"BIC-1 Adherent人食管腺癌細胞系
細胞背景資料:食管腺癌;男性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
BIC-1 Adherent人食管腺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
SCaBER細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY7703細胞、RGC6細胞、L 428細胞
RBMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2 4510細胞、G401細胞、IPLB-SF-21-AE細胞
HCC-44細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NU-GC-2細胞、BLO11細胞、TH1細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HCC-1569細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSUDLCL2細胞、AN3 CA細胞、Hs606T細胞
HCC-1569細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSUDLCL2細胞、AN3 CA細胞、Hs606T細胞
H-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1648細胞、NALM6細胞、H4IIE細胞
細胞生長特性:貼壁
BIC-1 Adherent人食管腺癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
BJA-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3Ag1.2.3細胞、NE-1細胞、BC-020細胞
RCC10RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA801-95C細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞、MIO-M1細胞
NCIH520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-16細胞、A 172細胞、DC2.4細胞
RPMI 8226/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AC16 [Human hybrid]細胞、NCIH1650細胞、PANC-1細胞
NCIH1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG-1細胞、HuT 78細胞、NCIH1792細胞
TC-1 [Mouse lung]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 274細胞、HuH-28細胞、NCIH2023細胞
U266細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-4-11細胞、H1993細胞、AZ-521細胞
Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY7701細胞、CNE-2細胞、PK (15)細胞
Tn-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97H細胞、AG06814-M細胞、16-HBE細胞
QG-56細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SY5Y細胞、Tu-686細胞、SB細胞
KYSE510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eph4 1424細胞、AE1201細胞、Ramos 2G6.4C10細胞
H1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jiyoye細胞、GM03671C細胞、GM2131細胞
HBE135-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERIRb1細胞、NFS 60細胞、GalK1細胞
BIC-1 Adherent人食管腺癌細胞系
BHP 10-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:W133細胞、Jurkat clone A3細胞、RPMI 1788細胞
MC/9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A7r5細胞、H-1355細胞、CMEC/D3細胞
OCI-Ly03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L929細胞、A-253細胞、MC/9細胞
OCI-Ly03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L929細胞、A-253細胞、MC/9細胞
DLD-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1419細胞、BGC-823細胞、LS1034細胞
alpha-TC1.6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Line 522細胞、MV 4;11細胞、Leydig細胞
WM 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FU-OV-1細胞、N-2a細胞、BT325細胞
OEC33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR-75-1細胞、HPF細胞、Wien133細胞
LTEP-s細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC6細胞、CCRF-CEM/S細胞、TR 146細胞
T-98G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320DM細胞、TC7細胞、MV-522細胞
Soleus clone 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Glomerular Endothelial細胞、HT 1080細胞、OCI-LY-10細胞
T98 G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon38細胞、MMQ細胞、32D.cl3細胞
NCI N87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGC-803細胞、MV4-11細胞、NCIH208細胞
QBC-939細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC13細胞、TSUpr1細胞、P31/Fujioka細胞
G-Olig2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1-2細胞、SNUC1細胞、Calu 6細胞
JIMT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFK1細胞、H-1568細胞、BJA-B細胞
CFSC-2G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2405細胞、CCD-18Co細胞、NK 10a細胞
HOC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIXC-002細胞、H1092細胞、OVCA420細胞
HT55細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 159PT細胞、UM-UC-14細胞、ML-2細胞
NCI-H1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat-1細胞、MHCC97L細胞、NCI-H1668細胞
Onda 11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)C細胞、GM02219D細胞、COLO206細胞
NCI-H526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8.653細胞、HS-940-T細胞、MCMEC細胞
L(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC57G細胞、SUNE-1細胞、RKO-AS-45-1細胞
Immortal Pig Intestinal-2I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO Lec1細胞、LM TK negative細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞
H-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc813細胞、Karpas299細胞、ZR75-30細胞
SUPB15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12C-PM6細胞、HRPEpiC細胞、A 2058細胞
LLC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH-7細胞、MDA-MB435細胞、JROECL33細胞
LLC-PK(1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞、mRTEC細胞、HLMVEC細胞
NPA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rabbit Kidney 13細胞、JB-6細胞、GM16136細胞
A.704細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-EBNA細胞、16HBE140細胞、HSC-2細胞
MES-SA-Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-39細胞、3T3細胞、38C13細胞
A.704細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-EBNA細胞、16HBE140細胞、HSC-2細胞
H-522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-F細胞、HTR8/SVneo細胞、H-1703細胞
Hs600T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK1細胞、Hs832T細胞、U20-S細胞
JHH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC-9細胞、LP1細胞、IM95細胞
LY-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EJ1細胞、A498細胞、Colon-26細胞
UCH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC10RGB細胞、LA-N-5細胞、H1944細胞
UCH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC10RGB細胞、LA-N-5細胞、H1944細胞
343MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fox/NY細胞、ECC-12細胞、BCP-1細胞
Nb2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM clone 7細胞、PIGI細胞、Kato-III細胞
HN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPB-ALL細胞、NOZ細胞、MOPC細胞
Jeko1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel-RM細胞、MMVECs細胞、ChaGo-K1細胞
BIC-1 Adherent人食管腺癌細胞系
NCI-H865細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-6細胞、AZ-521細胞、SU-DHL-2細胞
Hs-274-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GI-1細胞、HeLa S-3細胞、Pfeiffer細胞
FL62891細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-SG231細胞、SNU-601細胞、SNU-668細胞
HCT-GEO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 126細胞、H460細胞、NALM6細胞
LA4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293/EBNA-1細胞、NS1細胞、T HEECs細胞
NCI-HUT-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKUT1細胞、Karpas 299細胞、H596細胞
NMC-G1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB157細胞、HLCL9B10細胞、PanC1細胞
IMCD-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2009細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞、LIM 1215細胞
SK Mel 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 5細胞、MUG-Chor1細胞、SW-579細胞
Bx-PC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs832T細胞、B95.8細胞、MX-1細胞
beta TC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI1788細胞、LM6細胞、CNE1細胞
NCIH520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-16細胞、WEHI 164 TC細胞、TC-1[JHU-1]細胞
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