"KTCTL-140 Adherent人腎透明細胞癌細胞系
細胞背景資料:腎透明細胞癌;女性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良好,當(dāng)補液時,需避免反復(fù)吹打。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
KTCTL-140 Adherent人腎透明細胞癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
培養(yǎng)細胞的凍存及復(fù)蘇:細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-196℃液氮中,儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融?!緝龃婕毎浚?選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染),在凍存前1d換液;2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液,計數(shù),使細胞密度達5×10/ml左右密度,離心,去上清;3)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑10%二甲基亞砜(DMSO)或甘油,可使冰點降低,使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外;4)分裝于無菌凍存管中,每管加1.5m懸液;5)旋好凍存管并仔細檢查,一定要蓋緊,做好標(biāo)記;6)凍存:在特殊的儀器或簡易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min時間內(nèi),下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度,過快能影響細胞內(nèi)水分透出,太慢則促進冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護眼鏡和手套,以免液氮凍傷?!緩?fù)蘇細胞】1)從罐中取出凍存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不時搖動,使其急速融化,30~60s內(nèi)完成;3)凍存管用70%酒精擦拭消毒后,打開蓋子,用吸管將細胞懸液注入離心管中,再滴加10ml培養(yǎng)液;4)低速離心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培養(yǎng)液洗一次;5)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,裝入培養(yǎng)瓶37℃培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后,繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分,密度應(yīng)達到10/ml,在融后稀釋20倍時,仍能保持5×10/ml數(shù)量。
SGC-7901/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-841CoTr細胞、DHL5細胞、LLCPK1細胞
MeT5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML5細胞、H2066細胞、Mouse Forestomach Carcinoma細胞
MH7A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOK細胞、BHP-10細胞、H1793細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
OKT 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-638細胞、ROS17/2.8細胞、SK-N-BE(2)-M17細胞
NFS 60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO細胞、NCI-SNU-761細胞、Malme3M細胞
HFL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3細胞、COLO-684細胞、SKO-007細胞
細胞生長特性:貼壁
KTCTL-140 Adherent人腎透明細胞癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細胞培養(yǎng)成功以后,需要進行分離培養(yǎng),否則細胞會因生存空間不足或密度過大,營養(yǎng)障礙,影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株),可以進行細胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料,便于實驗。傳代細胞培養(yǎng)操作步驟:1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液;2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進行消化,2-5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后,應(yīng)立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶內(nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液,按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞,使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔,以防用力過猛損傷細胞;6)用計數(shù)板計數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng);7)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般2-3d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。
Calu6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ra #1細胞、RPMI8402細胞、HEK-A細胞
Hs294T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAPCa-2b細胞、DanG細胞、J-82細胞
BCP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M4e細胞、SK-CO-1細胞、IOSE29細胞
TK+/- (clone 3.7.2C)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2106細胞、130 T細胞、PLC-8024細胞
SW527細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R3/1細胞、P3/NS-1細胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞
RPMI 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC1細胞、A204細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞
Astrocyte type I clone細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-1細胞、H2.35細胞、SHI1細胞
CP-70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97-H細胞、SNU-5細胞、UMC-11細胞
Pro-Lec1.3C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3 clone A31細胞、UACC 812細胞、NCI-H1770細胞
RKN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu177細胞、OE33細胞、ECV304細胞
Detroit-562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98細胞、H-35 Reuber細胞、QGP-1細胞
KBM-7/Hap8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEP3B2細胞、GCT0404細胞、4T1-A細胞
HUT 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1666細胞、SNU-475細胞、MEG-01細胞
KTCTL-140 Adherent人腎透明細胞癌細胞系
PLA-801D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP1細胞、PMVEC細胞、NCIH64細胞
Eca109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H283細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞、H1341細胞
IOSE 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-EBNA1細胞、F442A細胞、Hx147細胞
IOSE 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-EBNA1細胞、F442A細胞、Hx147細胞
OVCA420細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H 9細胞、MGH-U1細胞、CEM-CCRF細胞
32D clone3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A9細胞、4T1-A細胞、PANC-02-03細胞
SW-1222細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SEG1細胞、GTL 16細胞、RCK-8細胞
MDA-MB-231-luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品:211H細胞、Co320細胞、HFF1細胞
NPA 87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6TG細胞、32Dcl3細胞、Swiss 3T3細胞
3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-109細胞、NB-4細胞、BDCM細胞
HTSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIM-1215細胞、Ej138細胞、HTori-3細胞
Y79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-1細胞、MAVER細胞、NCI-H211細胞
BEL 7405細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H128細胞、D-341細胞、IOSE80UBC細胞
H841細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 F1細胞、MonoMac1細胞、TE-671細胞
RMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-2細胞、NCI-H1355細胞、Hs343T細胞
HBVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-27細胞、Kelly細胞、OCI AML4細胞
Hs 742.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:High5細胞、H-1435細胞、B16 subline B78細胞
Mino細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EoL-1-cell細胞、LM6細胞、RPMI.8226細胞
FET細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLL-2細胞、N-Tera-2細胞、H-1563細胞
L-M (TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/0細胞、SKGT2細胞、SKG IIIa細胞
WC00044細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293 EBNA細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、MDA-175細胞
B16/F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_05_04細胞、CAL 39細胞、HCC366細胞
HR1K細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 Cl 30-7b細胞、TM-4細胞、IB-RS2細胞
TK.10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa/DDP細胞、ECV-304細胞、TOV112細胞
SW-1353細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AZ521細胞、NCIH146細胞、C42細胞
HCT116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat podocyte細胞、MKN 45細胞、SK-N-BE(2)C細胞
Granta519細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE15細胞、Balb/c 3T3細胞、Ishikawa細胞
H1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2171細胞、PLB-985細胞、HCCLM6細胞
LAD 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-1細胞、SN4741細胞、Hs 746T細胞
X63.Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH211細胞、GC9811-P細胞、NCI-BL1339細胞
SuDHL 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 578.Bst細胞、LS-411細胞、ChaGo K-1細胞
SHI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAG細胞、U266 Bl細胞、LIM1215細胞
NIH:OVCAR-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori:3細胞、HLE-B3細胞、ECC-1細胞
GM3190細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4-11細胞、C17.2細胞、Hep 3B2.1-7細胞
231-luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTT739細胞、HCC-2185細胞、RPE1-hTERT細胞
FRTL-5 Cl 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8.653細胞、HUCEC細胞、MCF-7/AdrR細胞
PTK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCISCC154細胞、CHP 100細胞、GLRK 13細胞
HT115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML-5細胞、SNU5細胞、SKMEL3細胞
COLO-738細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 1846細胞、M3 Clone M-3細胞、GM05862細胞
LSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1703細胞、NIH 3T3細胞、CF-1 MEF細胞
TE14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2 clone 8細胞、OVCAR10細胞、7404細胞
ST486細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GalK1細胞、BNCL-2細胞、CHP100細胞
KTCTL-140 Adherent人腎透明細胞癌細胞系
MIA PaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H82細胞、SP2細胞、DoTc2-4510細胞
PLA802細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CaES-17細胞、HS-5細胞、CCD-19Lu細胞
SW-756細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD-18細胞、H250細胞、PTK2細胞
SK-N-DZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-1847細胞、EC109細胞、BEL 7405細胞
RS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 144細胞、MSTO-211細胞、Namalwa細胞
BE(2)-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H209細胞、MESSA/Dx5細胞、COLO679細胞
NCI-H2291細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1299細胞、OCI-LY-19細胞、H1435細胞
PaTu8988s細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs863T細胞、HCEC-B4G12細胞、HPBALL細胞
H-2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK;293細胞、KM932細胞、HS578細胞
RCC10 RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1187細胞、UT-7細胞、AN3 CA細胞
HOEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT(H9)細胞、CHL1細胞、Centre Antoine Lacassagne-39細胞
BCP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M4e細胞、NU-GC-3細胞、SKNDZ細胞
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