"KYSE-50 Adherent低分化人食管鱗癌細胞系
細胞背景資料:食管鱗癌;男性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
一般使用trypsin-EDTA 濃度為0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液濃度過高時,易造成培養(yǎng)基中細胞碎片增多,黑渣子增多,常規(guī)細胞傳代時建議用0.05%的胰酶進行消化,對于難消化的細胞可采用0.25%胰酶進行消化,細胞密度過高超過80%時,采用分步消化法。胰酶儲存在-20°C,解凍在4°C進行,次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中,保存于-20°C,避免反復冷凍解凍造成trypsin之活性降低,并可減少污染之機會。胰酶消化的程度是細胞培養(yǎng)中的一個關鍵步驟:消化過度細胞碎片增多,黑渣子增多,細胞會成片脫落,嚴重影響細胞活性,并有部分細胞漂浮,隨棄去的胰酶流失;消化不足則細胞難于從瓶壁上吹下,反復吹打同樣也會損傷細胞活性。不同細胞對消化液的敏感性不同,胰酶消化的時間也會有差異。胰酶消化時間與胰酶的濃度,是否含EDTA,胰酶的儲存時間,胰酶的儲存溫度,是否反復凍融,消化加入的胰酶體積,消化溫度及細胞的密度有關。對于新購買的細胞,建議客戶先用低濃度的胰酶仔細去摸索一下消化時間,可每隔1分鐘鏡下觀察細胞是否變圓,記錄消化時間,下一次操作參考之前的記錄來控制時間即可。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
KYSE-50 Adherent低分化人食管鱗癌細胞系
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇:細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-196℃液氮中,儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融?!緝龃婕毎浚?選對數增生期細胞(證明無支原體污染),在凍存前1d換液;2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液,計數,使細胞密度達5×10/ml左右密度,離心,去上清;3)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑10%二甲基亞砜(DMSO)或甘油,可使冰點降低,使細胞內水分在凍結前透出細胞外;4)分裝于無菌凍存管中,每管加1.5m懸液;5)旋好凍存管并仔細檢查,一定要蓋緊,做好標記;6)凍存:在特殊的儀器或簡易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min時間內,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度,過快能影響細胞內水分透出,太慢則促進冰晶形成。操作時應戴防護眼鏡和手套,以免液氮凍傷?!緩吞K細胞】1)從罐中取出凍存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不時搖動,使其急速融化,30~60s內完成;3)凍存管用70%酒精擦拭消毒后,打開蓋子,用吸管將細胞懸液注入離心管中,再滴加10ml培養(yǎng)液;4)低速離心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培養(yǎng)液洗一次;5)用培養(yǎng)液適當稀釋后,裝入培養(yǎng)瓶37℃培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后,繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數量要充分,密度應達到10/ml,在融后稀釋20倍時,仍能保持5×10/ml數量。
AHH1細胞系相關產品:GOTO細胞、DKMG細胞、NCI-HUT-596細胞
AE 1201細胞系相關產品:Ly10細胞、L-5178-Y細胞、SNU-1040細胞
HT-1197細胞系相關產品:766T細胞、GA-10 (Clone 4)細胞、HCT-8/V細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
L615細胞系相關產品:GM02132C細胞、KOSC-2細胞、Earles's cells細胞
DMS273細胞系相關產品:CF PAC-1細胞、CC-LP-I細胞、P-815細胞
KFB細胞系相關產品:YAC-1細胞、KYSE0030細胞、TK-10細胞
細胞生長特性:貼壁
KYSE-50 Adherent低分化人食管鱗癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:1)CO2培養(yǎng)箱:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要;2)烘箱(干燥箱):用于細胞培養(yǎng)的一些器械、器皿必須烘干后才能使用,玻璃器皿等須干熱消毒。干熱消毒時,烘箱內溫度一般要達到160℃以上,通常使用鼓風式烘箱。其優(yōu)點是溫度均勻、效果較好,缺點是升溫過程較慢。升溫時不能先升溫后鼓風而應鼓風與升溫同時開始,至100℃時,停止鼓風。需注意避免包裹器皿的紙或棉花燒焦,燒焦的碎屑可影響細胞的生長。消毒后不能立即打開箱門,以免驟冷導致玻璃器皿破裂,應等溫度自然下降至100℃以下后可開門。3)超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。4)液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。5)超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉放-20℃ 1 hour,再轉入-70至-80℃過夜,之后才可以轉移到液氮內(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。6)恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾毎麅龃婀苄枰⒓捶庞冢常贰嫠≈锌焖購吞K之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。7離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內容物的分離則需要高速冷凍離心機。除上述儀器外,移液器、高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡、熒光顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。
CMEC/D3細胞系相關產品:DB細胞、GM00215A細胞、FBHE細胞
MIA PaCa-2細胞系相關產品:NCI H82細胞、SP2細胞、DoTc2-4510細胞
293 c18細胞系相關產品:NCI-SNU-668細胞、HPAF-I細胞、A431/P細胞
SGC7901細胞系相關產品:Daoy細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞、MDA-415細胞
Vero 76 clone E6細胞系相關產品:EFO 27細胞、HMCB細胞、PaTu-8988s細胞
SF-295細胞系相關產品:HSMC細胞、SUM-149PT細胞、Ly8細胞
MCF7-CTRL細胞系相關產品:SK HEP-1細胞、RS411細胞、Caco-2細胞
Neuro 2a細胞系相關產品:A10細胞、HCC-95細胞、OLN 93細胞
PC9細胞系相關產品:CNE1細胞、HME-1細胞、SU-DHL-6細胞
Y1細胞系相關產品:CaSki細胞、28SC細胞、LS-123細胞
SK_N_BE2C細胞系相關產品:MSTO-211 H細胞、NCI-H865細胞、NCIH2126細胞
WERI-Rb 1細胞系相關產品:C4-2細胞、RK13細胞、Y3-Ag1,2,3細胞
bEnd.3[BEND3]細胞系相關產品:H1819細胞、FL83B細胞、BC3 H1細胞
KYSE-50 Adherent低分化人食管鱗癌細胞系
QBC-939細胞系相關產品:RC13細胞、TSUpr1細胞、P31/Fujioka細胞
NCI-H146細胞系相關產品:B16-F10細胞、HCC1143細胞、DLD-1細胞
RCCJF細胞系相關產品:HSC-1細胞、UMUC1細胞、CLONE M3細胞
RCCJF細胞系相關產品:HSC-1細胞、UMUC1細胞、CLONE M3細胞
Leukemia L1210細胞系相關產品:Normal Rat, August 3, 1983細胞、NCI.H226細胞、HCGC細胞
HCC1171細胞系相關產品:Wistar Institute-38細胞、MiaPaCa-2細胞、DSL-6A/C1細胞
DMS 153細胞系相關產品:Hs852T細胞、CHO細胞、T/G HA VSMC細胞
RPMI 7951細胞系相關產品:X63.Ag8.653細胞、BEAS 2B細胞、SU-DHL-4細胞
Hs27F細胞系相關產品:LWnt3A細胞、IPLB-Sf21-AE細胞、HLEpiC細胞
VeroC1008細胞系相關產品:Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、CEMO-1細胞、EST81細胞
MDAMB231細胞系相關產品:MUTZ-1細胞、PANC-08-13細胞、H128細胞
mRTEC細胞系相關產品:MOLM-14細胞、MES13細胞、LL2細胞
PA-TU S細胞系相關產品:NCI-H322T細胞、IMR 32細胞、NCI-ADR-RES細胞
PAMC82細胞系相關產品:mousepodocyte細胞、RIN14B細胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞
SNU5細胞系相關產品:NCI-SNU-C2B細胞、Hela-Ap-1細胞、HEK 293-EBNA細胞
HIT-T15細胞系相關產品:SMA560細胞、H747細胞、SNU886細胞
Wayne State University-Head and Neck 13細胞系相關產品:NU-GC-4細胞、ND7/23細胞、H1792細胞
HT-3細胞系相關產品:TE353.SK細胞、SK-N-BE2細胞、WM-239細胞
3396細胞系相關產品:MDA MB 361細胞、Panc 05.04細胞、PC-3M-2B4細胞
AtT 20細胞系相關產品:HN13細胞、A549/ATCC細胞、MCF7/WT細胞
NCI H548細胞系相關產品:HCC 38細胞、MDAMB175VII細胞、AQ-Mel細胞
NCI-H1648細胞系相關產品:CT26-clone 25細胞、UPCI:SCC154細胞、MSTO-211H細胞
HEM-L細胞系相關產品:Z310細胞、SU.86.86細胞、ECC-12細胞
U343細胞系相關產品:HEK AD293細胞、FO [Mouse myeloma]細胞、SKNBE(2)細胞
KS-SLK細胞系相關產品:SNU-668細胞、Mink Lung細胞、Nthy-ori 3-1細胞
SUM159細胞系相關產品:DH-82細胞、GM02132C細胞、SK-RC 42細胞
MAVER細胞系相關產品:HuH 6細胞、FL-83B細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞
HOP-92細胞系相關產品:L-WRN細胞、SCC25細胞、LA-N-6細胞
SKRC-39細胞系相關產品:H1155細胞、SPDC-CCL141細胞、MOLT-3細胞
JB 6細胞系相關產品:H1417細胞、16-HBE細胞、FC33細胞
OC-316細胞系相關產品:ZR75_1細胞、HT-115細胞、alpha-TC1.6細胞
SKBr3細胞系相關產品:Hs-281-T細胞、HFTF細胞、OAW 42細胞
U373MG細胞系相關產品:TE85細胞、C127細胞、CHP126細胞
COV504細胞系相關產品:H341細胞、Rh30細胞、Hs 27細胞
NCI-H2196細胞系相關產品:MA-104細胞、6-10B細胞、H-1915細胞
Capan 1細胞系相關產品:CAOV3細胞、BHP 10-3細胞、NCI-SNU-5細胞
H-2170細胞系相關產品:WILL-2細胞、Y-79細胞、RN-c細胞
VMM5A細胞系相關產品:CX-1細胞、Fox/NY細胞、7860細胞
CAL 78細胞系相關產品:SNU-387細胞、U138-MG細胞、MB49細胞
OAW-42細胞系相關產品:SKNDZ細胞、Granta519細胞、NCIH2085細胞
HEP-3B2細胞系相關產品:CNE-2Z細胞、OCLY8細胞、KMM-1細胞
OCILY3細胞系相關產品:Madison細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、HEK AD293細胞
KYSE-50 Adherent低分化人食管鱗癌細胞系
SG231細胞系相關產品:K7M2細胞、32Dc3細胞、MRMT-1細胞
T-HSC細胞系相關產品:SNU-119細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、ROS17/2.8細胞
R D細胞系相關產品:CAL 120細胞、MDA-MB-175VII細胞、SUM 149細胞
Tj-905細胞系相關產品:GH 3細胞、COLO678細胞、mousepodocyte細胞
BT 20細胞系相關產品:NCI-HUT-460細胞、NE-4C細胞、NCI-H2122細胞
Human Hepatocyte Line 5細胞系相關產品:COLO206F細胞、NB.4細胞、Huh7.5細胞
HC-11細胞系相關產品:Hca-F細胞、BT-483細胞、KATO 3細胞
IBRS-2細胞系相關產品:Lewis Lung Cancer細胞、OV2008細胞、NCIH1092細胞
HepG2-luc細胞系相關產品:SKNO1細胞、TE 671細胞、NRK clone 49F細胞
ZR-75-30細胞系相關產品:EBC-1/original細胞、HCMEC(BL12-H)細胞、L-5178-Y-R細胞
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞系相關產品:OVCAR-5細胞、NSC-34細胞、BE(2)-M17細胞
293 c18細胞系相關產品:NCI-SNU-668細胞、C666-1細胞、NCI H226細胞
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