"L-WRN Adherent小鼠皮下結(jié)締組織細胞系
細胞背景資料：皮下結(jié)締組織；自發(fā)永生；雄性；C３H/An
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良好，當補液時，需避免反復吹打。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
L-WRN Adherent小鼠皮下結(jié)締組織細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以１：２或１：２以上的比例轉(zhuǎn)移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞，可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代，部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟：①入無菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液３７℃下預熱；③超凈臺臺面應整潔，用７５%酒精棉球擦拭清潔；④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面２０min左右，關閉紫外燈，打開風機清潔空氣除去臭氧；⑤點燃酒精燈;取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi)；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用７５%酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個大培養(yǎng)瓶加入１ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使細胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復吹打消化好的細胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成細胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋，適度擰緊后稍回轉(zhuǎn)，以利于CO２的進入，將培養(yǎng)瓶放回CO２培養(yǎng)箱；⑩對懸浮培養(yǎng)細胞，步驟７-９不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。
Z310細胞系相關產(chǎn)品：NCI660細胞、NCI-H2122細胞、TE354.T細胞
SUPT-1細胞系相關產(chǎn)品：RIN14B細胞、Hs852T細胞、Cates 1B細胞
J 774A.1細胞系相關產(chǎn)品：Panc4.03細胞、SKCol1細胞、KBM-5細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCM460細胞系相關產(chǎn)品：Metastatic Variant 522細胞、Panc-02細胞、NCI-H774細胞
Hs 870.T細胞系相關產(chǎn)品：RPVSMC細胞、MRC5細胞、KYSE510細胞
HSC（Human Schwann）細胞系相關產(chǎn)品：CCC-HHM-2細胞、SupB15W細胞、GM17219細胞
細胞生長特性：貼壁
L-WRN Adherent小鼠皮下結(jié)締組織細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
以下對初次培養(yǎng)細胞人員來說，是非常好的開門教程：準備室的設備：單蒸餾水蒸餾器、雙蒸餾水蒸餾器、酸缸、烤箱、高壓鍋、儲品柜(放置未消毒物品)、儲品柜(放置消毒過的物品)、包裝臺；配液室的設備：扭力天平和電子天平(稱量藥品)、PH計(測量培養(yǎng)用液PH值)、磁力攪拌器(配置溶液室攪拌溶液)；培養(yǎng)室的設備：液氮罐、儲品柜(存放雜物)、日光燈和紫外燈、空氣凈化器系統(tǒng)、低溫冰箱(-８０℃)、空調(diào)、二氧化碳缸瓶、邊臺(書寫實驗記錄)；必須放在無菌間的設備：離心機(收集細胞)、超凈工作臺、倒置顯微鏡、CO２孵箱(孵育培養(yǎng)物)、水浴鍋、三氧消毒殺菌機、４℃冰箱(放置serum和培養(yǎng)用液)。無菌室的滅菌：定期打掃無菌室：每周打掃一次，先用自來水拖地、擦桌子、超凈工作臺等，然后用３‰來蘇爾或者新潔爾滅或者０.５％擦拭；CO２孵箱(培養(yǎng)箱)滅菌：先用３‰新潔爾滅擦拭，然后用７５％酒精擦拭或者０.５％，再用紫外燈照射；實驗前滅菌：打開紫外燈、三氧殺菌機、空氣凈化器系統(tǒng)各２０-３０分鐘；實驗后滅菌：用７５％酒精(３‰新潔爾滅)擦拭超凈臺、邊臺、倒置顯微鏡的載物臺；實驗人員的無菌準備：肥皂洗手、穿好隔離衣、帶好隔離帽、口罩、放好拖鞋、用７５％酒精棉球擦凈雙手。
MCA 205細胞系相關產(chǎn)品：SW 1417細胞、Vero-E6細胞、SCL1細胞
Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞系相關產(chǎn)品：U-87 MG細胞、LAN-1細胞、MeT 5A細胞
DR2R1610細胞系相關產(chǎn)品：253J細胞、50.B1細胞、Tregs細胞
C518細胞系相關產(chǎn)品：MES-SA/Dx-5細胞、SV40 MES 13細胞、HLE-SRA-01/04細胞
HuH6細胞系相關產(chǎn)品：Mel526細胞、LC1細胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細胞
SJRH 30細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H498細胞、GA-10(Clone 4)細胞、HVSMC細胞
Sp2/O-Ag14細胞系相關產(chǎn)品：MUVEC細胞、SJ-RH30細胞、H-87細胞
CEL細胞系相關產(chǎn)品：FCCH1024細胞、U266S細胞、H-2342細胞
KATOIII細胞系相關產(chǎn)品：NCI-841細胞、Z310細胞、NIH:OVCAR-4細胞
COLO-824細胞系相關產(chǎn)品：Med 341細胞、Rat Skin 1細胞、M1細胞
SV40 MES 13細胞系相關產(chǎn)品：DITNC1細胞、OCI-Ly 10細胞、HCC-95細胞
10T1/2細胞系相關產(chǎn)品：BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞
MEF (CF-1)細胞系相關產(chǎn)品：HPDE6c7細胞、RMG-I細胞、1301細胞
L-WRN Adherent小鼠皮下結(jié)締組織細胞系
Nthy-ori 3.1細胞系相關產(chǎn)品：CL 1-5細胞、LLC-PK(1)細胞、IPEC1細胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞系相關產(chǎn)品：HCC366細胞、CG4細胞、COLO-680N細胞
Central Adrenergic TH-expressing a細胞系相關產(chǎn)品：MPC-11細胞、H-128細胞、LAPC4細胞
Central Adrenergic TH-expressing a細胞系相關產(chǎn)品：MPC-11細胞、H-128細胞、LAPC4細胞
H1944細胞系相關產(chǎn)品：Giant Cell Tumor細胞、HFF1細胞、8505C細胞
Y1細胞系相關產(chǎn)品：CaSki細胞、28SC細胞、LS-123細胞
2B4細胞系相關產(chǎn)品：MOPC細胞、PK 15細胞、KY180細胞
MUM2B細胞系相關產(chǎn)品：EL4細胞、H-187細胞、KP-N-RT-BM-1細胞
NCI-H1618細胞系相關產(chǎn)品：3396細胞、H-1417細胞、SNU-1細胞
NCI-H2286細胞系相關產(chǎn)品：SBC-5細胞、OVCAR.4細胞、NTera2/D1細胞
EAC細胞系相關產(chǎn)品：U-373 MG細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞、Swiss-3T3細胞
MES-SA/Dx-5細胞系相關產(chǎn)品：RS1細胞、HEK 293T/17細胞、HSCT6細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞系相關產(chǎn)品：NHEK細胞、T-HEECs細胞、SV40-MES13細胞
RPMI8226細胞系相關產(chǎn)品：TERT-RPE1細胞、PLA801-95C細胞、LIPF178C細胞
NR 8383細胞系相關產(chǎn)品：RH-30細胞、SF 539細胞、PLC8024細胞
RWPE1細胞系相關產(chǎn)品：Walker-256細胞、mIMCD3細胞、P3-X63-Ag8.653細胞
NOK細胞系相關產(chǎn)品：Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、RPMI 1846細胞、DoHH2細胞
hTERT-RPE1細胞系相關產(chǎn)品：Hs821T細胞、STTG1細胞、DR2R 1610細胞
IPLB-Sf21細胞系相關產(chǎn)品：OV-2008細胞、HNTEC細胞、KYSE-510細胞
TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞系相關產(chǎn)品：NCI-1155細胞、H-2052細胞、Panc05.04細胞
293F細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1876細胞、T_T_細胞、MV4;11細胞
2780CP細胞系相關產(chǎn)品：KOPN8細胞、TFH細胞、CHP-100細胞
U 138 MG細胞系相關產(chǎn)品：A375-MEL細胞、R-1059-D細胞、32D-Cl3細胞
MOLT 3細胞系相關產(chǎn)品：BC-009細胞、OAW-42細胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞
MDAMB175VII細胞系相關產(chǎn)品：HCV-29細胞、CT-26細胞、WM451細胞
Hep-3B細胞系相關產(chǎn)品：Hs445細胞、T24細胞、HOS/MNNG細胞
786O細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly 1細胞、NCI/ADR-RES細胞、NCI-H441-4細胞
HR8348細胞系相關產(chǎn)品：DHL10細胞、LS174T細胞、DMS153細胞
CAL-148細胞系相關產(chǎn)品：253J-Bladder-V細胞、T-47-D細胞、COLO680N細胞
MDCK (NBL-2)細胞系相關產(chǎn)品：KMS-26細胞、As-PC1細胞、NCI-H69C細胞
Panc 03.27細胞系相關產(chǎn)品：Scott細胞、PANC-04-03細胞、MAVER1細胞
COV434細胞系相關產(chǎn)品：SRS-82細胞、NWA細胞、FL83B細胞
RBE4細胞系相關產(chǎn)品：B95-8細胞、MCF-12F細胞、NCIH522細胞
GC-1 spg細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H3255細胞、CHL-CL-11細胞、NMC-G1細胞
BHK21細胞系相關產(chǎn)品：MHCC97細胞、H2135細胞、SU 86.86細胞
RS411細胞系相關產(chǎn)品：NT2-D1細胞、LAN-5細胞、HEK293-FT細胞
SK-N-SH細胞系相關產(chǎn)品：Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、DMS-79細胞、STC-1細胞
MGH-UI細胞系相關產(chǎn)品：ASH3細胞、Bovine Turbinate細胞、SK-MEL3細胞
Farage OL細胞系相關產(chǎn)品：F-36P細胞、SK-RC 52細胞、SK-MEL5細胞
MESSA細胞系相關產(chǎn)品：M109細胞、KYSE-70細胞、L1210細胞
V 79-4細胞系相關產(chǎn)品：FHs 74 Int細胞、K 562細胞、AU-565細胞
BAEC細胞系相關產(chǎn)品：C28/I2細胞、H295細胞、LK2細胞
L-WRN Adherent小鼠皮下結(jié)締組織細胞系
4T1細胞系相關產(chǎn)品：BSC40細胞、T173細胞、SK_HEP1細胞
SKNBE2細胞系相關產(chǎn)品：PGBE1細胞、C26細胞、DHL-2細胞
C8161細胞系相關產(chǎn)品：H1238細胞、H196細胞、FO [Mouse myeloma]細胞
H-1092細胞系相關產(chǎn)品：Hs 863.T細胞、MCF 10A細胞、H-1238細胞
NCI-H2023細胞系相關產(chǎn)品：G-292細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HOS (TE85)細胞
Kelly細胞系相關產(chǎn)品：OSC19細胞、CHL-IU細胞、CCD-1095Sk細胞
HuT-102細胞系相關產(chǎn)品：102PT細胞、SK-UT-1細胞、P3-X63Ag8細胞
Murine Lung Epithelial-12細胞系相關產(chǎn)品：OCI-LY-10細胞、JEG3細胞、HBVP細胞
SKBR-3細胞系相關產(chǎn)品：RPMI 1846細胞、NCIH2085細胞、RT-BM-1細胞
L cell細胞系相關產(chǎn)品：C38細胞、95C細胞、SK-MES-1細胞
U118-MG細胞系相關產(chǎn)品：SV-HUC細胞、HEL299細胞、U-2932細胞
DR2R1610細胞系相關產(chǎn)品：253J細胞、LN-382細胞、BLO 11細胞
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