"SNU-1040 Adherent人結(jié)腸癌細胞系
細胞背景資料：結(jié)腸癌；男性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
SNU-1040 Adherent人結(jié)腸癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒炐枰仨氂兴煌瑫r，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應(yīng)后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
ZR75_1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML193細胞、CCC-ESF-1細胞、RPMI 2650細胞
ME-1 [Human leukemia]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞、U373MG細胞、NCIH2591細胞
HCC1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE280細胞、A549-Taxol細胞、SKO3細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
RBL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBVEC細胞、Hs 604.T細胞、GM00215細胞
Michigan Cancer Foundation-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239細胞、Hs 888Lu細胞、SW-13細胞
HBVP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1793細胞、Panc-8_13細胞、Reuber H35細胞
細胞生長特性：貼壁
SNU-1040 Adherent人結(jié)腸癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
BL2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL148細胞、MOVAS-1細胞、PL 45細胞
3T3-Swiss albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC/TERT1細胞、SVG(P12)細胞、ANA-1細胞
RA.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TT細胞、H-1092細胞、COLO 680N細胞
J774A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D:cl3細胞、UCLA-SO-14細胞、U-138-MG細胞
R1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H510細胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞、HUT 28細胞
EFM-192A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H524細胞、Anip 973細胞、Mv1Lu細胞
DoTc2-4510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS-751細胞、RPMI no. 8226細胞、SG231細胞
NCIH1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS TE85細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞、HCC1833細胞
SF767細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780CP70細胞、TE14細胞、KE 37細胞
Pa14C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DLD 1細胞、HL7702細胞、RPMI no. 8226細胞
NCI-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-RT細胞、NCIH378細胞、HCC0038細胞
639V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs695T細胞、OPM2細胞、SUDHL-4細胞
Nthy-ori 3-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 636 T細胞、LYR細胞、L 929細胞
SNU-1040 Adherent人結(jié)腸癌細胞系
hTERT-HPNE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-8/ADR細胞、LUDLU1細胞、Lewis lung carcinoma細胞
CEMC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDLF細胞、Jijoye細胞、H.Ep. #2細胞
Hs940.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 HEK細胞、UMNSAH-DF 1細胞、IGROV細胞
Hs940.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 HEK細胞、UMNSAH-DF 1細胞、IGROV細胞
SK Mel 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 5細胞、MUG-Chor1細胞、SW-579細胞
SUM190細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 780細胞、JURKAT E-61細胞、SCC15細胞
COLO 738細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T 98 G細胞、Hs 688(A).T細胞、P560細胞
KNS62細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-MK-2細胞、AML12細胞、SKNEP-1細胞
T241細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JeKo 1細胞、VMCUB1細胞、MRC5細胞
P3.times.63 Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-520細胞、NCI.H460細胞、MM1-S細胞
CEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FCCH1024細胞、U266S細胞、H-2342細胞
RF/6A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-29/CX-1細胞、RGM1細胞、LU65細胞
Pt K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly18細胞、PZ-HPV-7細胞、H2452細胞
BeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-5細胞、TE-3A細胞、UM-UC-3細胞
HCCLM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAEC細胞、Panc_03_27細胞、EB-3細胞
F36P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MiaPaCa-2細胞、WM-266-4細胞、373MG細胞
HL-60 Clone 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HHUA細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、TE-6細胞
BT549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1-A細胞、U343MG細胞、DMS79細胞
Det 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Loucy細胞、G402細胞、NCI-H1882細胞
MV4:11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30OHK細胞、K1細胞、BXPC3細胞
P3X63NS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 30細胞、RSC 96細胞、VP 267細胞
NCI-H2330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 403細胞、NCI-H820細胞、MFC細胞
L540細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA/Dx5細胞、P31 FUJ細胞、RS(4;11)細胞
MAntle cell VERona-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL88細胞、PASMCS細胞、Tu686細胞
HCET細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H295R細胞、FM88細胞、EA.hy 926細胞
EFM192細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL8細胞、Hs 578.Bst細胞、G-292, clone A141B1細胞
NCI-H1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sol8細胞、Colo-678細胞、H-2135細胞
HGMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE 296細胞、DSL-6A/C1細胞、OVCAR-8細胞
YH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NL-20細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞、NCIH596細胞
SK-N-BE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS 17/2.8細胞、CCD841CoN細胞、KYSE-410細胞
HCT-8/V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DR2R 1610細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、TCCSUP細胞
FO [Mouse myeloma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31/Fujioka細胞、Colo16細胞、MHH-CALL-2細胞
OEC19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE671細胞、PE/CA-PJ34細胞、Mia PACA 2細胞
CATH.a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC 12細胞、NCIADRRES細胞、SUP-M2細胞
PC10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIMVEC細胞、BNCL2細胞、NCI-H2106細胞
GM02131A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/F10細胞、PLC-8024細胞、MDA MB 453細胞
Human fetal lung fibroblast 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI AML3細胞、LC-1 sq細胞、WM239細胞
MSCs（mUCMSCs）細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH64細胞、NIH:OVCAR4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞
EA.hy 926細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAMSCs細胞、SKMel-5細胞、HEI-193細胞
P3/NS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3LL細胞、SUM-102PT細胞、IPLB-Sf21細胞
NCIH820細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE細胞、SNU-668細胞、SKBr3細胞
WBF344細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1428細胞、TF-1細胞、WRL 68細胞
SNU-1040 Adherent人結(jié)腸癌細胞系
HOMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MES細胞、KYSE-510細胞、BEL 7404細胞
alpha-TC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-527細胞、CTV-1細胞、SLK細胞
HSC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP 92細胞、Dami細胞、SNU620細胞
COR L279細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-1細胞、BLO 11細胞、MDA-157細胞
rRMECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC-8細胞、751-NA細胞、U 937細胞
Jurkat細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt-K1細胞、ACC2細胞、mRMEC細胞
B16-F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh7.5.1細胞、PAN 02細胞、143B TK-細胞
NTera-2D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH7細胞、NALM-6-M1細胞、TKB1細胞
NCIH209細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-5細胞、Capan 1細胞、VE細胞
Mouse INsulinoma 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251MG細胞、IGR.OV1細胞、U-138-MG細胞
BT-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos (RA 1)細胞、Hs839.T細胞、DU-4475細胞
RA.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TT細胞、SNU869細胞、NTERA-2cl.D1細胞
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