"KTCTL-140 Adherent人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:腎透明細(xì)胞癌;女性
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察,待細(xì)胞變圓,細(xì)胞間隙明顯,部分細(xì)胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細(xì)胞小心吹打下來(lái),1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時(shí),將細(xì)胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長(zhǎng),此時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好,當(dāng)補(bǔ)液時(shí),需避免反復(fù)吹打。
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
KTCTL-140 Adherent人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇:細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-196℃液氮中,儲(chǔ)存時(shí)間幾乎是無(wú)限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。【凍存細(xì)胞】1)選對(duì)數(shù)增生期細(xì)胞(證明無(wú)支原體污染),在凍存前1d換液;2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細(xì)胞制備成懸液,計(jì)數(shù),使細(xì)胞密度達(dá)5×10/ml左右密度,離心,去上清;3)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。凍存細(xì)胞時(shí)培養(yǎng)液中加入保護(hù)劑10%二甲基亞砜(DMSO)或甘油,可使冰點(diǎn)降低,使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細(xì)胞外;4)分裝于無(wú)菌凍存管中,每管加1.5m懸液;5)旋好凍存管并仔細(xì)檢查,一定要蓋緊,做好標(biāo)記;6)凍存:在特殊的儀器或簡(jiǎn)易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min時(shí)間內(nèi),下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度,過快能影響細(xì)胞內(nèi)水分透出,太慢則促進(jìn)冰晶形成。操作時(shí)應(yīng)戴防護(hù)眼鏡和手套,以免液氮凍傷。【復(fù)蘇細(xì)胞】1)從罐中取出凍存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不時(shí)搖動(dòng),使其急速融化,30~60s內(nèi)完成;3)凍存管用70%酒精擦拭消毒后,打開蓋子,用吸管將細(xì)胞懸液注入離心管中,再滴加10ml培養(yǎng)液;4)低速離心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培養(yǎng)液洗一次;5)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,裝入培養(yǎng)瓶37℃培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后,繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進(jìn)行培養(yǎng)。凍存細(xì)胞數(shù)量要充分,密度應(yīng)達(dá)到10/ml,在融后稀釋20倍時(shí),仍能保持5×10/ml數(shù)量。
SGC-7901/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-841CoTr細(xì)胞、DHL5細(xì)胞、LLCPK1細(xì)胞
MeT5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML5細(xì)胞、H2066細(xì)胞、Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞
MH7A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOK細(xì)胞、BHP-10細(xì)胞、H1793細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來(lái)源說明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
OKT 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-638細(xì)胞、ROS17/2.8細(xì)胞、SK-N-BE(2)-M17細(xì)胞
NFS 60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO細(xì)胞、NCI-SNU-761細(xì)胞、Malme3M細(xì)胞
HFL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3細(xì)胞、COLO-684細(xì)胞、SKO-007細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁
KTCTL-140 Adherent人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后,需要進(jìn)行分離培養(yǎng),否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大,營(yíng)養(yǎng)障礙,影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株),可以進(jìn)行細(xì)胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料,便于實(shí)驗(yàn)。傳代細(xì)胞培養(yǎng)操作步驟:1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液;2)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進(jìn)行消化,2-5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后,應(yīng)立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液,按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞,使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔,以防用力過猛損傷細(xì)胞;6)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng);7)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般2-3d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液。
Calu6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ra #1細(xì)胞、RPMI8402細(xì)胞、HEK-A細(xì)胞
Hs294T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAPCa-2b細(xì)胞、DanG細(xì)胞、J-82細(xì)胞
BCP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M4e細(xì)胞、SK-CO-1細(xì)胞、IOSE29細(xì)胞
TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2106細(xì)胞、130 T細(xì)胞、PLC-8024細(xì)胞
SW527細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R3/1細(xì)胞、P3/NS-1細(xì)胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞
RPMI 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC1細(xì)胞、A204細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞
Astrocyte type I clone細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-1細(xì)胞、H2.35細(xì)胞、SHI1細(xì)胞
CP-70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97-H細(xì)胞、SNU-5細(xì)胞、UMC-11細(xì)胞
Pro-Lec1.3C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3 clone A31細(xì)胞、UACC 812細(xì)胞、NCI-H1770細(xì)胞
RKN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu177細(xì)胞、OE33細(xì)胞、ECV304細(xì)胞
Detroit-562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98細(xì)胞、H-35 Reuber細(xì)胞、QGP-1細(xì)胞
KBM-7/Hap8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEP3B2細(xì)胞、GCT0404細(xì)胞、4T1-A細(xì)胞
HUT 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1666細(xì)胞、SNU-475細(xì)胞、MEG-01細(xì)胞
KTCTL-140 Adherent人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系
PLA-801D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP1細(xì)胞、PMVEC細(xì)胞、NCIH64細(xì)胞
Eca109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H283細(xì)胞、B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞、H1341細(xì)胞
IOSE 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-EBNA1細(xì)胞、F442A細(xì)胞、Hx147細(xì)胞
IOSE 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-EBNA1細(xì)胞、F442A細(xì)胞、Hx147細(xì)胞
OVCA420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H 9細(xì)胞、MGH-U1細(xì)胞、CEM-CCRF細(xì)胞
32D clone3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A9細(xì)胞、4T1-A細(xì)胞、PANC-02-03細(xì)胞
SW-1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SEG1細(xì)胞、GTL 16細(xì)胞、RCK-8細(xì)胞
MDA-MB-231-luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:211H細(xì)胞、Co320細(xì)胞、HFF1細(xì)胞
NPA 87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6TG細(xì)胞、32Dcl3細(xì)胞、Swiss 3T3細(xì)胞
3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-109細(xì)胞、NB-4細(xì)胞、BDCM細(xì)胞
HTSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIM-1215細(xì)胞、Ej138細(xì)胞、HTori-3細(xì)胞
Y79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-1細(xì)胞、MAVER細(xì)胞、NCI-H211細(xì)胞
BEL 7405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H128細(xì)胞、D-341細(xì)胞、IOSE80UBC細(xì)胞
H841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 F1細(xì)胞、MonoMac1細(xì)胞、TE-671細(xì)胞
RMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-2細(xì)胞、NCI-H1355細(xì)胞、Hs343T細(xì)胞
HBVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-27細(xì)胞、Kelly細(xì)胞、OCI AML4細(xì)胞
Hs 742.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:High5細(xì)胞、H-1435細(xì)胞、B16 subline B78細(xì)胞
Mino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EoL-1-cell細(xì)胞、LM6細(xì)胞、RPMI.8226細(xì)胞
FET細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLL-2細(xì)胞、N-Tera-2細(xì)胞、H-1563細(xì)胞
L-M (TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/0細(xì)胞、SKGT2細(xì)胞、SKG IIIa細(xì)胞
WC00044細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293 EBNA細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞、MDA-175細(xì)胞
B16/F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_05_04細(xì)胞、CAL 39細(xì)胞、HCC366細(xì)胞
HR1K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 Cl 30-7b細(xì)胞、TM-4細(xì)胞、IB-RS2細(xì)胞
TK.10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa/DDP細(xì)胞、ECV-304細(xì)胞、TOV112細(xì)胞
SW-1353細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AZ521細(xì)胞、NCIH146細(xì)胞、C42細(xì)胞
HCT116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat podocyte細(xì)胞、MKN 45細(xì)胞、SK-N-BE(2)C細(xì)胞
Granta519細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE15細(xì)胞、Balb/c 3T3細(xì)胞、Ishikawa細(xì)胞
H1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2171細(xì)胞、PLB-985細(xì)胞、HCCLM6細(xì)胞
LAD 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-1細(xì)胞、SN4741細(xì)胞、Hs 746T細(xì)胞
X63.Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH211細(xì)胞、GC9811-P細(xì)胞、NCI-BL1339細(xì)胞
SuDHL 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 578.Bst細(xì)胞、LS-411細(xì)胞、ChaGo K-1細(xì)胞
SHI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAG細(xì)胞、U266 Bl細(xì)胞、LIM1215細(xì)胞
NIH:OVCAR-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori:3細(xì)胞、HLE-B3細(xì)胞、ECC-1細(xì)胞
GM3190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4-11細(xì)胞、C17.2細(xì)胞、Hep 3B2.1-7細(xì)胞
231-luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTT739細(xì)胞、HCC-2185細(xì)胞、RPE1-hTERT細(xì)胞
FRTL-5 Cl 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8.653細(xì)胞、HUCEC細(xì)胞、MCF-7/AdrR細(xì)胞
PTK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCISCC154細(xì)胞、CHP 100細(xì)胞、GLRK 13細(xì)胞
HT115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML-5細(xì)胞、SNU5細(xì)胞、SKMEL3細(xì)胞
COLO-738細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞、M3 Clone M-3細(xì)胞、GM05862細(xì)胞
LSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1703細(xì)胞、NIH 3T3細(xì)胞、CF-1 MEF細(xì)胞
TE14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞、OVCAR10細(xì)胞、7404細(xì)胞
ST486細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GalK1細(xì)胞、BNCL-2細(xì)胞、CHP100細(xì)胞
KTCTL-140 Adherent人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系
MIA PaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H82細(xì)胞、SP2細(xì)胞、DoTc2-4510細(xì)胞
PLA802細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CaES-17細(xì)胞、HS-5細(xì)胞、CCD-19Lu細(xì)胞
SW-756細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD-18細(xì)胞、H250細(xì)胞、PTK2細(xì)胞
SK-N-DZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-1847細(xì)胞、EC109細(xì)胞、BEL 7405細(xì)胞
RS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 144細(xì)胞、MSTO-211細(xì)胞、Namalwa細(xì)胞
BE(2)-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H209細(xì)胞、MESSA/Dx5細(xì)胞、COLO679細(xì)胞
NCI-H2291細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1299細(xì)胞、OCI-LY-19細(xì)胞、H1435細(xì)胞
PaTu8988s細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs863T細(xì)胞、HCEC-B4G12細(xì)胞、HPBALL細(xì)胞
H-2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK;293細(xì)胞、KM932細(xì)胞、HS578細(xì)胞
RCC10 RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1187細(xì)胞、UT-7細(xì)胞、AN3 CA細(xì)胞
HOEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT(H9)細(xì)胞、CHL1細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞
BCP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M4e細(xì)胞、NU-GC-3細(xì)胞、SKNDZ細(xì)胞
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