"HCC2279 Adherent人肺腺鱗癌細胞系
細胞背景資料：肺腺鱗癌細胞；女性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內(nèi)取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HCC2279 Adherent人肺腺鱗癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒炐枰?，必須有所不同時，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
MN9D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251n細胞、Vero from pool #76細胞、HAPI細胞
HCC44細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH358細胞、SF295細胞、ME1細胞
SW948細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL1-5細胞、Ramos 2G6.4C10細胞、Hs895T細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
H2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reuber H-35細胞、LP-1細胞、NCI-Hut 125細胞
As-PC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435-S細胞、U373細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞
OCILY-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 888Lu細胞、Walker/LLC-WRC256細胞、P3X63 Ag8.653細胞
細胞生長特性：貼壁
HCC2279 Adherent人肺腺鱗癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
COR-L26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ 138細胞、Psi2 DAP細胞、JB-6細胞
Hep 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RA細胞、HEK 293FT細胞、HOSEpiC細胞
SUDHL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LP-1細胞、SK-N-BE-2細胞、8226細胞
EC-GI-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-180細胞、NOR10細胞、P31FUJ細胞
MHCC97-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、RIN m5F細胞、MC3T3-E1(C4)細胞
H524細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN-60細胞、H1781細胞、GM3569細胞
SNU878細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L cell細胞、CMECs細胞、A-875細胞
SUM 190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS174T細胞、HeLaS3細胞、NE-1細胞
KYSE180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSC-96細胞、SU4細胞、JROECL21細胞
PCI-4M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT RPE1細胞、52PE細胞、WM451Lu細胞
SMA 560細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-II細胞、H2444細胞、I90細胞
GBC-SD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alexander細胞、Hx-147細胞、PL5細胞
SNU-387細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1395細胞、NCIH1105細胞、UMNSAH/DF#1細胞
HCC2279 Adherent人肺腺鱗癌細胞系
NCI-H1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1048細胞、OKAC1細胞、NCI-H441細胞
NOR-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS-17/2.8細胞、H146細胞、SKNFI細胞
PaTu 8988s細胞系相關(guān)產(chǎn)品：22Rv1細胞、HK2細胞、NCTC 929細胞
PaTu 8988s細胞系相關(guān)產(chǎn)品：22Rv1細胞、HK2細胞、NCTC 929細胞
HNE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RINm5F細胞、TE-14細胞、AX-Mel細胞
CAL-85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW837細胞、WIL2 Secreting細胞、NCI-H1688細胞
NCIH838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAVER1細胞、KMM-1細胞、NE-4C細胞
MC/9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A7r5細胞、H-1355細胞、CMEC/D3細胞
He La細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C81-61細胞、EST50細胞、M210B4細胞
SACCLM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293細胞、HCT/Taxo1細胞、Det. 562細胞
MUM2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EL4細胞、H-187細胞、KP-N-RT-BM-1細胞
LU451細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J82 COT細胞、NCI-H1238細胞、MRC 5細胞
Cor L51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NU-GC-3細胞、8305C細胞、MeSoTheliOma-211H細胞
2BS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alphaTC1 Clone 6細胞、NCI-H2030細胞、H69細胞
MCFs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK (AD293)細胞、PG-4 S+L-細胞、Ramos.G6.C10細胞
TKB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryo Lung-1細胞、AMC-HN-8細胞、KYSE270細胞
Tb1.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CPA47細胞、H-1869細胞、L363細胞
U266S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1細胞、NCI-H2198細胞、SNU-449細胞
RA 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC 1469細胞、A549 ATCC細胞、A-704細胞
TE-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOS-3細胞、Hs 675.T細胞、SNT-8細胞
Panc 4.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-3細胞、RTE細胞、NCI-H2452細胞
CHL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-128細胞、HEK/EBNA細胞、MGH-U1細胞
4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR433細胞、MDCK II細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞
U-2OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT 112細胞、OLN93細胞、NS653細胞
L-5178-Y-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPE-int細胞、SW260細胞、OUMS23細胞
Kasumi-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1623細胞、HL-60 Clone 15細胞、NCI-H1155細胞
LC-2/ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-85 clone 5細胞、SDBMSC細胞、AG 9細胞
Human Hepatocyte Line 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO206F細胞、NB.4細胞、Huh7.5細胞
SKRC-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VA-ES-BJ細胞、Ly19細胞、Sci-1細胞
VMRC-RCZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-839細胞、H-358細胞、Panc02.03細胞
HPASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW780細胞、Hs-600-T細胞、PAMC82細胞
CCD-18Co細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TW 01細胞、NCI-157細胞、A2780 CP70細胞
Co 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO829細胞、JHH7細胞、NCIH1688細胞
SMMC 7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBNA293細胞、NCIH1792細胞、H2347細胞
U-373MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Astrocyte type I clone細胞、FU-97細胞、DoTc2 4510細胞
Sp2/0-Ag14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL5細胞、OCI-Ly 8細胞、CEMO-1細胞
MFHL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal fibroblast-10細胞、KLN205細胞、H-2198細胞
Hs 274.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU.812細胞、HECV細胞、NCIH23細胞
H-510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2 ad細胞、FHL124細胞、SK-BR3細胞
AE 1201細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly10細胞、L-5178-Y細胞、SNU-1040細胞
Hx-147細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLB 985細胞、MES-23.5細胞、PG-4細胞
SK-N-BE(1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AZ-521細胞、NOR-10細胞、RAMOS2G64C10細胞
HCC2279 Adherent人肺腺鱗癌細胞系
HSAS3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PE/CA-PJ-34細胞、Buffalo Rat Liver-3A細胞、HUTU80細胞
HTR-8/SV-neo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T24細胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞、H1666_DA細胞
PT67細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22Rv1細胞、OCILY3細胞、CCD841CoN細胞
HEL 92.1.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA104細胞、MSTO-211 H細胞、T-24細胞
DU-145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRGEC細胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細胞、Hx-147細胞
624mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO206細胞、K-562細胞、HUT-28細胞
MAC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MuM-2B細胞、HCC-1428細胞、SACC-LM細胞
Normal Rat, August 3, 1983細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-60 clone15細胞、Rat 1細胞、HOK細胞
OVCA8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03320細胞、RCC-10細胞、hA549細胞
RTMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL 45細胞、L-cell細胞、CEMO-1細胞
IBRS2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DoTc2-4510細胞、SP2細胞、J82 COT細胞
SUDHL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LP-1細胞、NCIH82細胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞
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