"WiDr Adherent人結(jié)直腸癌細胞系
細胞背景資料:結(jié)腸癌;女性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞凍存復蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導,使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
WiDr Adherent人結(jié)直腸癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞復蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴,浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應帶有防護眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細胞懸液,裝入離心管中,再補加10ml培養(yǎng)液,吹打使細胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細胞時,處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請立即通知細胞實驗室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細胞回溫至37°C,并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中,或細胞已長滿盤,則將細胞做傳代培養(yǎng)。
Swiss 3T6細胞系相關產(chǎn)品:GM02219D細胞、C3H/10T1/2-clone8細胞、KM-12細胞
TFK-1細胞系相關產(chǎn)品:PNT1A細胞、MES-SA-Dx5細胞、MDA PCa 2b細胞
Helacyton gartleri細胞系相關產(chǎn)品:HCGC細胞、VP229細胞、RBL.2H3細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Tn5B1-4細胞系相關產(chǎn)品:PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、B16/F10細胞、RCC10RGB細胞
GM07404細胞系相關產(chǎn)品:639-V細胞、Pa017C細胞、OCI/AML-5細胞
BCP1細胞系相關產(chǎn)品:M4e細胞、SK-CO-1細胞、IOSE29細胞
細胞生長特性:貼壁
WiDr Adherent人結(jié)直腸癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;試劑保存不當;比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細胞濃度;讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預防冷凍管爆裂。
HuT-102細胞系相關產(chǎn)品:102PT細胞、SK-UT-1細胞、P3-X63Ag8細胞
HMrSV5細胞系相關產(chǎn)品:CL11細胞、NCIH1437細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞
NCIH1581細胞系相關產(chǎn)品:H-125細胞、EB-2細胞、Soleus clone 8細胞
MDBK (NBL-1)細胞系相關產(chǎn)品:H378細胞、RIN-m細胞、COR-L23/P細胞
DV90細胞系相關產(chǎn)品:SRA01/04 (HLE)細胞、RenCa細胞、373 MG細胞
Hs 766.T細胞系相關產(chǎn)品:NCIH838細胞、HPMC細胞、HT 1376.T細胞
NCIH2342細胞系相關產(chǎn)品:RTMC細胞、ssMCF-7細胞、CAL148細胞
Hs-852-T細胞系相關產(chǎn)品:U-343MG細胞、H-295R細胞、ACC2細胞
NBL-12細胞系相關產(chǎn)品:PT-K75細胞、GM-637細胞、WI 38細胞
ATN-1細胞系相關產(chǎn)品:Kit 225細胞、EMT-6細胞、H1915細胞
UM2細胞系相關產(chǎn)品:Pt K1 (NBL-3)細胞、MDA-MB-435S細胞、Molm 14細胞
Hs 636 T細胞系相關產(chǎn)品:SNG-M細胞、Hs.27細胞、A-101D細胞
SCC-15細胞系相關產(chǎn)品:MKN 28細胞、SK-MEL-1細胞、OB2細胞
WiDr Adherent人結(jié)直腸癌細胞系
HCC-1806細胞系相關產(chǎn)品:D324 Med細胞、RBL 2H3細胞、HCS2/8細胞
2E8細胞系相關產(chǎn)品:HCT 8細胞、U-87細胞、SKUT1細胞
KU 812F細胞系相關產(chǎn)品:RPMI-8226S細胞、MRC-9細胞、HCC1171細胞
KU 812F細胞系相關產(chǎn)品:RPMI-8226S細胞、MRC-9細胞、HCC1171細胞
UPCISCC154細胞系相關產(chǎn)品:FTC133細胞、SK-N-BE(1)n細胞、138 MG細胞
Hs 870.T細胞系相關產(chǎn)品:RPVSMC細胞、MRC5細胞、KYSE510細胞
SO-RB50細胞系相關產(chǎn)品:U118-MG細胞、NP69SV40T細胞、H-660細胞
JIMT細胞系相關產(chǎn)品:HECV細胞、OCILY19細胞、SUPB15細胞
MLE 12細胞系相關產(chǎn)品:MLA144細胞、MDA MB 453細胞、GM03569細胞
Hs 600.T細胞系相關產(chǎn)品:B 95.8細胞、SuDHL 1細胞、H1963細胞
H1703細胞系相關產(chǎn)品:DAKIKI Clone 1細胞、MDA1386細胞、CACO2細胞
Ramos(RA1)細胞系相關產(chǎn)品:IPEC-J2細胞、SK-Mel 2細胞、COLO320/DM細胞
HCC-78細胞系相關產(chǎn)品:H358細胞、RPMC細胞、L-Wnt-3A細胞
M1細胞系相關產(chǎn)品:VM-CUB-1細胞、COLO-320細胞、MDA-MB-435S細胞
P1-Raji細胞系相關產(chǎn)品:RCC-10RGB細胞、MG-HU-3細胞、OCI-AML-5細胞
Mo7e細胞系相關產(chǎn)品:H-2196細胞、CAKI 2細胞、NCI-H510細胞
JKT-1細胞系相關產(chǎn)品:HEYA8細胞、NCI-SNU-449細胞、HCC0366細胞
NCI-H2009細胞系相關產(chǎn)品:CHP 212細胞、LS 174T細胞、WEHI3細胞
PC-9細胞系相關產(chǎn)品:CWR-22rv1細胞、V79-GalK1細胞、JJN3細胞
Pa14C細胞系相關產(chǎn)品:DLD 1細胞、HL7702細胞、RPMI no. 8226細胞
CCF-STTG1細胞系相關產(chǎn)品:MT-2J細胞、ME 180細胞、NCI-H1184細胞
Vero 76 clone E-6細胞系相關產(chǎn)品:SK HEP 01細胞、JEKO細胞、SKNSH細胞
H596細胞系相關產(chǎn)品:GA-10(Clone 4)細胞、CCD 19Lu細胞、Dakiki細胞
S91細胞系相關產(chǎn)品:EFM192細胞、Walker-256細胞、MDAMB134細胞
IHH-4細胞系相關產(chǎn)品:PE CA PJ34細胞、CEM-C1細胞、L 132細胞
Panc 03.27細胞系相關產(chǎn)品:Scott細胞、PANC-04-03細胞、MAVER1細胞
KLN 205細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-175細胞、COLO357細胞、Hep3B細胞
BALB/3T3 clone A31細胞系相關產(chǎn)品:CHO-ori細胞、RC-2細胞、LS-174細胞
EC-GI細胞系相關產(chǎn)品:MV-3細胞、PK13細胞、293-GP細胞
HeLa 229細胞系相關產(chǎn)品:NTERA-2cl.D1細胞、LS 180細胞、FRTL5細胞
Gerner 7666細胞系相關產(chǎn)品:Hs 821.T細胞、RT 112細胞、HEK 293A細胞
PK-136細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1876細胞、NCI-H295細胞、DHL-8細胞
NB-19細胞系相關產(chǎn)品:HREC細胞、PGLH7細胞、F98細胞
MCA205細胞系相關產(chǎn)品:JB-6細胞、COLO 320DM細胞、293c18細胞
QGY 7701細胞系相關產(chǎn)品:NCI H23細胞、HOPC細胞、MS1細胞
NCI-SNU-5細胞系相關產(chǎn)品:HRMC細胞、RIN-14B細胞、THC-8307細胞
MiaPaCa2細胞系相關產(chǎn)品:HEC151細胞、CA 46細胞、KM12SM細胞
MiaPaCa2細胞系相關產(chǎn)品:HEC151細胞、CA 46細胞、KM12SM細胞
NCI-H735細胞系相關產(chǎn)品:OVCA433細胞、MES-SA Dx5細胞、OsACL細胞
HCT116細胞系相關產(chǎn)品:Rat podocyte細胞、MKN 45細胞、SK-N-BE(2)C細胞
SJSA細胞系相關產(chǎn)品:CAL 12T細胞、MHCC-LM3細胞、Th17細胞
MPC-5細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-886細胞、NCIH1703細胞、MOLM-14細胞
WiDr Adherent人結(jié)直腸癌細胞系
TF-1a細胞系相關產(chǎn)品:Karpas299細胞、KYSE-140細胞、S37細胞
H-2286細胞系相關產(chǎn)品:WERI Rb-1細胞、LSC-1細胞、Hs-578-T細胞
PL9細胞系相關產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-78細胞、CAKI1細胞、MDA-MB-231-GFP細胞
HNE1細胞系相關產(chǎn)品:RINm5F細胞、TE-14細胞、AX-Mel細胞
C3H10T1/2CL8細胞系相關產(chǎn)品:SKNFI細胞、TE-15細胞、H-2073細胞
OVCA-432細胞系相關產(chǎn)品:MRC-5細胞、NCI-H209細胞、SCC90細胞
TALL-104細胞系相關產(chǎn)品:Mino細胞、LTEP-sm 1細胞、HEK-293-EBNA細胞
NuTu-19細胞系相關產(chǎn)品:SUP-B15細胞、WI 38細胞、Tb 1-Lu細胞
SK-MEL2細胞系相關產(chǎn)品:COLO824細胞、NCIH2286細胞、NBL-2細胞
H4細胞系相關產(chǎn)品:M1細胞、U-251_MG細胞、293 EBNA細胞
SK-ML2細胞系相關產(chǎn)品:COR L279細胞、CCRF-CEM C7細胞、NCI-H69C細胞
NCIH1581細胞系相關產(chǎn)品:H-125細胞、NCI-H2291細胞、MPASMC細胞
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