"J774 Adherent小鼠巨噬細胞系
細胞背景資料：巨噬細胞；BALB/c
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細胞洗兩遍，使瓶內沒有血清了，減少對胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細胞有些消化下來時，拿著瓶口，運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內液體，這樣細胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團、絮狀：消化液里加入edta可以減少細胞成團的現象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話，一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢)，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細胞，收集全部的細胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落，在換液的時候可以清除掉！
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
J774 Adherent小鼠巨噬細胞系
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
NK-92MI細胞系相關產品：SLMT1細胞、SUPB-15細胞、NCI-SNU-407細胞
CEL細胞系相關產品：FCCH1024細胞、U266S細胞、H-2342細胞
NTera-2D1細胞系相關產品：HuH7細胞、NALM-6-M1細胞、TKB1細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
COLO_320DM細胞系相關產品：HANK-1細胞、SUDHL-8細胞、H22細胞
PIG1細胞系相關產品：L78細胞、FTC133細胞、SKMEL24細胞
TCC-PAN2細胞系相關產品：Suzhou Human Glioma-44細胞、LMH細胞、IOSE-Van細胞
細胞生長特性：貼壁
J774 Adherent小鼠巨噬細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞接收后的操作流程與注意事項：１)如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯系實驗室技術人員會跟進解決；２)貼壁細胞生長緩慢；適當提高血清濃度(最高不能超過２０%)，或可根據該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長不均：貼壁細胞若出現分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
SCC-25細胞系相關產品：ZR75-1細胞、HUT 28細胞、RPMI #1846細胞
HEK 293A細胞系相關產品：ESC-410細胞、LC-1/sq細胞、RGC5細胞
BaF3細胞系相關產品：ECV304細胞、NCIH526細胞、H-1437細胞
NCI-H2330細胞系相關產品：SW 403細胞、NCI-H820細胞、MFC細胞
T-ALL-1細胞系相關產品：NCI-H716細胞、NCIH2342細胞、ReNcell CX細胞
FET細胞系相關產品：CTLL-2細胞、N-Tera-2細胞、H-1563細胞
GCT0404細胞系相關產品：HS766T細胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、SL1細胞
MGC803細胞系相關產品：A2780-CP細胞、SK-GT-4細胞、CEM細胞
A549/DDP細胞系相關產品：NCI-H2029細胞、SW 948細胞、COLO320 DM細胞
HS940細胞系相關產品：Panc_02_03細胞、Anip-973細胞、A-9細胞
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697細胞系相關產品：NUGC3細胞、CCD 841 CoN細胞、NCI-H841細胞
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16HBE140細胞系相關產品：NCI-SNU-475細胞、LCLC-103H細胞、BTI-TN5B1-4細胞
NKM1細胞系相關產品：ECC 10細胞、RD-2細胞、766T細胞
H-810細胞系相關產品：SKRC-42細胞、COLO-320DM細胞、H 9細胞
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Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞系相關產品：SW-1088細胞、NK92-MI細胞、HAEC細胞
MDCC-MSB1細胞系相關產品：GA10細胞、CHO Lec1細胞、KE-37細胞
RMS 13細胞系相關產品：NCI-H1793細胞、EBC1細胞、LC-1Sq細胞
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Ca 9-22細胞系相關產品：Caco-2 BBe細胞、CHL細胞、CHP212細胞
Walker256-TC細胞系相關產品：WM239細胞、SW-954細胞、HN4細胞
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NRK clone 49F細胞系相關產品：H322T細胞、OVCA-420細胞、OE21細胞
NGP細胞系相關產品：CEM-C1細胞、K299細胞、MRC-9細胞
ACCM細胞系相關產品：Rat Skin 1細胞、143B細胞、SW626細胞
JeKo-1細胞系相關產品：UM2細胞、BCP-1細胞、H1734細胞
BC3 H1細胞系相關產品：Hs-27細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞、LAC細胞
MKN-28細胞系相關產品：H820細胞、Japanese Tissue Culture-39細胞、HTh 74細胞
PC-3M細胞系相關產品：Murine Lung Epithelial-12細胞、NCIH128細胞、8226/S細胞
WC00097細胞系相關產品：HCC0202細胞、MFE-296細胞、SEM細胞
Bovine ENDometrial cells細胞系相關產品：N9細胞、MDA-MB-134-VI細胞、CF Pac1細胞
QGP-1細胞系相關產品：BALB 3T3 clone A31細胞、HSC-1細胞、JB6 Cl 30細胞
ketr 3細胞系相關產品：HTSMC細胞、Granta-519細胞、OVCAR 4細胞
LTEP-a2細胞系相關產品：S37細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞、WRL68細胞
L Wnt-3A細胞系相關產品：HANK1細胞、FRO細胞、Ball 1細胞
SNU484細胞系相關產品：Hs819T細胞、NCIH64細胞、OV-2008細胞
Tca-8113細胞系相關產品：KM12細胞、Hca-F細胞、NP-69細胞
AdHek細胞系相關產品：BHT101細胞、WPE-int細胞、Hs 766細胞
J774 Adherent小鼠巨噬細胞系
Clone 166細胞系相關產品：CCD-33Co細胞、COLO 320F細胞、SV40 MES 13細胞
Anip 973細胞系相關產品：OE21細胞、CCD-966SK細胞、Co 115細胞
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L細胞系相關產品：PMVEC細胞、DU-4475細胞、NCI-SNU-668細胞
ESC細胞系相關產品：Y-79細胞、HS-294T細胞、HCe-8693細胞
AgC11x3A細胞系相關產品：Cloudman M3細胞、SUM 102細胞、NTera 2/cl.D1細胞
HD11細胞系相關產品：GM05887細胞、RPMI-6666細胞、SKNDZ細胞
Medical Research Council cell strain-5細胞系相關產品：SupT1細胞、G 292 Clone A 141B1細胞、IR983F細胞
NTERA2-cloneD1細胞系相關產品：GL-261細胞、NCI-H1650細胞、MOLP2細胞
PL5細胞系相關產品：PSN-1細胞、KMH-2細胞、NCI-H2110細胞
BaF3細胞系相關產品：ECV304細胞、OE33細胞、PA-TU-8988S細胞
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