"BAR-T Adherent人食管上皮細胞系
細胞背景資料:食管;HGNC-TERT轉化;男性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項:1.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈,消毒半小時以上。2.進入凈化室前先關閉紫外燈,打開超凈臺風機,等待30min以上,以排盡臭氧。3.穿好隔離衣,戴好口罩,帽子。4.風淋2分鐘。5.0.1%水泡手,擦干。6.點燃酒精燈;超凈臺內應避免放入過多的物品;使用的吸管,滴管,試管,培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。7.打開各類瓶蓋前先過火,以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰,鑷子使用前應經火焰燒灼。8.水平式風機的超凈臺,應使瓶口斜置,應盡量避免瓶口敞開直立。9.同一根吸管或滴管不應連續(xù)用于幾個不同的細胞系;吸取培養(yǎng)基的吸管應離開培養(yǎng)瓶或試管口0.5cm,避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口;以防止細胞系的互相混雜污染。10.漏在培養(yǎng)瓶上或臺上的液體,立即用酒精棉球擦凈。11.操作完畢后恢復工作臺面。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
BAR-T Adherent人食管上皮細胞系
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
GM-346細胞系相關產品:OVHM細胞、KM H-2細胞、NBLS細胞
SUM 159PT細胞系相關產品:GM02132細胞、TE-5細胞、P3-X63Ag8.653細胞
C-8161細胞系相關產品:PLB-985細胞、BS-C-1細胞、SNU-423細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
NK 10a細胞系相關產品:NCIH1734細胞、alpha TC1.6細胞、MPP-89細胞
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HCC-1806細胞系相關產品:D324 Med細胞、RBL 2H3細胞、HCS2/8細胞
細胞生長特性:貼壁
BAR-T Adherent人食管上皮細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
如何進行細胞復蘇:1)從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,并不時搖動令其盡快融化;2)從37℃水浴中取出凍存管,打開蓋子,用吸管吸出細胞懸液,加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液,混勻;3)離心,1000rpm,5min;4)棄去上清液,加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞,計數,調整細胞密度,接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);5)次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)?!緶剀疤嵝选浚?從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養(yǎng)細胞都可以用于凍存,但為對數生長期細胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液;2)將凍存管放入液氮容器或從中取出時,要做好防護工作(戴棉手套),以免凍傷;3)凍存和復蘇用新配制的培養(yǎng)液。細胞復蘇的時候,有些初次實驗員將凍存管從液氮中取出后,放在室溫下,經常發(fā)生凍存管爆炸,該怎么避免出現這種情況嗎?其中在擰緊凍存管的時候是否有哪些細節(jié)要注意的?一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺中用酒精棉球擦試管口,再稍擰松蓋子,再放37度水浴鍋中搖溶,在將細胞轉移到裝有37度預熱過的培養(yǎng)基的試管中,迅速離心,再用培養(yǎng)基洗一遍。
G292細胞系相關產品:Nb 2細胞、HS940細胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞
WC00044細胞系相關產品:HEK 293 EBNA細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、MDA-175細胞
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Jurkat, Clone E6-1細胞系相關產品:H2452細胞、HEYA8細胞、MC3T3E1細胞
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hTERT-RPE-1細胞系相關產品:SAS細胞、MASMC細胞、TE32細胞
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RCF細胞系相關產品:HA細胞、Malme-3 M細胞、MRASMC細胞
NCI-H322T細胞系相關產品:Rh30細胞、H-660細胞、BC-PAP細胞
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BRL 3A細胞系相關產品:PFSK細胞、UO.31細胞、HCC1954BL細胞
32D clone 3細胞系相關產品:A875細胞、MDA231-LM2細胞、N-9細胞
HCC-78細胞系相關產品:H358細胞、RPMC細胞、L-Wnt-3A細胞
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Walker-256-TC細胞系相關產品:CWR22R細胞、EFM192細胞、MV(4;11)細胞
MUTZ-1細胞系相關產品:SKM1細胞、HEK293-EBNA細胞、HIT-T15細胞
U373 MG細胞系相關產品:D-341細胞、NUGC-4細胞、H-1395細胞
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UWB1-289細胞系相關產品:A2780/CP細胞、HHFK細胞、DBTRG-05MG細胞
HS 1.Tes細胞系相關產品:MCFs細胞、NCI-747細胞、NCI-H-69細胞
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GC-2細胞系相關產品:OVCAR 4細胞、C57/B6-L細胞、TSCC1細胞
NCI-H2444細胞系相關產品:MPC-5細胞、NCI-H2009細胞、KPL4細胞
SCC4細胞系相關產品:COLO 201細胞、SMA 560細胞、Pt K2細胞
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SK-RC 39細胞系相關產品:TE-15細胞、HT1080細胞、NCI.H23細胞
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IMR32細胞系相關產品:Tu686細胞、TE8細胞、266 Bl細胞
CD 18細胞系相關產品:KU1919細胞、Earle's L cells細胞、HR-8348細胞
3AO細胞系相關產品:TH1細胞、H711細胞、RN細胞
R1610細胞系相關產品:H510細胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞、HUT 28細胞
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Daudi細胞系相關產品:SW 837細胞、SK-Mel 1細胞、NKM1細胞
HT(H9)細胞系相關產品:Jurkat E6-1細胞、PLA-801C細胞、CG-4細胞
293E細胞系相關產品:INS-1E細胞、LS 174 T細胞、SHP77細胞
DAKIKI Clone 1細胞系相關產品:A-431細胞、766T細胞、LLC-MK-2細胞
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HPDE細胞系相關產品:PC2細胞、CTSC-3細胞、P3X63 AG 8.653細胞
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PANC 203細胞系相關產品:TE4細胞、WEHI-3細胞、L-WRN細胞
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SK-BR3細胞系相關產品:MKN-74細胞、DMS-114細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞
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H-2291細胞系相關產品:SuDHL 4細胞、HPB-ALL細胞、COLO206F細胞
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