"TPC-1 Adherent人甲狀腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：甲狀腺乳頭狀癌；女性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問(wèn)題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過(guò)程沒(méi)有問(wèn)題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問(wèn)題，還有確信拿來(lái)的細(xì)胞沒(méi)問(wèn)題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問(wèn)題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱?jiǎn)單，而且死板。１、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，這是一般人所注意不到的，即使書(shū)上也不講這個(gè)問(wèn)題，太長(zhǎng)的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會(huì)死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過(guò)７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻，這個(gè)有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個(gè)事情，因?yàn)檫@個(gè)東西流程長(zhǎng)。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過(guò)密。還有，不贊成孵箱污染這個(gè)概念的，所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話(huà)，這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o(wú)論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問(wèn)題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問(wèn)題，這個(gè)很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個(gè)見(jiàn)得太多了，別不當(dāng)會(huì)事。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
TPC-1 Adherent人甲狀腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長(zhǎng)期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細(xì)胞因傳代而遲早會(huì)出現(xiàn)變異，有時(shí)因寄贈(zèng)、交換和購(gòu)買(mǎi)，培養(yǎng)細(xì)胞從一個(gè)實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)運(yùn)到另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室，的策略是進(jìn)行低溫保存。這對(duì)于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要。現(xiàn)簡(jiǎn)要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點(diǎn)。細(xì)胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時(shí)，細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài)，故可以長(zhǎng)期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過(guò)０~２０℃階段的處理過(guò)程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：凍存細(xì)胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細(xì)胞要快速融化，并直接加入完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。若細(xì)胞對(duì)凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細(xì)胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基鋪板細(xì)胞。１ml凍存細(xì)胞使用１０~２０ml完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基。進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)，細(xì)胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細(xì)胞/ml；培養(yǎng)細(xì)胞１２到２４小時(shí)，更換新鮮的完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細(xì)胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細(xì)胞加入到大約２５ml完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細(xì)胞，并且進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)。細(xì)胞鋪板，細(xì)胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細(xì)胞/ml。細(xì)胞的分化：一個(gè)成年人全身細(xì)胞總數(shù)約１０１２個(gè)，可以區(qū)分為２００多種不同類(lèi)型的細(xì)胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細(xì)胞均來(lái)自一個(gè)受精卵細(xì)胞。所以，通常把發(fā)育過(guò)程中，細(xì)胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過(guò)程稱(chēng)為細(xì)胞分化。細(xì)胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細(xì)胞的產(chǎn)生和分化，這個(gè)過(guò)程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長(zhǎng)不斷分裂的細(xì)胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細(xì)胞周期中G１期開(kāi)始時(shí)一個(gè)確定的點(diǎn)G０點(diǎn)“逃逸”出細(xì)胞周期。旺盛生長(zhǎng)分裂的細(xì)胞和各種分化了的細(xì)胞，它們的基因表達(dá)和代謝活動(dòng)各不相同。
SKRC-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2342細(xì)胞、JOSK-M細(xì)胞、SUM 52細(xì)胞
UMR106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW-nu細(xì)胞、Panc203細(xì)胞、Mouse INsulinoma 6細(xì)胞
SK-OV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239-A細(xì)胞、TCMK1細(xì)胞、NCIH2405細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
NCI H548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC 38細(xì)胞、MDAMB175VII細(xì)胞、AQ-Mel細(xì)胞
H295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mia PACA 2細(xì)胞、MM134細(xì)胞、H660細(xì)胞
Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4I細(xì)胞、AR4-IP細(xì)胞、NCI-H2347細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
TPC-1 Adherent人甲狀腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)問(wèn)題總結(jié)：１)一般客戶(hù)拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶(hù)收到細(xì)胞后先不開(kāi)蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開(kāi)封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過(guò)８０%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過(guò)８０%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請(qǐng)確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無(wú)法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類(lèi)？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，所以血清的種類(lèi)和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
MB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN 45細(xì)胞、KNS-81細(xì)胞、NRK 49F細(xì)胞
CMEC/D3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DB細(xì)胞、GM00215A細(xì)胞、FBHE細(xì)胞
Eca-109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL1細(xì)胞、F-36P細(xì)胞、HCMEC(BL12-H)細(xì)胞
NCI H929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 159細(xì)胞、J82COT細(xì)胞、CCRF-CEM細(xì)胞
SK-N-BE(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2023細(xì)胞、NEC8細(xì)胞、CALU 1細(xì)胞
H-226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSC96細(xì)胞、CAL 62細(xì)胞、NCI-H28細(xì)胞
SN12C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H727細(xì)胞、D283-MED細(xì)胞、TJ905細(xì)胞
MV-4-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-3細(xì)胞、SPC-A1細(xì)胞、UACC-893細(xì)胞
NTera 2/cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1155細(xì)胞、OVCAR432細(xì)胞、ssMCF-7細(xì)胞
HCT 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS42細(xì)胞、P-388D1細(xì)胞、WEHI 231細(xì)胞
NCI-HUT-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TR-146細(xì)胞、ECV 304細(xì)胞、H-1869細(xì)胞
DHL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞、Hu-P-T4細(xì)胞、SBC5細(xì)胞
SCC VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3-CA細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞、MFE296細(xì)胞
TPC-1 Adherent人甲狀腺癌細(xì)胞系
HFLS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC11細(xì)胞、HCC-9204細(xì)胞、HEM細(xì)胞
P560細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT-78細(xì)胞、H889細(xì)胞、OVCAR-10細(xì)胞
SNU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA436細(xì)胞、U-138MG細(xì)胞、U373-MG細(xì)胞
SNU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA436細(xì)胞、U-138MG細(xì)胞、U373-MG細(xì)胞
BXPC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARPE-19細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞、H-7721細(xì)胞
KB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-ALL1細(xì)胞、H-2171細(xì)胞、SUM-159PT細(xì)胞
SUM 149細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Detroit-562細(xì)胞、CHL1細(xì)胞、HT(H9)細(xì)胞
Hs 840.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT-2細(xì)胞、HCC-2279細(xì)胞、Human Liver-7702細(xì)胞
H-1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT1/A細(xì)胞、SUM-52-PE細(xì)胞、Hca-F細(xì)胞
P3J HR1-K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-101D細(xì)胞、HCC1008細(xì)胞、NCIH1563細(xì)胞
L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PMVEC細(xì)胞、DU-4475細(xì)胞、NCI-SNU-668細(xì)胞
BEND細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJ-Rh 30細(xì)胞、HBMEC細(xì)胞、MOLP-2細(xì)胞
PC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK-2細(xì)胞、NCI-H1770細(xì)胞、NUGC3細(xì)胞
H-378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW839細(xì)胞、NCI-H87細(xì)胞、Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞
H747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUD-4細(xì)胞、MDA MB 231細(xì)胞、SUM-52PE細(xì)胞
NRK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DC2.4細(xì)胞、Sp2/O-Ag14細(xì)胞、NCTC-3960細(xì)胞
VMM39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A498細(xì)胞、SK-ML2細(xì)胞、KCL22細(xì)胞
ONS76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCam 2細(xì)胞、He-La細(xì)胞、MG63細(xì)胞
Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-810細(xì)胞、KAT-5細(xì)胞、MB39細(xì)胞
RPMI 7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63.Ag8.653細(xì)胞、BEAS 2B細(xì)胞、SU-DHL-4細(xì)胞
H-2198細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS-11細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞、JJN-3細(xì)胞
SK-N-MC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-02細(xì)胞、TE354T細(xì)胞、MDA-MB231細(xì)胞
LC-2/ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-85 clone 5細(xì)胞、SDBMSC細(xì)胞、AG 9細(xì)胞
NOR 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan1細(xì)胞、CTX TNA2細(xì)胞、Hut292細(xì)胞
Tj-905細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GH 3細(xì)胞、COLO678細(xì)胞、mousepodocyte細(xì)胞
KYSE 270細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP92細(xì)胞、Hs739T細(xì)胞、G-361細(xì)胞
BCP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞、High-5細(xì)胞、H-810細(xì)胞
RPMI 7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 53細(xì)胞、SR-786細(xì)胞、SN12C-PM6細(xì)胞
HUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FK81細(xì)胞、HuT78細(xì)胞、OSK-1細(xì)胞
639 V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CD18細(xì)胞、V-79-4細(xì)胞、FCCH1024細(xì)胞
BT 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-460細(xì)胞、NE-4C細(xì)胞、NCI-H2122細(xì)胞
SuDHL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSKMC細(xì)胞、BE2M17細(xì)胞、NCIH3255細(xì)胞
SCC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Douglas Foster-1細(xì)胞、ASH3細(xì)胞、Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞
SK-MEL-MeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP2-0-Ag14細(xì)胞、Ly8細(xì)胞、NEC細(xì)胞
Ca761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2170細(xì)胞、ST細(xì)胞、PTK 1細(xì)胞
HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3M細(xì)胞、HPAF2細(xì)胞、MLM細(xì)胞
NALM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos (RA)細(xì)胞、IPEC-J2細(xì)胞、CTV1細(xì)胞
Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL1細(xì)胞、HEK-293A細(xì)胞、MES 23.5細(xì)胞
MLMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-266細(xì)胞、GDM-1細(xì)胞、HuT-78細(xì)胞
SUM159細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DH-82細(xì)胞、GM02132C細(xì)胞、SK-RC 42細(xì)胞
SF126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMH-2細(xì)胞、MCA 205細(xì)胞、MKN 7細(xì)胞
A2780/Taxol細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT112細(xì)胞、OVMANA細(xì)胞、HSC/mHSC細(xì)胞
TPC-1 Adherent人甲狀腺癌細(xì)胞系
HFLS-RA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Evsa-T細(xì)胞、J774 A.1細(xì)胞、RAW 264.7細(xì)胞
H322T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H676B細(xì)胞、MV-522細(xì)胞、U138MG細(xì)胞
8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-15細(xì)胞、H-1930細(xì)胞、NCI H295R細(xì)胞
H2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：38C-13細(xì)胞、HIT T-15細(xì)胞、KB細(xì)胞
SNU387細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3L1細(xì)胞、SNU739細(xì)胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞
N-Tera-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL-2H3細(xì)胞、IEC 18細(xì)胞、PC-3M IE8細(xì)胞
KYSE0030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hOMF細(xì)胞、P31/Fujioka細(xì)胞、Human Epithelioma-2細(xì)胞
H-524細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA01/04細(xì)胞、FC33細(xì)胞、Rat Glomerular Endothelial細(xì)胞
H-1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H841細(xì)胞、HLE細(xì)胞、YH細(xì)胞
RCC10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAPC4細(xì)胞、SCC25細(xì)胞、H-1651細(xì)胞
HPDE6c7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16F1細(xì)胞、SKUT1細(xì)胞、D283細(xì)胞
Eca-109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL1細(xì)胞、H-522細(xì)胞、HCC94細(xì)胞
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