"L-132 Adherent人胚胎肺上皮細胞系
細胞背景資料:胚肺;女性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒有搖勻,或者放入時搖勻,但在細胞貼壁前,又移動了培養(yǎng)瓶,頻繁開關培養(yǎng)箱引起的振動或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過少,培養(yǎng)箱擱板表面不平整,這些因素會導致細胞生長不均勻。研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。運輸過程對細胞有嚴重影響。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C 太久。一些懸浮細胞抱團生長是正常現(xiàn)象,大部分懸浮細胞在細胞密度很高的情況下,很可能會出現(xiàn)部分細胞抱團生長的現(xiàn)象,聚團細胞很容易死亡并演化成絮狀物,殃及周圍的懸浮細胞,因此在培養(yǎng)懸浮細胞時需控制好細胞密度。如果出現(xiàn)了細胞團,可以通過細胞篩去掉部分較大的細胞團,也可以嘗試一下方法:將細胞懸液收集到15ml離心管中,靜置20min左右,小心取上層細胞上清培養(yǎng)(該方法只能去除部分較大的細胞團)。部分細胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐藥株等),這個是正常現(xiàn)象。如果只有少數(shù)細胞有內(nèi)出現(xiàn)極少空泡,則很可能是細胞狀態(tài)不佳,可以通過調(diào)整血清濃度,控制消化,控制傳代比例及時間等方法來調(diào)整細胞狀態(tài);如果大部分細胞出現(xiàn)空泡,且單個細胞內(nèi)空泡數(shù)目偏多,則可能細胞代次較高,細胞老化所致,需更換代次較早的細胞。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
L-132 Adherent人胚胎肺上皮細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點:無菌意識要強:實驗進行前,超凈臺以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟超凈工作臺風扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置,其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以70%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應在中央無菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞,有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時,我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升高到56℃后計時,一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因為會造成沉淀物之顯著增多,且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
MLE-12細胞系相關產(chǎn)品:MDA361細胞、Sp 2817細胞、TMK1細胞
L-cell細胞系相關產(chǎn)品:MC116細胞、TW-039細胞、NCI-H1755細胞
Pt K2細胞系相關產(chǎn)品:Mouse podocyte細胞、MHCC 97-H細胞、KM12細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCI-H1437細胞系相關產(chǎn)品:H2141細胞、MV 3細胞、KBM-7/Hap8細胞
MHCC97H細胞系相關產(chǎn)品:Melanoma 14細胞、M-O7e細胞、H2030細胞
PAN 02細胞系相關產(chǎn)品:MFM-223細胞、MTEC1細胞、RAW-264.7細胞
細胞生長特性:貼壁
L-132 Adherent人胚胎肺上皮細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:1)CO2培養(yǎng)箱:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要;2)烘箱(干燥箱):用于細胞培養(yǎng)的一些器械、器皿必須烘干后才能使用,玻璃器皿等須干熱消毒。干熱消毒時,烘箱內(nèi)溫度一般要達到160℃以上,通常使用鼓風式烘箱。其優(yōu)點是溫度均勻、效果較好,缺點是升溫過程較慢。升溫時不能先升溫后鼓風而應鼓風與升溫同時開始,至100℃時,停止鼓風。需注意避免包裹器皿的紙或棉花燒焦,燒焦的碎屑可影響細胞的生長。消毒后不能立即打開箱門,以免驟冷導致玻璃器皿破裂,應等溫度自然下降至100℃以下后可開門。3)超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質(zhì)量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。4)液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。5)超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉(zhuǎn)放-20℃ 1 hour,再轉(zhuǎn)入-70至-80℃過夜,之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。6)恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾毎麅龃婀苄枰⒓捶庞冢常贰嫠≈锌焖購吞K之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。7離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機。除上述儀器外,移液器、高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡、熒光顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。
MOLM13細胞系相關產(chǎn)品:CAL 85-1細胞、HCC-1954BL細胞、Hep-3B細胞
NCIH146細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H64細胞、A375SM細胞、293-F細胞
MHCC97-H細胞系相關產(chǎn)品:Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、RIN m5F細胞、MC3T3-E1(C4)細胞
HL 60細胞系相關產(chǎn)品:SW 948細胞、B-104細胞、RERFLCMS細胞
SW-1222細胞系相關產(chǎn)品:SEG1細胞、GTL 16細胞、RCK-8細胞
EAHY-926細胞系相關產(chǎn)品:TCCPAN2細胞、RMS13細胞、RKOAS451細胞
NCI-H1341細胞系相關產(chǎn)品:SNU-407細胞、Case 3細胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細胞
HUCCT1細胞系相關產(chǎn)品:Hs-343-T細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞、Bx-PC3細胞
COV362細胞系相關產(chǎn)品:SKMEL-1細胞、L5178YR細胞、P30 OHK細胞
4T1-LUC細胞系相關產(chǎn)品:HEL-92.1.7細胞、BT-325細胞、H650細胞
PLC細胞系相關產(chǎn)品:Hs739T細胞、RPMI-1788細胞、OVCA-432細胞
H508細胞系相關產(chǎn)品:ADR-RES細胞、U 138 MG細胞、H-1819細胞
EL-4細胞系相關產(chǎn)品:NHDF細胞、16HBE14o-細胞、MHCC-97細胞
L-132 Adherent人胚胎肺上皮細胞系
SCC15細胞系相關產(chǎn)品:H1092細胞、NCI-H1694細胞、Colo699細胞
HCCLM3細胞系相關產(chǎn)品:HAEC細胞、Panc_03_27細胞、EB-3細胞
DU 4475細胞系相關產(chǎn)品:WRL68細胞、32D.cl3細胞、K562/ADR細胞
DU 4475細胞系相關產(chǎn)品:WRL68細胞、32D.cl3細胞、K562/ADR細胞
WEHI 231細胞系相關產(chǎn)品:Tn 5B1-4細胞、H1793細胞、H647細胞
HONE1細胞系相關產(chǎn)品:T2 (174 x CEM.T2)細胞、TR-146細胞、Rin-M-5F細胞
LK 2細胞系相關產(chǎn)品:MZ-CRC-1細胞、LADMAC細胞、J774 A1細胞
H-1734細胞系相關產(chǎn)品:JM-1細胞、3T3NIH細胞、HBL-100細胞
TE 671細胞系相關產(chǎn)品:SCC15細胞、RT4細胞、SACCLM細胞
Jiyoye(P-2003)細胞系相關產(chǎn)品:Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、ECC1細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞
RPMI 1788細胞系相關產(chǎn)品:Ca Ski細胞、BIU-87/Adr細胞、GM637A細胞
P3/X63/Ag8細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1666細胞、HFSF細胞、CAL-62細胞
kms 11細胞系相關產(chǎn)品:Hopkins-92細胞、293-EBNA1細胞、H-1155細胞
HCC2157細胞系相關產(chǎn)品:IMR-32細胞、Panc10.05細胞、OV433細胞
U373 MG細胞系相關產(chǎn)品:D-341細胞、NUGC-4細胞、H-1395細胞
WEHI-3B細胞系相關產(chǎn)品:Okayama University Medical School-23細胞、H1385細胞、GA-10-Clone-4細胞
Kit-225-K6細胞系相關產(chǎn)品:OVCA-420細胞、H4IIEC3細胞、ABE8.1/2細胞
COLO357細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H810細胞、WM-239-A細胞、Anip-973細胞
OK細胞系相關產(chǎn)品:Y3-Ag123細胞、C-8161細胞、KU 812細胞
Panc 02細胞系相關產(chǎn)品:T47-D細胞、Hs675T細胞、Pan02細胞
E.L.4細胞系相關產(chǎn)品:HEL9217細胞、HEL299細胞、SVHUC細胞
MES-SA Dx5細胞系相關產(chǎn)品:Hs294細胞、HSC6細胞、C-33 A細胞
HeLa細胞系相關產(chǎn)品:Panc2_03細胞、SK-N-SH細胞、PC-9S1細胞
CHP 100細胞系相關產(chǎn)品:PANC3.27細胞、RWPE-1細胞、Hs-611-T細胞
MDCK-2細胞系相關產(chǎn)品:Ku812F細胞、HS578T細胞、Swiss/3T3細胞
HMEL細胞系相關產(chǎn)品:Strain V細胞、HEK 293A細胞、H1184細胞
RBMEC細胞系相關產(chǎn)品:mRTEC細胞、Hs 729細胞、Ramos(RA1)細胞
CCRF.CEM細胞系相關產(chǎn)品:OCIAML2細胞、SUDHL-16細胞、Hs 688(A).T細胞
WB F344細胞系相關產(chǎn)品:T-HSC細胞、LS-174T細胞、RPMI8226/S細胞
COS-1細胞系相關產(chǎn)品:OACP4C細胞、H-2172細胞、CL-34細胞
HMEC1細胞系相關產(chǎn)品:LTEP-sm 1細胞、PCI-4B細胞、MDA-MB-134 VI細胞
SRA01/04細胞系相關產(chǎn)品:SUM-149PT細胞、MAEC細胞、Colo-201細胞
UC-3細胞系相關產(chǎn)品:HCFB(HCF)細胞、NCIH650細胞、DH-82細胞
U251n細胞系相關產(chǎn)品:IM-9細胞、NCIH748細胞、H-1672細胞
CNE1-LUC細胞系相關產(chǎn)品:TE3A細胞、C643細胞、H-889細胞
MDA-361細胞系相關產(chǎn)品:MCF7-CTRL細胞、C-28/I2細胞、MFE-280細胞
CACO2細胞系相關產(chǎn)品:PCI:SG231細胞、HFB細胞、GBCSD細胞
NCI-H1770細胞系相關產(chǎn)品:SKGIIIA細胞、HuH28細胞、TK.10細胞
SAOS 2細胞系相關產(chǎn)品:EO771細胞、SU.86細胞、Toledo細胞
G361細胞系相關產(chǎn)品:EBNA-293細胞、H-1755細胞、Ly10細胞
U251n細胞系相關產(chǎn)品:IM-9細胞、NCIH748細胞、H-1672細胞
RCS細胞系相關產(chǎn)品:A375細胞、GM17219細胞、PANC3.27細胞
L-132 Adherent人胚胎肺上皮細胞系
HO1-N-1細胞系相關產(chǎn)品:143TK-細胞、NCIH847細胞、YD15細胞
3T3-J2細胞系相關產(chǎn)品:Potorous tridactylus Kidney 1細胞、C-127細胞、VK2細胞
Human Epithelioma-2細胞系相關產(chǎn)品:HCC-1171細胞、SNK6細胞、TEV-1細胞
KU 812細胞系相關產(chǎn)品:A9 (Hamprecht)細胞、SK-MEL-28細胞、SKUT-1細胞
Hs840_T細胞系相關產(chǎn)品:LIXC002細胞、578T細胞、EoL-1 cell細胞
SK HEP 01細胞系相關產(chǎn)品:HcaF細胞、Wien-133細胞、CAMA-1細胞
CAMA1細胞系相關產(chǎn)品:HL-7702細胞、MX-1細胞、2V6.11細胞
SUD4細胞系相關產(chǎn)品:HNTEC細胞、T HEECs細胞、Hs688(A)T細胞
MGH-U3 (RN)細胞系相關產(chǎn)品:P3X63Ag8細胞、MCF-10 Attached細胞、BV-173細胞
EFM-192A細胞系相關產(chǎn)品:H524細胞、C3H10T1/2 clone8細胞、ZYM-SVEC01細胞
SDBMSC細胞系相關產(chǎn)品:hSCC-25細胞、786-0細胞、MDA PCa 2b細胞
MHCC97-H細胞系相關產(chǎn)品:Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、RIN14B細胞、Pt K1 (NBL-3)細胞
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