"HIT-T15 Adherent倉鼠beta胰島細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:胰島β細(xì)胞;SV40轉(zhuǎn)化
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進(jìn)行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HIT-T15 Adherent倉鼠beta胰島細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
冷凍細(xì)胞解凍程序:依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰仨氂兴煌瑫r,務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細(xì)胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)取10ml培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細(xì)胞而言,1%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO,不會對細(xì)胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細(xì)胞中去除,待第二天確定細(xì)胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細(xì)胞分化之細(xì)胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細(xì)胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
HCC-1187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:High 5細(xì)胞、Wistar Institute-38細(xì)胞、OCI-Ly8細(xì)胞
BT.549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1755細(xì)胞、KU19-19細(xì)胞、DV90細(xì)胞
H-676細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞、Hs742T細(xì)胞、H1238細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
BNCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H647細(xì)胞、IGR.OV1細(xì)胞、U-251_MG細(xì)胞
P116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MH-22a細(xì)胞、DMS 114細(xì)胞、CHP 126細(xì)胞
NCIH1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1385細(xì)胞、Madison lung細(xì)胞、PL11細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁
HIT-T15 Adherent倉鼠beta胰島細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
H1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Col 1細(xì)胞、GA-10 clone 4細(xì)胞、MCF-7/ADR細(xì)胞
DAN-G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:aNK細(xì)胞、MC 3T3-E1細(xì)胞、Ramos-2G6-4C10細(xì)胞
Hepa-RG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 763細(xì)胞、DHL4細(xì)胞、NCIH1373細(xì)胞
A-704細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM C7細(xì)胞、HCV29細(xì)胞、NCI-H676B細(xì)胞
NS-1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H661細(xì)胞、Tb1Lu細(xì)胞、OUMS27細(xì)胞
LuCL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD 18細(xì)胞、BC-025細(xì)胞、Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞
G 401細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9細(xì)胞、HO8910細(xì)胞、HEB細(xì)胞
MAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH820細(xì)胞、TF1細(xì)胞、RBL細(xì)胞
McArdle RH-7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WB F344細(xì)胞、786.O細(xì)胞、OVCAR-420細(xì)胞
SKUT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-498細(xì)胞、Kit225細(xì)胞、Ra #1細(xì)胞
D10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDLM2細(xì)胞、ACC-2細(xì)胞、AAV293細(xì)胞
NALM 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-1386細(xì)胞、BT-549細(xì)胞、EC-109細(xì)胞
SK-MEL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HemECs細(xì)胞、HUT-28細(xì)胞、SW 403細(xì)胞
HIT-T15 Adherent倉鼠beta胰島細(xì)胞系
CF-1 MEF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-62細(xì)胞、RM1細(xì)胞、NCI-H-82細(xì)胞
HDLM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-115細(xì)胞、HIC細(xì)胞、Duke University 4475細(xì)胞
H661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABC1細(xì)胞、BHK21細(xì)胞、TSUpr1細(xì)胞
Colo16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBMEC細(xì)胞、NCIH520細(xì)胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞
NCI-H2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞、BHT101細(xì)胞、COLO-824細(xì)胞
C6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1975細(xì)胞、GNM細(xì)胞、MUTZ-3細(xì)胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV1/P細(xì)胞、HFL細(xì)胞、RBSMC細(xì)胞
RAMSCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H920細(xì)胞、DHL-6細(xì)胞、A3細(xì)胞
Human ErythroLeukemia細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBC-1細(xì)胞、LAN6細(xì)胞、GM3570細(xì)胞
H1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1581細(xì)胞、MUGCHOR1細(xì)胞、GM00215A細(xì)胞
HT 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC5細(xì)胞、H2171細(xì)胞、KYSE520細(xì)胞
KTA-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞、Colon-38細(xì)胞、HOS細(xì)胞
CAL 120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1.K細(xì)胞、D562細(xì)胞、MRC9細(xì)胞
NCIH841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C33-A細(xì)胞、HARAB細(xì)胞、NCI-SNU-761細(xì)胞
M109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JAR細(xì)胞、RGC5細(xì)胞、Hs895.T細(xì)胞
LNCaP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y79細(xì)胞、CCK81細(xì)胞、PE/CA-PJ34細(xì)胞
SNU601細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0030細(xì)胞、WiDr-TC細(xì)胞、KPNRTBM1細(xì)胞
Ca9-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C643細(xì)胞、MV-4-11細(xì)胞、NCIH128細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHEK細(xì)胞、T-HEECs細(xì)胞、SV40-MES13細(xì)胞
MM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV 4;11細(xì)胞、Tregs細(xì)胞、NIH-3T3細(xì)胞
BT 549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU4475細(xì)胞、HS-729細(xì)胞、Mouse podocyte細(xì)胞
HUT 226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2185細(xì)胞、HCoEpiC細(xì)胞、CMT 167細(xì)胞
MARC-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-26細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞、HOMEC細(xì)胞
Y79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-1細(xì)胞、MAVER細(xì)胞、NCI-H211細(xì)胞
MN9D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251n細(xì)胞、Vero from pool #76細(xì)胞、HAPI細(xì)胞
TGBC11TKB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2085細(xì)胞、NCTC-3960細(xì)胞、OVCAR-433細(xì)胞
H508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ADR-RES細(xì)胞、U 138 MG細(xì)胞、H-1819細(xì)胞
3396細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 361細(xì)胞、Panc 05.04細(xì)胞、PC-3M-2B4細(xì)胞
WILL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞、BMF細(xì)胞、NCIH2172細(xì)胞
HCC-1806細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D324 Med細(xì)胞、RBL 2H3細(xì)胞、HCS2/8細(xì)胞
SU-DHL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WiDr-TC細(xì)胞、PC3-M細(xì)胞、MCA 38細(xì)胞
SKCO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FAT細(xì)胞、EU-3細(xì)胞、293GP細(xì)胞
HLFa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1563細(xì)胞、SNU-398細(xì)胞、H2196細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM17219細(xì)胞、UACC-812細(xì)胞、D-324 Med細(xì)胞
A204細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT 102細(xì)胞、KY-270細(xì)胞、TK10細(xì)胞
THP-1(ATCC)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J.E6-1細(xì)胞、BLO-11細(xì)胞、Vero 76細(xì)胞
U373MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE85細(xì)胞、C127細(xì)胞、CHP126細(xì)胞
Hs 683.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TPC1細(xì)胞、RPTC細(xì)胞、HS5細(xì)胞
GM3570細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-729細(xì)胞、OCILY10細(xì)胞、GM02132細(xì)胞
RAT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat 2細(xì)胞、Walker256細(xì)胞、P31 FUJ細(xì)胞
TPC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-4細(xì)胞、Mono Mac 1細(xì)胞、U-373MG細(xì)胞
DU-4475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1359細(xì)胞、CCD 841 CoTr細(xì)胞、HSKMC細(xì)胞
HIT-T15 Adherent倉鼠beta胰島細(xì)胞系
A-431細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL95-2細(xì)胞、Raji細(xì)胞、SKBR-3細(xì)胞
NCI-H187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCK8細(xì)胞、Y 1細(xì)胞、HEK-293H細(xì)胞
Turbot Embryonic Cell line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAOEC細(xì)胞、SKNEP細(xì)胞、Caco-2/BBe細(xì)胞
H-1993細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc02細(xì)胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細(xì)胞、293A細(xì)胞
CEMO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1395細(xì)胞、MADB 106細(xì)胞、NUGC-3細(xì)胞
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B10BR細(xì)胞、C-33A細(xì)胞、HuH 6細(xì)胞
HIT T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 8細(xì)胞、DH82細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞
RPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、H-1793細(xì)胞、HFLS細(xì)胞
MOLP-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 742.T細(xì)胞、HSC-4細(xì)胞、SNU475細(xì)胞
B5537SKIN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLTC-1細(xì)胞、C8161細(xì)胞、697細(xì)胞
MES-SA/Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Glioma-261細(xì)胞、COLO 206細(xì)胞、MBMEC細(xì)胞
Hepa1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dx5細(xì)胞、H-1522細(xì)胞、Panc 5.04細(xì)胞
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