"SKO-007 Adherent人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:骨髓瘤;男性
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測試工作帶來了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細(xì)胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細(xì)胞的生長與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性,有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞,以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍,細(xì)胞內(nèi)外的水分會(huì)很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變,使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細(xì)胞死亡。因此,細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細(xì)胞,可以使冰點(diǎn)下降,提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,且對(duì)細(xì)胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會(huì),從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SKO-007 Adherent人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前,細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細(xì)胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存:計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細(xì)胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以1×10(7)到5×10(7)細(xì)胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存:使用分離試劑從基層分離細(xì)胞,分離時(shí)盡可能溫和,使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細(xì)胞,確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以5×10(6)到1×10(6)細(xì)胞/ml密度,在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
LED-WiDr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVOG細(xì)胞、H1404細(xì)胞、ARO-81細(xì)胞
Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-60 clone15細(xì)胞、Rat 1細(xì)胞、HOK細(xì)胞
Ramos.G6.C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-3T3細(xì)胞、ONS-76細(xì)胞、HUC細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
769P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AHH1細(xì)胞、AU-565細(xì)胞、H-1770細(xì)胞
RCC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549細(xì)胞、KPL1細(xì)胞、COLO 320 HSR細(xì)胞
RPMI1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE50細(xì)胞、RSC-96細(xì)胞、HASMC細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:懸浮
SKO-007 Adherent人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯(cuò)誤;冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心;懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞;培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤;細(xì)胞置于-80℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時(shí)間過長都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對(duì)離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對(duì)離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。
Hs895T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞、SK-N-AS細(xì)胞、MOLP2細(xì)胞
NCIH23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:mIMCD-3細(xì)胞、SUPM2細(xì)胞、U-118-MG細(xì)胞
NCI-H920細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEC-B3細(xì)胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞、CORL279細(xì)胞
X63.Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH211細(xì)胞、GC9811-P細(xì)胞、NCI-BL1339細(xì)胞
SK-Hep1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepatoma 22細(xì)胞、YH細(xì)胞、Mink Lung細(xì)胞
HEK 293-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT clone T15細(xì)胞、NCIH211細(xì)胞、SUM-52-PE細(xì)胞
PLC8024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-174T細(xì)胞、KYSE30細(xì)胞、Panc3_27細(xì)胞
H596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10(Clone 4)細(xì)胞、CCD 19Lu細(xì)胞、Dakiki細(xì)胞
MIO-M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL12細(xì)胞、OCI/AML2細(xì)胞、ZR7530細(xì)胞
HFF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAEC細(xì)胞、HuH 6細(xì)胞、P3.653細(xì)胞
Sci-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip-973細(xì)胞、EC-9706細(xì)胞、ECC 10細(xì)胞
SW-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B35細(xì)胞、RH35細(xì)胞、MCF-7B細(xì)胞
EOC 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(1)n細(xì)胞、HRMC細(xì)胞、CORL23細(xì)胞
SKO-007 Adherent人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞系
HEK293-EBNA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE細(xì)胞、M21細(xì)胞、IPECJ2細(xì)胞
NTERA2D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MARC145細(xì)胞、MGH-U3細(xì)胞、H2195細(xì)胞
CCD-841CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fao細(xì)胞、NuTu 19細(xì)胞、UPCI-SCC-090細(xì)胞
CCD-841CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fao細(xì)胞、NuTu 19細(xì)胞、UPCI-SCC-090細(xì)胞
T. T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞、FDC-P1細(xì)胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞
DI-TNC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12CPM6細(xì)胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞、hEM15A細(xì)胞
3AO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TH1細(xì)胞、H711細(xì)胞、RN細(xì)胞
EAC-E2G8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR3細(xì)胞、TM-3細(xì)胞、A9 (Hamprecht)細(xì)胞
Hs675T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780/CP70細(xì)胞、Tu-177細(xì)胞、624 MEL細(xì)胞
U251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞、H-2444細(xì)胞、B16-F10-BL6細(xì)胞
TB1 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK_HEP1細(xì)胞、P3HR-1細(xì)胞、LA-N-1細(xì)胞
SK-GT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:6-10B細(xì)胞、H1963細(xì)胞、M2-10B4細(xì)胞
WIL2 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSKM-1細(xì)胞、SW-1222細(xì)胞、HCC-2218細(xì)胞
Rainbow Trout Embryo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupB15W細(xì)胞、BOWES細(xì)胞、TOG細(xì)胞
NT2-D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis Lung細(xì)胞、SK-MES細(xì)胞、A253細(xì)胞
HNE3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04678細(xì)胞、KYSE-410細(xì)胞、LM-TK-細(xì)胞
Vero細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H3255細(xì)胞、A-375SM細(xì)胞、32D.3細(xì)胞
Tn-5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSC-19細(xì)胞、MNNG-HOS細(xì)胞、HL-60 Clone 15細(xì)胞
MKN28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV112細(xì)胞、D324細(xì)胞、SKLU1細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AGS細(xì)胞、P388.D1細(xì)胞、P3X63 AG8-653細(xì)胞
DF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1184細(xì)胞、UPCI:SCC090細(xì)胞、NCIH727細(xì)胞
H-748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel624細(xì)胞、MARC 145細(xì)胞、SK-RC 39細(xì)胞
Fox/NY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR751細(xì)胞、HCS-2/8細(xì)胞、SNB-19細(xì)胞
3T3 Swiss Albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVTOKO細(xì)胞、BNL CL2細(xì)胞、CCK81細(xì)胞
HCA-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP267細(xì)胞、Hep G2-Luc細(xì)胞、PBL細(xì)胞
Panc08.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M-1E8細(xì)胞、MEL-526細(xì)胞、NIH3T3-L1細(xì)胞
Hs 822.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-MC細(xì)胞、CV 1細(xì)胞、GCT0404細(xì)胞
H-1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3 LL細(xì)胞、Hs 274細(xì)胞、IHH4細(xì)胞
SUDHL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98-G細(xì)胞、NEC-8細(xì)胞、KP 4細(xì)胞
HLE-B3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2PK-3細(xì)胞、HTSMC細(xì)胞、RPE-hTERT細(xì)胞
SACC-83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM-TK-細(xì)胞、SGC996細(xì)胞、HCC-38細(xì)胞
GA-10 (Clone 4)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JM細(xì)胞、CEM細(xì)胞、KMY1022細(xì)胞
OCM-1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A.704細(xì)胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞、OCILY3細(xì)胞
UPCI-SCC090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L M (TK-)細(xì)胞、Panc 1細(xì)胞、NCI.H460細(xì)胞
OVCA432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU 19-19細(xì)胞、REC-1細(xì)胞、H-838細(xì)胞
NB.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHL 124細(xì)胞、OV-90細(xì)胞、FDCP1細(xì)胞
Hi5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JC細(xì)胞、SKCO1細(xì)胞、CEMx721.174.T2細(xì)胞
C4-2 B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR41P細(xì)胞、EB-3細(xì)胞、Panc-813細(xì)胞
H4-IIE-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 27細(xì)胞、Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞、Walker-Ca.256細(xì)胞
U-hth74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEL-526細(xì)胞、HuT-78細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞
HCC2157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR-32細(xì)胞、Panc10.05細(xì)胞、OV433細(xì)胞
NCI-H1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2110細(xì)胞、KYSE 510細(xì)胞、CNE1細(xì)胞
SKO-007 Adherent人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞系
CHO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-2細(xì)胞、EVSAT細(xì)胞、HECCL-1細(xì)胞
GM03671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-3A細(xì)胞、NCI-H295R細(xì)胞、E304細(xì)胞
SHIN3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO8910PM細(xì)胞、H187細(xì)胞、PC 61細(xì)胞
M-1 myeloid leukemia細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H69細(xì)胞、H69/P細(xì)胞、RAT2細(xì)胞
MHCC97細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK N SH細(xì)胞、BPH1細(xì)胞、LN299細(xì)胞
NS1-Ag 4/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Meat Animal Research Center-145細(xì)胞、AMO-1細(xì)胞、ESC細(xì)胞
Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupT1細(xì)胞、G 292 Clone A 141B1細(xì)胞、IR983F細(xì)胞
UCLA SO M14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-220細(xì)胞、CEF細(xì)胞、C2BBe 1細(xì)胞
CEMO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1395細(xì)胞、MADB 106細(xì)胞、NUGC-3細(xì)胞
HEK-293-FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NP-69細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞、D-407細(xì)胞
H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM C1細(xì)胞、SW 1353細(xì)胞、Vx2細(xì)胞
NCI-H920細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEC-B3細(xì)胞、COLO 357細(xì)胞、HR1K細(xì)胞
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