"CAL-78 Adherent人軟骨肉瘤細胞系
細胞背景資料：軟骨肉瘤；男性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒有搖勻，或者放入時搖勻，但在細胞貼壁前，又移動了培養(yǎng)瓶，頻繁開關培養(yǎng)箱引起的振動或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過少，培養(yǎng)箱擱板表面不平整，這些因素會導致細胞生長不均勻。研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。運輸過程對細胞有嚴重影響。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C 太久。一些懸浮細胞抱團生長是正?，F(xiàn)象，大部分懸浮細胞在細胞密度很高的情況下，很可能會出現(xiàn)部分細胞抱團生長的現(xiàn)象，聚團細胞很容易死亡并演化成絮狀物，殃及周圍的懸浮細胞，因此在培養(yǎng)懸浮細胞時需控制好細胞密度。如果出現(xiàn)了細胞團，可以通過細胞篩去掉部分較大的細胞團，也可以嘗試一下方法：將細胞懸液收集到15ml離心管中，靜置20min左右，小心取上層細胞上清培養(yǎng)（該方法只能去除部分較大的細胞團）。部分細胞本身存在一定的空泡（如HepG2，Ishikawa及一些耐藥株等），這個是正?，F(xiàn)象。如果只有少數(shù)細胞有內(nèi)出現(xiàn)極少空泡，則很可能是細胞狀態(tài)不佳，可以通過調(diào)整血清濃度，控制消化，控制傳代比例及時間等方法來調(diào)整細胞狀態(tài)；如果大部分細胞出現(xiàn)空泡，且單個細胞內(nèi)空泡數(shù)目偏多，則可能細胞代次較高，細胞老化所致，需更換代次較早的細胞。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
CAL-78 Adherent人軟骨肉瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以１：２或１：２以上的比例轉(zhuǎn)移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞，可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代，部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟：①入無菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液３７℃下預熱；③超凈臺臺面應整潔，用７５%酒精棉球擦拭清潔；④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面２０min左右，關閉紫外燈，打開風機清潔空氣除去臭氧；⑤點燃酒精燈;取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi)；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用７５%酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個大培養(yǎng)瓶加入１ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使細胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復吹打消化好的細胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成細胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋，適度擰緊后稍回轉(zhuǎn)，以利于CO２的進入，將培養(yǎng)瓶放回CO２培養(yǎng)箱；⑩對懸浮培養(yǎng)細胞，步驟７-９不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。
HEM細胞系相關產(chǎn)品：SW 1116細胞、KASUMI6細胞、NCI-446細胞
SK-N-FI細胞系相關產(chǎn)品：Tb 1 Lu細胞、P3/X63/Ag8細胞、MCF 10A細胞
LM6細胞系相關產(chǎn)品：NFS 60細胞、NCI-H735細胞、P30-OHKUBO細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MDA MB 436細胞系相關產(chǎn)品：U266-B1細胞、EAC-E2G8細胞、KM12-SM細胞
Bac 1.2F5細胞系相關產(chǎn)品：130-T細胞、K422細胞、NTERA-2cl.D1細胞
LU165細胞系相關產(chǎn)品：WIL2-S細胞、hMSC-BM細胞、HCT 116細胞
細胞生長特性：貼壁
CAL-78 Adherent人軟骨肉瘤細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
養(yǎng)科研細胞是生物醫(yī)學研究的基本功。有三個小經(jīng)驗可以和大家分享一下：１)不要燒瓶口。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關瓶子，覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑？知道為什么嗎？燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時候，熾熱的空氣進入瓶內(nèi)。塞緊塞子放入冰箱后，空氣變冷，壓力驟降，培養(yǎng)基中的碳酸就會轉(zhuǎn)化成二氧化碳，釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了，當然會變堿。如果不燒瓶口的話，你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢。(當然多多少少還是會有一點越用越堿，因為室溫還是比冰箱內(nèi)的溫度高)，其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下，你會發(fā)現(xiàn)根本就不會燒疼。如果有細菌的話，這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細菌，除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內(nèi)從來就不燒瓶口。來以后發(fā)現(xiàn)這里更徹底，超凈臺內(nèi)根本就不點酒精燈；２)不要頻繁看細胞。對于初學者而言，養(yǎng)細胞就像養(yǎng)孩子一樣，有空就要去看看。細胞越是養(yǎng)不好，就越是經(jīng)常去看。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處，特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后，密度特別低的細胞。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍，形成有利于生長的局部環(huán)境。你跑去看細胞，培養(yǎng)瓶這么一晃，把因子都給晃散了。經(jīng)?？梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇毎?，細胞老是長不好。老手細胞一扔好幾天不管，細胞瘋長；３)不要怕消化。在傳代的時候，初學者往往生怕細胞消化過度，早早地終止消化。細胞沒下來就使勁吹燈，吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來，用力吹打?qū)毎膿p傷比消化更大。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r候，３７度消化過夜，細胞也沒事。我一般是等細胞完全變圓后才中止消化。細胞輕輕一晃就能下來。還有，動作要輕柔，盡量不要產(chǎn)生氣泡。氣泡在破裂時的機械應力相當大，對細胞的傷害也是很大的。
LLC細胞系相關產(chǎn)品：SK-RC 52細胞、Eca 109細胞、OCI-AML-2細胞
NCI-H2009細胞系相關產(chǎn)品：CHP 212細胞、LS 174T細胞、WEHI3細胞
A375-SM細胞系相關產(chǎn)品：RT4-D6-P2T細胞、HepG2細胞、NCI-H165細胞
Lu-65細胞系相關產(chǎn)品：LO2細胞、NCIH661細胞、MDAMB175細胞
OCI AML5細胞系相關產(chǎn)品：H-1693細胞、Hs-688A-T細胞、X63Ag8.653細胞
LNCaP細胞系相關產(chǎn)品：Y79細胞、CCK81細胞、PE/CA-PJ34細胞
NCI-H524細胞系相關產(chǎn)品：DHL8細胞、IMR32細胞、UPCI-SCC090細胞
MDAMB453細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-436細胞、H-1651細胞、SK-ML2細胞
HeLa S 3細胞系相關產(chǎn)品：YD-38細胞、C2BBe 1細胞、L-363細胞
P3J-HR-1細胞系相關產(chǎn)品：HFF1細胞、HIEC6細胞、MCF7-GFP細胞
NuTu-19細胞系相關產(chǎn)品：SUP-B15細胞、WI 38細胞、Tb 1-Lu細胞
NCIN87細胞系相關產(chǎn)品：H1876細胞、NCIH841細胞、NCI-H2405細胞
FRhK-4細胞系相關產(chǎn)品：IEC-18細胞、EA hy 926細胞、WEHI-164細胞
CAL-78 Adherent人軟骨肉瘤細胞系
Hs746T細胞系相關產(chǎn)品：CEMC1細胞、TE-6細胞、U-87細胞
RPMI8226/S細胞系相關產(chǎn)品：HFL-1細胞、SMA-560細胞、BEL7404細胞
HT-55細胞系相關產(chǎn)品：BT-474細胞、NS1/1-Ag4.1細胞、HLEB-3細胞
HT-55細胞系相關產(chǎn)品：BT-474細胞、NS1/1-Ag4.1細胞、HLEB-3細胞
DMS153細胞系相關產(chǎn)品：PL-9細胞、NCI-H1819細胞、SK-Mel1細胞
VM Cub 1細胞系相關產(chǎn)品：INS1E細胞、HLEpiC細胞、22Rv1細胞
HCC1937細胞系相關產(chǎn)品：JROECL 21細胞、SHSY-5Y細胞、DMS53細胞
H1105細胞系相關產(chǎn)品：CHP 126細胞、SW579細胞、D-324MED細胞
J 82細胞系相關產(chǎn)品：RK-13細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、REC細胞
COLO320/DM細胞系相關產(chǎn)品：Pro-Lec1.3C細胞、Jurkat-FHCRC細胞、GOTO細胞
U251n細胞系相關產(chǎn)品：IM-9細胞、NCIH748細胞、H-1672細胞
OVMANA細胞系相關產(chǎn)品：SK-MEL-5細胞、LIXC-002細胞、PA317細胞
MDA1386細胞系相關產(chǎn)品：BT-549細胞、CEM/C1細胞、MN-60細胞
NCI-H1819細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2110細胞、KYSE 510細胞、CNE1細胞
33604細胞系相關產(chǎn)品：KMS-18細胞、H-711細胞、U118細胞
NPA87-1細胞系相關產(chǎn)品：SUM 52PE細胞、Y3細胞、HT 1376細胞
HLEC-SRA 01/04細胞系相關產(chǎn)品：Hs675細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、Hs940.T細胞
Co-115細胞系相關產(chǎn)品：RIN Cl-5F細胞、HCT-FET細胞、MDAMB415細胞
B16/F10細胞系相關產(chǎn)品：Panc_05_04細胞、CAL 39細胞、HCC366細胞
RBSMC細胞系相關產(chǎn)品：LNCaP-C4-2細胞、MDA MB231細胞、HFT 8810細胞
Pa18C細胞系相關產(chǎn)品：HS-766T細胞、BSC40細胞、NCI-441細胞
TGW細胞系相關產(chǎn)品：Clone Y-1細胞、ARO細胞、RCC-JF細胞
Sci-1細胞系相關產(chǎn)品：Anip-973細胞、EC-9706細胞、ECC 10細胞
LIM-1215細胞系相關產(chǎn)品：PANC0327細胞、CEMx721.174.T2細胞、GM00637F細胞
SKml2細胞系相關產(chǎn)品：P3/X63-Ag8細胞、C-32細胞、MOLM16細胞
SK MEL-28細胞系相關產(chǎn)品：Mv 1 Lu細胞、SK-ChA1細胞、RGCs細胞
NCIH1703細胞系相關產(chǎn)品：NK-10A細胞、Hs 683細胞、A-172MG細胞
C-6細胞系相關產(chǎn)品：MRC9細胞、JIMT細胞、GM-637細胞
SLMT-1細胞系相關產(chǎn)品：L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、SNU1細胞、BV173細胞
AQ-Mel細胞系相關產(chǎn)品：SUM149PT細胞、NCI522細胞、Jurkat E6.1細胞
RPMI1846細胞系相關產(chǎn)品：KYSE50細胞、RSC-96細胞、HASMC細胞
HCM細胞系相關產(chǎn)品：HEK-AD293細胞、AG 9細胞、WIL2-S細胞
A-704細胞系相關產(chǎn)品：CEM C7細胞、HCV29細胞、NCI-H676B細胞
HEY-A8細胞系相關產(chǎn)品：H1395細胞、SNU520細胞、CHO cell clone K1細胞
TE3A細胞系相關產(chǎn)品：U266B1細胞、HOSEpiC細胞、A172細胞
OCIAML3細胞系相關產(chǎn)品：BetaTC6細胞、GM2132細胞、HS-5細胞
JROECL21細胞系相關產(chǎn)品：OsA-CL細胞、HCMEC(BL12-H)細胞、EBC-1/original細胞
Spodoptera frugiperda clone 9細胞系相關產(chǎn)品：IPLB-Sf21細胞、VP 267細胞、KBM5細胞
SHI-1細胞系相關產(chǎn)品：T24(ECV304)細胞、C32r細胞、A 172細胞
MV4-11細胞系相關產(chǎn)品：EBTr (NBL-4)細胞、AC16 [Human hybrid]細胞、SKLU01細胞
BTI-Tn-5B1-4細胞系相關產(chǎn)品：RMC細胞、H1581細胞、OKT 3細胞
SGC996細胞系相關產(chǎn)品：HEI-193細胞、HDF-a細胞、SNU-407細胞
CAL-78 Adherent人軟骨肉瘤細胞系
TOV-112細胞系相關產(chǎn)品：SW-626細胞、RWPE2細胞、RCSMC細胞
SL1細胞系相關產(chǎn)品：Cates-1B細胞、NCI-H2347細胞、TFK1細胞
EOC-20細胞系相關產(chǎn)品：SU-DHL-10細胞、KYSE-30細胞、MTC-TT細胞
NCI-H2087細胞系相關產(chǎn)品：SW962細胞、2B4細胞、KYSE30細胞
GM03570E細胞系相關產(chǎn)品：SU-DHL-2細胞、WM-239A細胞、Lu-165細胞
DR2R1610細胞系相關產(chǎn)品：253J細胞、50.B1細胞、Tregs細胞
HS688AT細胞系相關產(chǎn)品：OPM2細胞、COV 504細胞、Adeno 293細胞
H2342細胞系相關產(chǎn)品：HGE細胞、3AA細胞、MC 3T3-E1細胞
NUGC-3細胞系相關產(chǎn)品：H-735細胞、MOLT 16細胞、HTR-8/SV neo細胞
NCI-H2170細胞系相關產(chǎn)品：Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、L5178Y-R細胞、IAR 20細胞
EBTr細胞系相關產(chǎn)品：RWPE2細胞、U-251MG細胞、RBL.2H3細胞
A375-SM細胞系相關產(chǎn)品：RT4-D6-P2T細胞、Hs840T細胞、CCD-1112sk細胞
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