"NL20 Adherent人支氣管上皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：支氣管上皮細(xì)胞；SV４０轉(zhuǎn)化；女性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞，顯微鏡下觀察，待細(xì)胞變圓，細(xì)胞間隙明顯，部分細(xì)胞剛開(kāi)始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細(xì)胞小心吹打下來(lái)，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細(xì)胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時(shí)，將細(xì)胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長(zhǎng)，此時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好，當(dāng)補(bǔ)液時(shí)，需避免反復(fù)吹打。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
NL20 Adherent人支氣管上皮細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代注意事項(xiàng)：①傳代培養(yǎng)時(shí)注意無(wú)菌操作并防止細(xì)胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作。每種細(xì)胞使用一套器材；②每天觀察細(xì)胞形態(tài)，掌握好細(xì)胞是否健康的標(biāo)準(zhǔn)：健康細(xì)胞的形態(tài)飽滿，折光性好，生長(zhǎng)致密時(shí)即可傳代；③如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染跡象，應(yīng)立即采取措施，一般應(yīng)棄置污染的細(xì)胞，如果必須挽救，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復(fù)清洗，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素，并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細(xì)胞的建系和維持：細(xì)胞系的維持通過(guò)換液傳代再換液、再傳代和細(xì)胞種子凍存來(lái)實(shí)現(xiàn)。對(duì)每一個(gè)細(xì)胞系來(lái)說(shuō)都有其自身的特點(diǎn)，要做好建系的維持必須記錄好細(xì)胞檔案,換液傳代和做好細(xì)胞系的管理工作。培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇：細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-１９６℃液氮中，儲(chǔ)存時(shí)間幾乎是無(wú)限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。
HCT.116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SO-Rb 50細(xì)胞、P3-X63-Ag8-653細(xì)胞、SHSY-5Y細(xì)胞
MS751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS1細(xì)胞、EJ 138細(xì)胞、HEK-293 c18細(xì)胞
SNU-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NGP細(xì)胞、GLAG-66細(xì)胞、Ly7細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
NTera 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N1E115細(xì)胞、NK62a細(xì)胞、NCI-H295細(xì)胞
RDES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT 78細(xì)胞、U-373-MG細(xì)胞、C-Lu-65細(xì)胞
CG-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 4.03細(xì)胞、K562/ADP細(xì)胞、H647ell細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
NL20 Adherent人支氣管上皮細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
傳代細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)：１)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過(guò)短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過(guò)高時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟：瘤細(xì)胞懸液接種１)無(wú)菌選取生長(zhǎng)良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長(zhǎng)期培養(yǎng)瘤細(xì)胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過(guò)濾成細(xì)胞懸液；３)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至１０(７)～１０(８)/ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(０.１ml/部位，＞１０(６)細(xì)胞)。初次接種成功率低，細(xì)胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動(dòng)物一般情況。初次接種一般有一段較長(zhǎng)的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的時(shí)間。腹水瘤的建立與腹水瘤的接種：將實(shí)體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細(xì)胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時(shí)，腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過(guò)程如下：１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)；２)消毒動(dòng)物，左下腹穿刺接種１×１０(６)腹水瘤細(xì)胞；３)接種腹水瘤細(xì)胞后約７-１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號(hào)針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３-５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
HSCT6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LSECs細(xì)胞、BI-Mel細(xì)胞、SVGp12細(xì)胞
SU86_86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL-I細(xì)胞、Melan-a細(xì)胞、L-Wnt3A細(xì)胞
CTV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞、T-98G細(xì)胞、FLS細(xì)胞
Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞、201T細(xì)胞、Hs695T細(xì)胞
Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST486細(xì)胞、VP303細(xì)胞、3T3-J2細(xì)胞
HM06.A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H847細(xì)胞、H2029細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞
C32r細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB19細(xì)胞、HEI193細(xì)胞、SF763細(xì)胞
H676B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM T4細(xì)胞、AN3細(xì)胞、ROS1728細(xì)胞
MS751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS1細(xì)胞、EJ 138細(xì)胞、HEK-293 c18細(xì)胞
G-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118MG細(xì)胞、U-87MG細(xì)胞、HCMEC細(xì)胞
HSC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61 5.3細(xì)胞、HLMVEC細(xì)胞、HT1376細(xì)胞
UCH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBZY1細(xì)胞、H-650細(xì)胞、P3J HR1-K細(xì)胞
HFL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3細(xì)胞、COLO-684細(xì)胞、SKO-007細(xì)胞
NL20 Adherent人支氣管上皮細(xì)胞系
Hs840T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BTI-Tn5B14細(xì)胞、NCI H548細(xì)胞、HT-55細(xì)胞
870細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1650細(xì)胞、BTI-Tn5B14細(xì)胞、EFO 27細(xì)胞
N-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK15細(xì)胞、MSF細(xì)胞、CG4細(xì)胞
OVCA 433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Japanese Tissue Culture-28細(xì)胞、HPAF-II細(xì)胞、H-1944細(xì)胞
H-810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-42細(xì)胞、COLO-320DM細(xì)胞、H 9細(xì)胞
HUTU80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-LMS-1細(xì)胞、IPECJ2細(xì)胞、PCI-SG231細(xì)胞
HTh-74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel-MeWo細(xì)胞、HSC-I細(xì)胞、YD-15細(xì)胞
Hs-600-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1781細(xì)胞、TMK1細(xì)胞、FM88細(xì)胞
SK-MEL-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO cell clone K1細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞、PC 61.5.3細(xì)胞
SupB15WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1944細(xì)胞、IGROV 1細(xì)胞、ME 180細(xì)胞
NCIH1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CW2細(xì)胞、SUM52PE細(xì)胞、SVEC 4-10細(xì)胞
Ca Ski細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞、D-407細(xì)胞
Jurkat-E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞、WM-451Lu細(xì)胞、NIH 3T6細(xì)胞
NCI-H1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1618細(xì)胞、COLO-1細(xì)胞、T 24細(xì)胞
HCC1008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1588細(xì)胞、REC細(xì)胞、SNU-16細(xì)胞
Human Embryonic Skin細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BeWo細(xì)胞、UMUC3細(xì)胞、SUDHL1細(xì)胞
Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-7721細(xì)胞、H-774細(xì)胞、CaES-17細(xì)胞
CAL85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-684細(xì)胞、GM03569D細(xì)胞、SGC-7901/DDP細(xì)胞
TOV21G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細(xì)胞、PANC-1細(xì)胞、SNU398細(xì)胞
COLO 394細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRPEpiC細(xì)胞、NPC-TW-039細(xì)胞、MHCC 97-L細(xì)胞
NRK52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1500細(xì)胞、SK-MEL-2細(xì)胞、SKNEP1細(xì)胞
SK-Hep1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepatoma 22細(xì)胞、YH細(xì)胞、Mink Lung細(xì)胞
CEM-CCRF (CAMR)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-358細(xì)胞、SKM-1細(xì)胞、Epstein-Barr-3細(xì)胞
beta TC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI1788細(xì)胞、HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞、STTG1細(xì)胞
NCIH2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs840T細(xì)胞、Mino細(xì)胞、IEC6細(xì)胞
mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC/CAR細(xì)胞、HEM-L細(xì)胞、HuH6細(xì)胞
P3X63-Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：8226/S細(xì)胞、PC14細(xì)胞、OV3121細(xì)胞
HEYA8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs675T細(xì)胞、SJRH30細(xì)胞、FET細(xì)胞
MDA-MB-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H28細(xì)胞、3T3 L1細(xì)胞、HEK 293FT細(xì)胞
PANC0327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 L1細(xì)胞、EU-2細(xì)胞、Granta-519細(xì)胞
DI TNC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MXI細(xì)胞、KP-4細(xì)胞、SW948細(xì)胞
LC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1836細(xì)胞、JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞、CO115細(xì)胞
ROS-17/2.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA2B細(xì)胞、COLO 824細(xì)胞、GM03570E細(xì)胞
NS1-Ag4/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHH-CALL2細(xì)胞、MDA-MB-175細(xì)胞、BHK細(xì)胞
Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEH2細(xì)胞、CA46細(xì)胞、B95-8細(xì)胞
H-2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sf21細(xì)胞、KMB17細(xì)胞、Huh-7細(xì)胞
WM266-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeT 5A細(xì)胞、OUMS23細(xì)胞、SGC7901細(xì)胞
U2932細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL95細(xì)胞、Rat-1細(xì)胞、HUT-226細(xì)胞
ReNcell CX細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HM06.A1細(xì)胞、U251MG細(xì)胞、P3-x63-Ag8 653細(xì)胞
COLO678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30 OHK細(xì)胞、PANC403細(xì)胞、H9細(xì)胞
THP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBVP細(xì)胞、WM115-mel細(xì)胞、MUTZ3細(xì)胞
C33-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly03細(xì)胞、A-498細(xì)胞、NGP細(xì)胞
NL20 Adherent人支氣管上皮細(xì)胞系
143B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM2細(xì)胞、Hs-695-T細(xì)胞、V 79-4細(xì)胞
LA 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/G HA-VSMC細(xì)胞、Fao細(xì)胞、BC3H-1細(xì)胞
Mc Coy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHs74 Int細(xì)胞、526細(xì)胞、KASUMI1細(xì)胞
CCC-HHM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL40細(xì)胞、NCIH2171細(xì)胞、CCD19-Lu細(xì)胞
NCI660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：87 MG細(xì)胞、NCI-H23細(xì)胞、MV 4;11細(xì)胞
MPC11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GalK 1細(xì)胞、H1238細(xì)胞、CF-PAC1細(xì)胞
Panc 05.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMST6細(xì)胞、CMEC/D3細(xì)胞、NUGC-4細(xì)胞
RSC96細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞、H-322細(xì)胞、Y 1細(xì)胞
H-2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VB細(xì)胞、KE-39細(xì)胞、KP-N-RT-BM細(xì)胞
RT-BM 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B95.8細(xì)胞、COR-L51細(xì)胞、LS-123細(xì)胞
CTLL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa-S3細(xì)胞、L-cells細(xì)胞、KG-1細(xì)胞
CTV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞、ketr 3細(xì)胞、GM00637細(xì)胞
"