"BEND Adherent牛子宮內(nèi)膜上皮細胞系
細胞背景資料：子宮內(nèi)膜；上皮細胞；雌性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
BEND Adherent牛子宮內(nèi)膜上皮細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
Hs840_T細胞系相關產(chǎn)品：LIXC002細胞、578T細胞、EoL-1 cell細胞
ML-2細胞系相關產(chǎn)品：CAMA細胞、H2452細胞、NCIH508細胞
Jiyoye(P-2003)細胞系相關產(chǎn)品：Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、ECC1細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCIH441細胞系相關產(chǎn)品：ASH-3細胞、HA細胞、A-204細胞
HCa/16A3-F細胞系相關產(chǎn)品：SHEP1細胞、CCK-81細胞、RA.1細胞
LM2-4175細胞系相關產(chǎn)品：Spodoptera frugiperda clone 9細胞、MHCC97細胞、T-98G細胞
細胞生長特性：貼壁
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細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
BT-474細胞系相關產(chǎn)品：T-47-D細胞、Ly10細胞、BC-028細胞
MEL-526細胞系相關產(chǎn)品：Tj-905細胞、HEK 293-H細胞、WILL2細胞
H-460細胞系相關產(chǎn)品：GLC-82細胞、RT-4細胞、B16F0細胞
KTCTL140細胞系相關產(chǎn)品：H-2009細胞、Evsa-T細胞、COLO 678細胞
GTL-16細胞系相關產(chǎn)品：H35 Reuber細胞、SNG-M細胞、Colo205細胞
SLMT-1細胞系相關產(chǎn)品：L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、SNU1細胞、BV173細胞
SK-N-BE(2)C細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB157細胞、NCI-H64細胞、J-111細胞
159 PT細胞系相關產(chǎn)品：T2細胞、H526細胞、HCC1937細胞
HT-144細胞系相關產(chǎn)品：RMC-1細胞、SU-DH-L5細胞、Line 522細胞
HCe-8693細胞系相關產(chǎn)品：MOLM-16細胞、UACC893細胞、OCIAML5細胞
MC-3T3-E1細胞系相關產(chǎn)品：NUGC-4細胞、Mo 59J細胞、NCI-SNU-182細胞
CHAGOK1細胞系相關產(chǎn)品：Caov-3細胞、NCIH1417細胞、H322T細胞
RTE細胞系相關產(chǎn)品：ECC-1細胞、UACC 893細胞、H-250細胞
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Bx-PC3細胞系相關產(chǎn)品：Hs832T細胞、HOMEC細胞、L78細胞
NCI H226細胞系相關產(chǎn)品：Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞、HCC78細胞、BAR-T細胞
PG-4 S+L-細胞系相關產(chǎn)品：PLMVEC細胞、SW-780細胞、HSC-3細胞
PG-4 S+L-細胞系相關產(chǎn)品：PLMVEC細胞、SW-780細胞、HSC-3細胞
FL83B細胞系相關產(chǎn)品：H847細胞、SW 837細胞、WM266-4細胞
451-LU細胞系相關產(chǎn)品：U-138 MG細胞、LY-R細胞、HOP92細胞
KU.812細胞系相關產(chǎn)品：J-774A.1細胞、Hi-five細胞、HEK-293-H細胞
U2932細胞系相關產(chǎn)品：RL95細胞、Rat-1細胞、HUT-226細胞
MDA-MB-435細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H28細胞、3T3 L1細胞、HEK 293FT細胞
UK Pan-1細胞系相關產(chǎn)品：HPMEC細胞、DAN-G細胞、RBE4細胞
WBF344細胞系相關產(chǎn)品：HCC1428細胞、TF-1細胞、WRL 68細胞
SUM-52細胞系相關產(chǎn)品：AG 9細胞、B16/F0細胞、HCC 2185細胞
143BTK-細胞系相關產(chǎn)品：H9細胞、NCIH1770細胞、HCEC細胞
WM-266-4細胞系相關產(chǎn)品：CCD-966SK細胞、T-HSC細胞、MCF-7/ADR-RES細胞
HOP 62細胞系相關產(chǎn)品：SNU886細胞、NCI-SNU-16細胞、H-1105細胞
ARH-77細胞系相關產(chǎn)品：RFL-6細胞、NCI-N87細胞、HEK/EBNA細胞
Hs-274-T細胞系相關產(chǎn)品：GI-1細胞、HeLa S-3細胞、Pfeiffer細胞
GM07404D細胞系相關產(chǎn)品：H1838細胞、NS20Y細胞、KP2細胞
SKRC-42細胞系相關產(chǎn)品：H-1618細胞、Ra No. 1細胞、NK-92MI細胞
KE-37細胞系相關產(chǎn)品：KE39細胞、6-T CEM細胞、HM1900細胞
Chang liver細胞系相關產(chǎn)品：COS-7細胞、IB-RS2細胞、L-6TG細胞
NCI-SNU-387細胞系相關產(chǎn)品：Scott and White No. 13細胞、SK-BR-3細胞、Y1細胞
QGP1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H220細胞、MT-2J細胞、LS-180細胞
JeKo 1細胞系相關產(chǎn)品：HPAF-2細胞、TE-8細胞、hOMF細胞
NCI-H1755細胞系相關產(chǎn)品：BEAS2B細胞、Leukemia 1210細胞、LCLC103H細胞
bEnd3細胞系相關產(chǎn)品：OCI-LY-7細胞、T 98 G細胞、HEL9217細胞
HTR8/SVneo細胞系相關產(chǎn)品：COS7細胞、P19細胞、Hela-Ap-1細胞
L-6 myoblast細胞系相關產(chǎn)品：P30-OHKUBO細胞、SKCO-1細胞、TALL-104細胞
Hs832T細胞系相關產(chǎn)品：PA I細胞、SCL I細胞、mIMCD-3細胞
T98 G細胞系相關產(chǎn)品：Colon38細胞、MMQ細胞、32D.cl3細胞
RA-FLSs細胞系相關產(chǎn)品：HCC0044細胞、ZR75-30細胞、L6細胞
BALL1細胞系相關產(chǎn)品：Wien 133細胞、HEH2細胞、UCLA-SO-M21細胞
H-4-II-E細胞系相關產(chǎn)品：8505C細胞、SNUC2A細胞、U-373-MG細胞
CHL-CL-11細胞系相關產(chǎn)品：AE1201細胞、H-2228細胞、H125細胞
MCF.10A細胞系相關產(chǎn)品：HEP-3B2細胞、P1-Raji細胞、F442A細胞
HCC0078細胞系相關產(chǎn)品：HT144細胞、OVCAR-4細胞、HRCEC細胞
BE2M17細胞系相關產(chǎn)品：LLC-PK-1細胞、KU 19-19細胞、Ketr-3細胞
NCTC clone 929細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB157細胞、SU-DHL-1細胞、CCD19Lu細胞
MA-104細胞系相關產(chǎn)品：Rin-M-5F細胞、RT4-D6P2T細胞、UMR106細胞
HCC2185細胞系相關產(chǎn)品：BEL-7402細胞、CCD-33Co細胞、B16/F0細胞
Psi2 DAP細胞系相關產(chǎn)品：NCIH128細胞、A9(Hamprecht)細胞、ML2細胞
CAL148細胞系相關產(chǎn)品：Hs895T細胞、QG-56細胞、SKOV-433細胞
BEND Adherent牛子宮內(nèi)膜上皮細胞系
Madin Darby Bovine Kidney細胞系相關產(chǎn)品：LU65細胞、JB6 [Mouse]細胞、H1623細胞
MC26細胞系相關產(chǎn)品：Hs-274-T細胞、TW 01細胞、HC-11細胞
SNU387細胞系相關產(chǎn)品：3T3L1細胞、SNU739細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞
OCI-Ly 8細胞系相關產(chǎn)品：K562/ADP細胞、MOLT3細胞、MDA-MB-436細胞
NCIH1993細胞系相關產(chǎn)品：3AA細胞、KPL4細胞、HUV-EC-C細胞
A375-S2細胞系相關產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、SU-DHL-16細胞、C8166細胞
X63Ag8-653細胞系相關產(chǎn)品：HCMEC(BL12-H)細胞、HCCLM3細胞、GNM細胞
HEK AD293細胞系相關產(chǎn)品：P3-X63.Ag8.653細胞、C918細胞、SF-767細胞
NS-I/1細胞系相關產(chǎn)品：3T3J2細胞、WRL-68細胞、SNUC2B細胞
GM03569D細胞系相關產(chǎn)品：MSTO-211H細胞、NCIH2170細胞、GalK1細胞
PANC 1005細胞系相關產(chǎn)品：BEP2D細胞、TCCPAN2細胞、CCC-HEL-1細胞
H-446細胞系相關產(chǎn)品：U251-MG細胞、Hs940T細胞、A101D細胞
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