"TPC-1 Adherent人甲狀腺癌細胞系
細胞背景資料：甲狀腺乳頭狀癌；女性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題。總結２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
TPC-1 Adherent人甲狀腺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉運到另一個實驗室，的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?，F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時，細胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止狀態(tài)，故可以長期保存。細胞低溫保存的關鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇：凍存細胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。１ml凍存細胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù)，細胞接種應該至少在３×１０(５)活細胞/ml；培養(yǎng)細胞１２到２４小時，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞，并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板，細胞接種應該至少為３×１０(５)活細胞/ml。細胞的分化：一個成年人全身細胞總數(shù)約１０１２個，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細胞：形態(tài)結構，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細胞后代在形態(tài)、結構和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細胞的產(chǎn)生和分化，這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞，轉入分化，通常從細胞周期中G１期開始時一個確定的點G０點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞，它們的基因表達和代謝活動各不相同。
SKRC-20細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2342細胞、JOSK-M細胞、SUM 52細胞
UMR106細胞系相關產(chǎn)品：TGW-nu細胞、Panc203細胞、Mouse INsulinoma 6細胞
SK-OV-3細胞系相關產(chǎn)品：WM-239-A細胞、TCMK1細胞、NCIH2405細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCI H548細胞系相關產(chǎn)品：HCC 38細胞、MDAMB175VII細胞、AQ-Mel細胞
H295R細胞系相關產(chǎn)品：Mia PACA 2細胞、MM134細胞、H660細胞
Fortner's melanotic melanoma #3細胞系相關產(chǎn)品：C4I細胞、AR4-IP細胞、NCI-H2347細胞
細胞生長特性：貼壁
TPC-1 Adherent人甲狀腺癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
MB231細胞系相關產(chǎn)品：MKN 45細胞、KNS-81細胞、NRK 49F細胞
CMEC/D3細胞系相關產(chǎn)品：DB細胞、GM00215A細胞、FBHE細胞
Eca-109細胞系相關產(chǎn)品：SKMEL1細胞、F-36P細胞、HCMEC(BL12-H)細胞
NCI H929細胞系相關產(chǎn)品：SUM 159細胞、J82COT細胞、CCRF-CEM細胞
SK-N-BE(2)細胞系相關產(chǎn)品：H2023細胞、NEC8細胞、CALU 1細胞
H-226細胞系相關產(chǎn)品：RSC96細胞、CAL 62細胞、NCI-H28細胞
SN12C細胞系相關產(chǎn)品：H727細胞、D283-MED細胞、TJ905細胞
MV-4-11細胞系相關產(chǎn)品：OCILY-3細胞、SPC-A1細胞、UACC-893細胞
NTera 2/cl.D1細胞系相關產(chǎn)品：H-1155細胞、OVCAR432細胞、ssMCF-7細胞
HCT 8細胞系相關產(chǎn)品：KNS42細胞、P-388D1細胞、WEHI 231細胞
NCI-HUT-460細胞系相關產(chǎn)品：TR-146細胞、ECV 304細胞、H-1869細胞
DHL8細胞系相關產(chǎn)品：Rat Chondrosarcoma Swarm細胞、Hu-P-T4細胞、SBC5細胞
SCC VII細胞系相關產(chǎn)品：AN3-CA細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、MFE296細胞
TPC-1 Adherent人甲狀腺癌細胞系
HFLS細胞系相關產(chǎn)品：MPC11細胞、HCC-9204細胞、HEM細胞
P560細胞系相關產(chǎn)品：HuT-78細胞、H889細胞、OVCAR-10細胞
SNU-1細胞系相關產(chǎn)品：MDA436細胞、U-138MG細胞、U373-MG細胞
SNU-1細胞系相關產(chǎn)品：MDA436細胞、U-138MG細胞、U373-MG細胞
BXPC3細胞系相關產(chǎn)品：ARPE-19細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、H-7721細胞
KB細胞系相關產(chǎn)品：T-ALL1細胞、H-2171細胞、SUM-159PT細胞
SUM 149細胞系相關產(chǎn)品：Detroit-562細胞、CHL1細胞、HT(H9)細胞
Hs 840.T細胞系相關產(chǎn)品：SUIT-2細胞、HCC-2279細胞、Human Liver-7702細胞
H-1436細胞系相關產(chǎn)品：PNT1/A細胞、SUM-52-PE細胞、Hca-F細胞
P3J HR1-K細胞系相關產(chǎn)品：A-101D細胞、HCC1008細胞、NCIH1563細胞
L細胞系相關產(chǎn)品：PMVEC細胞、DU-4475細胞、NCI-SNU-668細胞
BEND細胞系相關產(chǎn)品：SJ-Rh 30細胞、HBMEC細胞、MOLP-2細胞
PC3細胞系相關產(chǎn)品：MDCK-2細胞、NCI-H1770細胞、NUGC3細胞
H-378細胞系相關產(chǎn)品：SW839細胞、NCI-H87細胞、Alpha Mouse Liver 12細胞
H747細胞系相關產(chǎn)品：SUD-4細胞、MDA MB 231細胞、SUM-52PE細胞
NRK細胞系相關產(chǎn)品：DC2.4細胞、Sp2/O-Ag14細胞、NCTC-3960細胞
VMM39細胞系相關產(chǎn)品：A498細胞、SK-ML2細胞、KCL22細胞
ONS76細胞系相關產(chǎn)品：TCam 2細胞、He-La細胞、MG63細胞
Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞系相關產(chǎn)品：H-810細胞、KAT-5細胞、MB39細胞
RPMI 7951細胞系相關產(chǎn)品：X63.Ag8.653細胞、BEAS 2B細胞、SU-DHL-4細胞
H-2198細胞系相關產(chǎn)品：KMS-11細胞、NCCIT細胞、JJN-3細胞
SK-N-MC細胞系相關產(chǎn)品：Panc-02細胞、TE354T細胞、MDA-MB231細胞
LC-2/ad細胞系相關產(chǎn)品：TE-85 clone 5細胞、SDBMSC細胞、AG 9細胞
NOR 10細胞系相關產(chǎn)品：Capan1細胞、CTX TNA2細胞、Hut292細胞
Tj-905細胞系相關產(chǎn)品：GH 3細胞、COLO678細胞、mousepodocyte細胞
KYSE 270細胞系相關產(chǎn)品：HOP92細胞、Hs739T細胞、G-361細胞
BCP-1細胞系相關產(chǎn)品：P3X63Ag8-6-5-3細胞、High-5細胞、H-810細胞
RPMI 7666細胞系相關產(chǎn)品：DMS 53細胞、SR-786細胞、SN12C-PM6細胞
HUC細胞系相關產(chǎn)品：FK81細胞、HuT78細胞、OSK-1細胞
639 V細胞系相關產(chǎn)品：CD18細胞、V-79-4細胞、FCCH1024細胞
BT 20細胞系相關產(chǎn)品：NCI-HUT-460細胞、NE-4C細胞、NCI-H2122細胞
SuDHL 1細胞系相關產(chǎn)品：HSKMC細胞、BE2M17細胞、NCIH3255細胞
SCC7細胞系相關產(chǎn)品：Douglas Foster-1細胞、ASH3細胞、Balb/3T3-4-Cl31細胞
SK-MEL-MeWo細胞系相關產(chǎn)品：SP2-0-Ag14細胞、Ly8細胞、NEC細胞
Ca761細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2170細胞、ST細胞、PTK 1細胞
HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞系相關產(chǎn)品：Y3M細胞、HPAF2細胞、MLM細胞
NALM6細胞系相關產(chǎn)品：Ramos (RA)細胞、IPEC-J2細胞、CTV1細胞
Rat Chondrosarcoma Swarm細胞系相關產(chǎn)品：HL1細胞、HEK-293A細胞、MES 23.5細胞
MLMEC細胞系相關產(chǎn)品：U-266細胞、GDM-1細胞、HuT-78細胞
SUM159細胞系相關產(chǎn)品：DH-82細胞、GM02132C細胞、SK-RC 42細胞
SF126細胞系相關產(chǎn)品：KMH-2細胞、MCA 205細胞、MKN 7細胞
A2780/Taxol細胞系相關產(chǎn)品：RT112細胞、OVMANA細胞、HSC/mHSC細胞
TPC-1 Adherent人甲狀腺癌細胞系
HFLS-RA細胞系相關產(chǎn)品：Evsa-T細胞、J774 A.1細胞、RAW 264.7細胞
H322T細胞系相關產(chǎn)品：H676B細胞、MV-522細胞、U138MG細胞
8226細胞系相關產(chǎn)品：HCT-15細胞、H-1930細胞、NCI H295R細胞
H2107細胞系相關產(chǎn)品：38C-13細胞、HIT T-15細胞、KB細胞
SNU387細胞系相關產(chǎn)品：3T3L1細胞、SNU739細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞
N-Tera-2細胞系相關產(chǎn)品：RBL-2H3細胞、IEC 18細胞、PC-3M IE8細胞
KYSE0030細胞系相關產(chǎn)品：hOMF細胞、P31/Fujioka細胞、Human Epithelioma-2細胞
H-524細胞系相關產(chǎn)品：SRA01/04細胞、FC33細胞、Rat Glomerular Endothelial細胞
H-1581細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H841細胞、HLE細胞、YH細胞
RCC10細胞系相關產(chǎn)品：LAPC4細胞、SCC25細胞、H-1651細胞
HPDE6c7細胞系相關產(chǎn)品：B16F1細胞、SKUT1細胞、D283細胞
Eca-109細胞系相關產(chǎn)品：SKMEL1細胞、H-522細胞、HCC94細胞
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