"624-mel Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:黑色素瘤;男性
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
傳代24h-48h處于對數(shù)期的細(xì)胞,在凍存前24h換液;按照常規(guī)方法消化,離心,收集細(xì)胞沉淀;用血清重懸細(xì)胞沉淀,用血球計數(shù)板或者細(xì)胞計數(shù)儀進(jìn)行細(xì)胞計數(shù);配制細(xì)胞凍存液,將凍存液加到細(xì)胞液中,吹打混勻,控制細(xì)胞密度為2×10(6)-5×10(6)/ml;將細(xì)胞懸液按照1ml/支分裝至已標(biāo)記好的凍存管中,旋緊管蓋;將凍存管放入程序凍存盒中,凍存盒立即移至-80°C冰箱中,過夜后將凍存細(xì)胞移至液氮中長期保存。凍存管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般不低于2x10(6)cells/ml/vial,融合瘤細(xì)胞則以5x10(6)cells/ml/vial為宜。細(xì)胞凍存和復(fù)蘇遵循“慢凍快溶”的原則。取出冷凍管后,須立即放入37°C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管之爆裂。細(xì)胞凍存時細(xì)胞狀態(tài)不佳,會嚴(yán)重影響復(fù)蘇時細(xì)胞的活率。一般選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存,凍存前一天細(xì)胞進(jìn)行換液;消化過度也會嚴(yán)重影響細(xì)胞凍存后復(fù)蘇的活率;凍存細(xì)胞時為按照溫度梯度進(jìn)行操作,會嚴(yán)重影響細(xì)胞活率。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
624-mel Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)方面注意的幾點:無菌意識要強(qiáng):實驗進(jìn)行前,超凈臺以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟超凈工作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株,以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置,其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以70%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細(xì)胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻(xiàn)可能對相同的細(xì)胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞,有文獻(xiàn)就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴模@種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時,我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升高到56℃后計時,一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補(bǔ)體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因為會造成沉淀物之顯著增多,且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細(xì)胞的影響。
P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SIRC細(xì)胞、VERO C 1008細(xì)胞、H-2122細(xì)胞
2E8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT 8細(xì)胞、U-87細(xì)胞、SKUT1細(xì)胞
Hs870T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JG細(xì)胞、NCI-H748細(xì)胞、SK-MEL-1細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Lu-165細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEY A8細(xì)胞、HuO9細(xì)胞、HCC 70細(xì)胞
GM2131細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-112細(xì)胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞、PIEC細(xì)胞
HPAF-II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Reh細(xì)胞、DMS114細(xì)胞、A375-SM細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁
624-mel Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后,需要進(jìn)行分離培養(yǎng),否則細(xì)胞會因生存空間不足或密度過大,營養(yǎng)障礙,影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株),可以進(jìn)行細(xì)胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料,便于實驗。傳代細(xì)胞培養(yǎng)操作步驟:1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液;2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進(jìn)行消化,2-5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后,應(yīng)立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶內(nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液,按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞,使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時動作要輕柔,以防用力過猛損傷細(xì)胞;6)用計數(shù)板計數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng);7)細(xì)胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般2-3d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液。
NK92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC5細(xì)胞、PC-9/S1細(xì)胞、N1S1細(xì)胞
RIN14B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFSC-8B細(xì)胞、SCC-15細(xì)胞、LC-1-sq細(xì)胞
HCC 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC1469細(xì)胞、Ku812細(xì)胞、NCI-H2171細(xì)胞
AU-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO-AS45-1細(xì)胞、B 95-8細(xì)胞、NCI-157細(xì)胞
MCF.10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEP-3B2細(xì)胞、P1-Raji細(xì)胞、F442A細(xì)胞
K562/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LCMS細(xì)胞、PG-4細(xì)胞、HSC-I細(xì)胞
NTHY-ORI3.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hEEC細(xì)胞、Mv1Lu細(xì)胞、HMy2.CIR細(xì)胞
C4-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-II-E-C3細(xì)胞、FRO81-2細(xì)胞、LCD細(xì)胞
Panc813細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero-E6細(xì)胞、HPB-ALL細(xì)胞、SuDHL 2細(xì)胞
SK-N-SH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞、DMS-79細(xì)胞、STC-1細(xì)胞
H-508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLCPK1細(xì)胞、NCIH727細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞
MIA-PaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dakiki細(xì)胞、HSC3細(xì)胞、HCPEpiC細(xì)胞
VP229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1222細(xì)胞、HUT 226細(xì)胞、OCM-1A細(xì)胞
624-mel Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
LN-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGCs細(xì)胞、786-0細(xì)胞、hSCC-25細(xì)胞
BC-027細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOVAS細(xì)胞、SW 620細(xì)胞、CT-26 WT細(xì)胞
MT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-294-T細(xì)胞、BIU87細(xì)胞、DMS273細(xì)胞
MT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-294-T細(xì)胞、BIU87細(xì)胞、DMS273細(xì)胞
MHH-CALL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283MED細(xì)胞、W133細(xì)胞、BE(2)-C細(xì)胞
LTEP-sm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H146細(xì)胞、293/EBNA細(xì)胞、HFL-I細(xì)胞
CCD-33Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMC細(xì)胞、SKNEP-1細(xì)胞、SBC3細(xì)胞
V-79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-5細(xì)胞、H9細(xì)胞、SKM1細(xì)胞
SUNE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM06141B細(xì)胞、NCIH1930細(xì)胞、NCIH446細(xì)胞
Hep2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-660細(xì)胞、hFOB1.19細(xì)胞、LICR-LON-HN6-R細(xì)胞
C666-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AM細(xì)胞、WI-38細(xì)胞、AU-Mel細(xì)胞
Jiyoye細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABC-1細(xì)胞、LNCaP C4-2細(xì)胞、3AO細(xì)胞
Ramos細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL51細(xì)胞、PC-9細(xì)胞、C32 mel細(xì)胞
HEC-1B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPB/ALL細(xì)胞、SW-982細(xì)胞、H226細(xì)胞
NCIH1435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHG-5細(xì)胞、293-GP細(xì)胞、JIII細(xì)胞
HCC2935細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC82細(xì)胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞、OC-3-VGH細(xì)胞
SUM-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG 9細(xì)胞、B16/F0細(xì)胞、HCC 2185細(xì)胞
H-1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF 21細(xì)胞、DAKIKI Clone 1細(xì)胞、U 266細(xì)胞
Caco-2BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 954細(xì)胞、SCC-9細(xì)胞、NCI-H2141細(xì)胞
2PK3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH 3T6細(xì)胞、Lewis-Lung細(xì)胞、NTERA2D1細(xì)胞
A704細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP229細(xì)胞、HFLS細(xì)胞、Hs606細(xì)胞
MDA 435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP2細(xì)胞、A-375.S2細(xì)胞、T47D細(xì)胞
NCI-H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu 212細(xì)胞、SUD4細(xì)胞、CAL 12T細(xì)胞
HCC44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH358細(xì)胞、SF295細(xì)胞、ME1細(xì)胞
H209細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN6細(xì)胞、SKHEP1細(xì)胞、SPCA1細(xì)胞
MDA436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMR106細(xì)胞、HCE-T細(xì)胞、Anip 973細(xì)胞
Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL1細(xì)胞、HEK-293A細(xì)胞、MES 23.5細(xì)胞
VMRC-LCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M059K細(xì)胞、NBL-S細(xì)胞、NCI-H1522細(xì)胞
NCI-H-295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM932細(xì)胞、LN-229細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞
GC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 4細(xì)胞、C57/B6-L細(xì)胞、TSCC1細(xì)胞
Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4細(xì)胞、MESSA-DX5細(xì)胞、RCC4細(xì)胞
T24(ECV304)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Porcine Kidney-15細(xì)胞、Panc 3.27細(xì)胞、DI TNC-1細(xì)胞
IAR20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1222細(xì)胞、WIL2-S細(xì)胞、NCIH1573細(xì)胞
Hs940.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 HEK細(xì)胞、UMNSAH-DF 1細(xì)胞、IGROV細(xì)胞
HEK/EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K 562細(xì)胞、HT3細(xì)胞、NCI-H1693細(xì)胞
ZR75-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSB-1細(xì)胞、SF126細(xì)胞、Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞
TE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC316細(xì)胞、Sf-21細(xì)胞、HCC-1395細(xì)胞
NCIH2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCECs細(xì)胞、L23/P細(xì)胞、ECC1細(xì)胞
P388細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG1細(xì)胞、H-378細(xì)胞、NH-6細(xì)胞
BEAS2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JOSK-M細(xì)胞、MCA 38細(xì)胞、WM-239-A細(xì)胞
NR8383.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH520細(xì)胞、COC1/CDDP細(xì)胞、A2058細(xì)胞
H-446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251-MG細(xì)胞、Hs 888.T細(xì)胞、A9(Hamprecht)細(xì)胞
624-mel Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
HT-144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMC-1細(xì)胞、SU-DH-L5細(xì)胞、Line 522細(xì)胞
TF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chang liver細(xì)胞、Alexander cells細(xì)胞、hTERT RPE1細(xì)胞
A2058細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-480細(xì)胞、AMC-HN8細(xì)胞、A7r5細(xì)胞
18G3.cl 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-216細(xì)胞、NCI H157細(xì)胞、SKGIIIA細(xì)胞
U-138 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH196細(xì)胞、A549/DDP細(xì)胞、VMRCRCZ細(xì)胞
MCA-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MILE SVEN 1細(xì)胞、MOLT 3細(xì)胞、OCI Ly10細(xì)胞
A3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-763細(xì)胞、X63-Ag8-653細(xì)胞、NPA87細(xì)胞
B16/F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H345細(xì)胞、HEK293E細(xì)胞、NCIH1648細(xì)胞
MDA-MB 361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞、HUASMC細(xì)胞、SF-126細(xì)胞
SK-ES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LK 2細(xì)胞、UMNSAH/DF#1細(xì)胞、B958細(xì)胞
CaEs17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63Ag8-653細(xì)胞、JurkatE6-1細(xì)胞、Panc 05.04細(xì)胞
HCC 2185細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1930細(xì)胞、QSG7701細(xì)胞、Ha Fe細(xì)胞
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