAR5細胞、MUTZ3細胞、BNL CL2細胞
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TC7細胞系相關產品:KMBC細胞、WRL 68細胞、M14細胞
MGC-803細胞系相關產品:NMC-G1細胞、COV 434細胞、H1404細胞
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