"67NR Adherent小鼠乳腺癌細胞系
細胞背景資料：乳腺癌；BALB/cfC３H
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質(zhì)，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
67NR Adherent小鼠乳腺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒炐枰?，必須有所不同時，務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
MDAMB157細胞系相關產(chǎn)品：MRC-V細胞、H-596細胞、no-11細胞
SHSY-5Y細胞系相關產(chǎn)品：HEL-1細胞、SKLMS-1細胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞
L Wnt-3A細胞系相關產(chǎn)品：HANK1細胞、FRO細胞、Ball 1細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
TE4細胞系相關產(chǎn)品：RKO_AS45細胞、SNB-19細胞、BrCL18細胞
PANC.1細胞系相關產(chǎn)品：HEK293T/17細胞、Kupffer細胞、SCC 9細胞
HCC1599細胞系相關產(chǎn)品：ARO 81-1細胞、ChaGo-K-1細胞、HCC95細胞
細胞生長特性：貼壁
67NR Adherent小鼠乳腺癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié)：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細胞人多口雜，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當風衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
L615細胞系相關產(chǎn)品：GM02132C細胞、KOSC-2細胞、Earles's cells細胞
C33細胞系相關產(chǎn)品：2B4細胞、B16-F10--RED細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞
H2052細胞系相關產(chǎn)品：K-562細胞、P560細胞、L cells (TK-)細胞
HUVSMC細胞系相關產(chǎn)品：H1436細胞、H2081細胞、SKMEL-1細胞
GLC82細胞系相關產(chǎn)品：NCTC 929細胞、Panc5.04細胞、TE-8細胞
P3X63 AG 8.653細胞系相關產(chǎn)品：C33細胞、P-2003細胞、PANC-10-05細胞
LY細胞系相關產(chǎn)品：H7721細胞、H35 Reuber細胞、Karpas-422細胞
BC-028細胞系相關產(chǎn)品：FHC細胞、H446細胞、IAR20細胞
TE85細胞系相關產(chǎn)品：tdott細胞、NCIH208細胞、Hs 840.T細胞
Kit225 K6細胞系相關產(chǎn)品：2780細胞、PA12細胞、NCI-H508細胞
TERT-RPE1細胞系相關產(chǎn)品：HT-55細胞、GM00637I細胞、H4-II-E細胞
RPMI-1788細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1693細胞、LK2細胞、SCC-1395細胞
TM-3細胞系相關產(chǎn)品：LS174細胞、3T3-A31細胞、746T細胞
67NR Adherent小鼠乳腺癌細胞系
OVCA 432細胞系相關產(chǎn)品：YES2細胞、NT-2細胞、HOC細胞
RGC-6細胞系相關產(chǎn)品：RPMI7666細胞、RKO-AS45-1細胞、RCC10 RGB細胞
NCI-H1385細胞系相關產(chǎn)品：TCCSUP細胞、H1703細胞、LYR細胞
MDA-MB-175細胞系相關產(chǎn)品：293T/17細胞、MDA-MB-453細胞、UCH-1細胞
NCIH747細胞系相關產(chǎn)品：SK Mel 1細胞、RFL-6細胞、U266BL細胞
PA-1細胞系相關產(chǎn)品：Becker細胞、NUGC-2細胞、NCIH1819細胞
H1792細胞系相關產(chǎn)品：IM9細胞、Caco-2BBe細胞、MRC-V細胞
HeLa 229細胞系相關產(chǎn)品：NTERA-2cl.D1細胞、LS 180細胞、FRTL5細胞
P3X63 AG8-653細胞系相關產(chǎn)品：T-CAM2細胞、HMEC細胞、HELF細胞
130 T細胞系相關產(chǎn)品：H2106細胞、3396細胞、MDAMB231細胞
P3-Jiyoye細胞系相關產(chǎn)品：M-NFS-60細胞、SHZ-88細胞、SK-RC-39細胞
Colo-206F細胞系相關產(chǎn)品：Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞、V-79細胞、NCI-H1930細胞
RCC 7860細胞系相關產(chǎn)品：COLO-205細胞、WEHI231細胞、CAKI 2細胞
Panc02-H0細胞系相關產(chǎn)品：PANC-08-13細胞、Y-1細胞、VA-ES-BJ細胞
MCA-205細胞系相關產(chǎn)品：HEK-293 c18細胞、NCI-SNU-1040細胞、Nb2a細胞
BT-20細胞系相關產(chǎn)品：Ramos (RA 1)細胞、H-1694細胞、MC-4細胞
HEB細胞系相關產(chǎn)品：KMS26細胞、H-847細胞、EB1細胞
HCC1588細胞系相關產(chǎn)品：H-211細胞、MDA-kb2細胞、H-3255細胞
T HEECs細胞系相關產(chǎn)品：N1E-115細胞、NALM 6細胞、SHG-44細胞
CCRF-CEM C1細胞系相關產(chǎn)品：HIMEC細胞、FaDu細胞、HCT-GEO細胞
MSTO211H細胞系相關產(chǎn)品：NFS-60細胞、SUM-159PT細胞、CATH-a細胞
HCC-1833細胞系相關產(chǎn)品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、Panc 5.04細胞、HOCF細胞
RDES細胞系相關產(chǎn)品：RC-4B/C細胞、CD 18細胞、BT 549細胞
C-33-A細胞系相關產(chǎn)品：PVEC細胞、293c18細胞、NCI-H2107細胞
SGC7901細胞系相關產(chǎn)品：Daoy細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞、MDA-415細胞
Hep 3B2.1-7細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB134細胞、LAPC4細胞、BT-325細胞
MV4II細胞系相關產(chǎn)品：Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、KYSE520細胞、HFLS-RA細胞
KU-812-F細胞系相關產(chǎn)品：SEM細胞、Mevo細胞、OCIAML2細胞
WC00059細胞系相關產(chǎn)品：GM01232細胞、LTEPa2細胞、NCI H157細胞
JHH7細胞系相關產(chǎn)品：TE354.T細胞、GM03190細胞、WERI-Rb-1細胞
NCI-H2195細胞系相關產(chǎn)品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、HEK 293 EBNA細胞、VMCUB1細胞
Eca-109細胞系相關產(chǎn)品：SKMEL1細胞、F-36P細胞、HCMEC(BL12-H)細胞
OCI-LY-8細胞系相關產(chǎn)品：SKO007細胞、NCI-H2591細胞、HOP-62細胞
OVCAR-433細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-435 S細胞、BC3H1細胞、Hs578Bst細胞
GM16136細胞系相關產(chǎn)品：RGM1細胞、MUS-M1細胞、C3H10T1-2細胞
M21細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1385細胞、RKO細胞、SKCO 1細胞
BNL CL2細胞系相關產(chǎn)品：BT 20細胞、MDA2B細胞、Hs-600-T細胞
FRTL5細胞系相關產(chǎn)品：HPASMC細胞、HARA-B細胞、FDCP-1細胞
CCC-HHM-2細胞系相關產(chǎn)品：CL40細胞、NCIH2171細胞、CCD19-Lu細胞
HCC-1588細胞系相關產(chǎn)品：H-2087細胞、ARH77細胞、KU 19-19細胞
NRK細胞系相關產(chǎn)品：DC2.4細胞、Sp2/O-Ag14細胞、NCTC-3960細胞
16HBE140細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-475細胞、LCLC-103H細胞、BTI-TN5B1-4細胞
67NR Adherent小鼠乳腺癌細胞系
J 774A.1細胞系相關產(chǎn)品：Panc4.03細胞、SKCol1細胞、KBM-5細胞
TE7細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1417細胞、CPA 47細胞、UM-UC-14細胞
SNUC2A細胞系相關產(chǎn)品：A 549細胞、Panc_02_03細胞、Michigan Cancer Foundation-12A細胞
UPCI-SCC-90細胞系相關產(chǎn)品：OCI AML4細胞、SU-DHL-10細胞、HCCC-9810細胞
R2C細胞系相關產(chǎn)品：Y3-Ag1,2,3細胞、SW-620細胞、HOP-92細胞
Caco-2 BBe細胞系相關產(chǎn)品：RPMI 6666細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、Colo-678細胞
HANK1細胞系相關產(chǎn)品：MCA-38細胞、H-1781細胞、NCI-H322細胞
NB.4細胞系相關產(chǎn)品：FHL 124細胞、OV-90細胞、FDCP1細胞
NS1-Ag4/1細胞系相關產(chǎn)品：MHH-CALL2細胞、MDA-MB-175細胞、BHK細胞
NCI-H929細胞系相關產(chǎn)品：S3-HeLa細胞、KYSE-140細胞、MDAMB415細胞
BI-Mel細胞系相關產(chǎn)品：KHYG-1細胞、Human Liver-7702細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞
H2052_MM細胞系相關產(chǎn)品：SNU-368細胞、YES2細胞、COLO-320DM細胞
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