"NCI-H345 Adherent人小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：小細胞肺癌；骨髓轉(zhuǎn)移；男性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標(biāo)準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H345 Adherent人小細胞肺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室，的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要。現(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時，細胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài)，故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇：凍存細胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。１ml凍存細胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù)，細胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細胞/ml；培養(yǎng)細胞１２到２４小時，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞，并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板，細胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細胞/ml。細胞的分化：一個成年人全身細胞總數(shù)約１０１２個，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細胞的產(chǎn)生和分化，這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細胞周期中G１期開始時一個確定的點G０點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞，它們的基因表達和代謝活動各不相同。
NCI-H3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CATH-a細胞、C8166-CD4細胞、H-196細胞
CSQT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Blotchy fibroblast-11細胞、COR-L88細胞、BT-474細胞
Centre Antoine Lacassagne-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv 1 Lu (NBL-7)細胞、High 5細胞、CD 18細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
UM-RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNEC30細胞、B95.8細胞、Hs832T細胞
DU145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKN細胞、Mc Coy細胞、1.1B4細胞
C3H 10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CA 46細胞、H2126細胞、HCC44細胞
細胞生長特性：貼壁
NCI-H345 Adherent人小細胞肺癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
GLC-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLCMK2細胞、INS-1E細胞、He-La細胞
Hs940T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549/ATCC細胞、OCI AML5細胞、SGC-996細胞
A375SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PBMC細胞、MKN-7細胞、SLMT1細胞
PANC0813細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293c18細胞、P3/ag細胞、BRL-3A細胞
V-79細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-5細胞、H9細胞、SKM1細胞
HRGEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-18細胞、HTR8svn細胞、RERF-LCMS細胞
PL-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-29細胞、NCIH508細胞、NPC-039細胞
Rat Chondrosarcoma Swarm細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL1細胞、HEK-293A細胞、MES 23.5細胞
M-07e細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-2細胞、TGW-nu-1細胞、NCI-H2108細胞
RS 4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC5細胞、H-1404細胞、D-341 Med細胞
NCI-H2444細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-5細胞、NCI-H2009細胞、KPL4細胞
NCI-H661細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231細胞、NCI H295R細胞、RetroPack PT67細胞
HEL-92.1.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-35 Reuber細胞、SW620細胞、H-1836細胞
NCI-H345 Adherent人小細胞肺癌細胞系
YAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC-2細胞、SUDHL5細胞、MCA-205細胞
A9 (Hamprecht)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLF細胞、CFSC-2G細胞、HEK293S細胞
Caco-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-1 myeloid leukemia細胞、HLF細胞、J774細胞
Caco-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-1 myeloid leukemia細胞、HLF細胞、J774細胞
SHP-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NG108-15細胞、COLO-679細胞、Hs-27細胞
MUS-M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE-37細胞、PCI-4M細胞、BNCL2細胞
LTEP-a-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BOWES細胞、SKNBE(2c)細胞、A498細胞
MC-CAR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSH細胞、SKLU1細胞、BE2M17細胞
NOR-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS-17/2.8細胞、H146細胞、SKNFI細胞
NCIH1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：High Five細胞、A-20細胞、RMS 1598細胞
Mouse INsulinoma 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251MG細胞、H1436細胞、WI38細胞
M4e細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GBCSD細胞、JeKo 1細胞、H676B細胞
SNU398細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G 401細胞、SKUT-1細胞、SK-N-BE(2)-C細胞
Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-PCa-2b細胞、HT-22細胞、293FT細胞
HMy2.CIR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 Ag8.653細胞、OCI/AML3細胞、MC-38細胞
S3 HeLa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 231細胞、MPVECs細胞、Melan-a細胞
LM-TK-細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTC細胞、ID8細胞、GC-2spd(ts)細胞
G 401細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9細胞、HO8910細胞、HEB細胞
RTMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL 45細胞、J-111細胞、KMH-2細胞
H1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T47D:A細胞、TE354.T細胞、H-1666細胞
HN13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：16-HBEo細胞、B16 F10細胞、R 1610細胞
TW-039細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT-4細胞、102PT細胞、GalK 1細胞
WSU-DLCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL-95-2細胞、MIO-M1細胞、CEM/C1細胞
KG1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon-26細胞、UWB1.289+BRCA1細胞、Anip973細胞
3T3NIH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LX-2細胞、HCC1395細胞、OV1-P細胞
KP-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-S細胞、Colo-206F細胞、NCI-SNU-16細胞
L6565細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637F細胞、MB157細胞、DU145細胞
EFO27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2171細胞、H1417細胞、Balb/c 3T3細胞
SK Mel28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：USMC細胞、KU 812F細胞、RWPE-2細胞
KTC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 8226細胞、UMC11細胞、A 375細胞
University of Arizona Cell Culture-893細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM2132細胞、SKBr3細胞、Sp2/O細胞
IPLB-SF 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HITT15細胞、RIN Cl-5F細胞、CLL-CII細胞
MEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J 111細胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細胞、SK Col 1細胞
PTK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC97L細胞、SUDHL-1細胞、Ramos (RA 1)細胞
MFE 296細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK UT 1細胞、RPMI-7666細胞、NCI-SNU-1040細胞
TE 85 ClF-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV細胞、Neuro 2a細胞、NCI-SNU-886細胞
CAL148細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs895T細胞、QG-56細胞、SKOV-433細胞
Alexander cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293 c18細胞、M2-10B4細胞、CAL 85-1細胞
RT-BM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL6細胞、H-740細胞、OKAC1細胞
Hep-G2/C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha TC1-6細胞、BJA-B-1細胞、aTC1-6細胞
H1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc5.04細胞、NCIH1395細胞、190PT細胞
RS 4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC5細胞、H-1404細胞、D-341 Med細胞
NCI-H345 Adherent人小細胞肺癌細胞系
NCIH1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 480細胞、Tb 1 Lu細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞
NCI-H1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD19-Lu細胞、CNE1-LUC細胞、Scott細胞
VE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-2spd(ts)細胞、LM3細胞、EA.Hy926細胞
NCI-SNU-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRMC細胞、RIN-14B細胞、THC-8307細胞
H-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1648細胞、NALM6細胞、H4IIE細胞
138MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TYKnu細胞、HEK293-EBNA1細胞、DrG細胞
WI-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD細胞、LMTK-細胞、OCI-AML3細胞
Karpas 299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-1細胞、AML-12細胞、RINm5F細胞
SNU620細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H196細胞、NCI-H1838細胞、DU-145細胞
NCI-841細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-2細胞、Hs 600.T細胞、huH 1細胞
C33-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly03細胞、TE5細胞、MKN74細胞
A375SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PBMC細胞、Hep G2-Luc細胞、MN-9D細胞
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