"R2C Adherent大鼠睪丸間質細胞系
細胞背景資料:睪丸間質瘤;雄性;Wistar Furth
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良好,當補液時,需避免反復吹打。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
R2C Adherent大鼠睪丸間質細胞系
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點:無菌意識要強:實驗進行前,超凈臺以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟超凈工作臺風扇運轉數(shù)分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置,其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以70%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在中央無菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經干細胞,有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時,我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升高到56℃后計時,一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因為會造成沉淀物之顯著增多,且會影響血清之品質。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
BEL-7404細胞系相關產品:CO115細胞、RPMI.8226細胞、High5細胞
Hep 3B2.1-7細胞系相關產品:MDAMB134細胞、LAPC4細胞、BT-325細胞
P 3 HR 1細胞系相關產品:SK-MEL-31細胞、Monomac-1細胞、NCI-HUT-460細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Hep 3B細胞系相關產品:Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞、SNGM細胞、HEK 293 c18細胞
Hep 3B細胞系相關產品:Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞、SNGM細胞、HEK 293 c18細胞
NCIH2135細胞系相關產品:MES-SA-Dx5細胞、OE-21細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞
細胞生長特性:貼壁
R2C Adherent大鼠睪丸間質細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:1)CO2培養(yǎng)箱:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要;2)烘箱(干燥箱):用于細胞培養(yǎng)的一些器械、器皿必須烘干后才能使用,玻璃器皿等須干熱消毒。干熱消毒時,烘箱內溫度一般要達到160℃以上,通常使用鼓風式烘箱。其優(yōu)點是溫度均勻、效果較好,缺點是升溫過程較慢。升溫時不能先升溫后鼓風而應鼓風與升溫同時開始,至100℃時,停止鼓風。需注意避免包裹器皿的紙或棉花燒焦,燒焦的碎屑可影響細胞的生長。消毒后不能立即打開箱門,以免驟冷導致玻璃器皿破裂,應等溫度自然下降至100℃以下后可開門。3)超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。4)液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。5)超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉放-20℃ 1 hour,再轉入-70至-80℃過夜,之后才可以轉移到液氮內(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。6)恒溫水浴:從液氮或超低溫冰箱中取出細胞凍存管需要立即放于37℃水浴中快速復蘇之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。7離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內容物的分離則需要高速冷凍離心機。除上述儀器外,移液器、高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡、熒光顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。
Hs-852-T細胞系相關產品:U-343MG細胞、H-295R細胞、ACC2細胞
MDA468細胞系相關產品:QSG-7701細胞、FHs74Int細胞、HFSF細胞
HCC9724細胞系相關產品:BIU87細胞、MRAEC細胞、T-47D細胞
SP2/0 Ag-14細胞系相關產品:Cloudman S91 melanoma細胞、KTA7細胞、Psi-2-DAP細胞
ID8細胞系相關產品:IPI-2I細胞、RA 1細胞、FHs 74 Int細胞
ECC 10細胞系相關產品:LC1-Sq細胞、HCC-2218細胞、HEEpiC細胞
AG06814-J細胞系相關產品:BAC1.2F5細胞、Pt K2細胞、LWnt-3A細胞
KRCY細胞系相關產品:MDCK-II細胞、Ly18細胞、MDA231-LM2細胞
SKNEP1細胞系相關產品:PG-LH7細胞、BV173細胞、HT3細胞
University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞系相關產品:HT 1376.T細胞、OVCAR 433細胞、PANC 1005細胞
MM.1S細胞系相關產品:HCC-1419細胞、C-4I細胞、F36P細胞
NCIH889細胞系相關產品:LS180細胞、SK-HEP-1細胞、FHL 124細胞
RH8994細胞系相關產品:SVGp12細胞、Opossum Kidney細胞、NCI-H3255細胞
R2C Adherent大鼠睪丸間質細胞系
RERF-LC-MS細胞系相關產品:NH6細胞、H-211細胞、RBL-I細胞
HSAEC1-KT細胞系相關產品:SW-403細胞、Duke University 4475細胞、H-1623細胞
H2052細胞系相關產品:K-562細胞、P560細胞、L cells (TK-)細胞
H2052細胞系相關產品:K-562細胞、P560細胞、L cells (TK-)細胞
Roswell Park Memorial Institute 6666細胞系相關產品:BC-019細胞、UM2細胞、LU-65M細胞
HDQ-P1細胞系相關產品:HCT.116細胞、A-673細胞、HIEC細胞
GM07404細胞系相關產品:639-V細胞、Pa017C細胞、OCI/AML-5細胞
Ca761細胞系相關產品:NCIH2170細胞、ST細胞、PTK 1細胞
Astrocyte type I clone細胞系相關產品:NCI-SNU-1細胞、H2.35細胞、SHI1細胞
S3 HeLa細胞系相關產品:MDA-MB 231細胞、MPVECs細胞、Melan-a細胞
DMS273細胞系相關產品:CF PAC-1細胞、CC-LP-I細胞、P-815細胞
MuM-2C細胞系相關產品:Hs688(A)T細胞、Calu6細胞、OV2008細胞
NOZAWA細胞系相關產品:ME180細胞、NCI-SNU-878細胞、HepaRG細胞
Balb/c3T3細胞系相關產品:IPLB-SF 21AE細胞、DLM8細胞、BL6細胞
UT7細胞系相關產品:MEG01細胞、TE-671細胞、T/GHA-VSMC細胞
IGROV-1細胞系相關產品:G361細胞、PC-9/GR細胞、RPE-1細胞
CCD 841 CoTr細胞系相關產品:COLO-320HSR細胞、CHP212細胞、C3H-10T1/2細胞
HOEC細胞系相關產品:HT(H9)細胞、GDM1細胞、EA. hy 926細胞
Huh7.5細胞系相關產品:Hs819.T細胞、L-WRN細胞、Mono Mac6細胞
B-3細胞系相關產品:COLO-738細胞、Hs578Bst細胞、H-2452細胞
NCI-H295R細胞系相關產品:OCI-LY-8細胞、MIA-PaCa-2細胞、NCI-H1954細胞
RL-65細胞系相關產品:U266S細胞、MNNG-HOS (Cl#5)細胞、MDA468細胞
IR 983F細胞系相關產品:MDA-MB-231 #4175細胞、Detroit-562細胞、HCT GEO細胞
PTK 1細胞系相關產品:Medical Research Council cell strain-9細胞、SKRC-42細胞、SHI-1細胞
FLC7細胞系相關產品:GM00346B細胞、OVCAR8細胞、Nb2細胞
DMS79細胞系相關產品:RBL-1細胞、SK MES 1細胞、BGC-823細胞
P3 NS1 Ag4細胞系相關產品:Hs 706.T細胞、National Medical Center-Glioma 1細胞、RCC-10細胞
OCM-1細胞系相關產品:BV-173細胞、GM03320D細胞、Mv1.Lu細胞
NUGC-3細胞系相關產品:H-735細胞、MOLT 16細胞、HTR-8/SV neo細胞
SNU761細胞系相關產品:NCIH1694細胞、H1755細胞、Bac 1.2F5細胞
A-172MG細胞系相關產品:HLEpiC細胞、SKG IIIa細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞
HUT 226細胞系相關產品:HCC-2185細胞、HCoEpiC細胞、CMT 167細胞
KYSE 270細胞系相關產品:HOP92細胞、Hs739T細胞、G-361細胞
M3 Clone M-3細胞系相關產品:HMy2.CIR細胞、HN-6細胞、T/G HA-VSMC細胞
FLC7細胞系相關產品:GM00346B細胞、OVCAR8細胞、Nb2細胞
C166細胞系相關產品:MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、NCI-SNU-601細胞、NCI-H847細胞
Kit225-K6細胞系相關產品:NCI-H358細胞、Okayama University Medical School-27細胞、HeLa.S3細胞
PLA 802細胞系相關產品:MCF-7ADR細胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞、MGH-UI細胞
SW1088細胞系相關產品:P3X63NS1細胞、SUDHL-2細胞、SW-1573細胞
GM17219細胞系相關產品:SUM159細胞、BT483細胞、Hs-852-T細胞
COLO.205細胞系相關產品:PC3細胞、RCM1細胞、NCI-1155細胞
MDST8細胞系相關產品:NCIH2286細胞、A-704細胞、MBdSMC細胞
R2C Adherent大鼠睪丸間質細胞系
AR-42J細胞系相關產品:SCC4細胞、RAEC細胞、RCC_7860細胞
CEMO-1細胞系相關產品:HCC-1395細胞、MADB 106細胞、NUGC-3細胞
Kit 225-K6細胞系相關產品:3T3-F442A細胞、PIEC細胞、SK-MEL-3細胞
2E8細胞系相關產品:HCT 8細胞、U-87細胞、SKUT1細胞
SUPT-1細胞系相關產品:RIN14B細胞、Hs852T細胞、Cates 1B細胞
Sarcoma OSteogenic-2細胞系相關產品:8305C_1細胞、MZ-CRC-1細胞、MC116細胞
H2172細胞系相關產品:alphaTC clone 6細胞、Med 341細胞、MKN74細胞
SK Hep1細胞系相關產品:D-324MED細胞、Murine Lung Epithelial-12細胞、CCD841CoTr細胞
GM00637H細胞系相關產品:A101D細胞、SUDHL16細胞、IM-95細胞
NCI-H1395細胞系相關產品:NCI-HUT-520細胞、Monomac-1細胞、SHEP1細胞
RIN-m5F細胞系相關產品:NCIN87細胞、MCF 7細胞、TE11細胞
HCC95細胞系相關產品:RN-c細胞、FM-88細胞、BCaP 37細胞
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