"NP69SV40T Adherent人鼻咽上皮細胞系
細胞背景資料：鼻咽；上皮細胞；SV４０轉(zhuǎn)化
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NP69SV40T Adherent人鼻咽上皮細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享：支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長，營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達，又不能通過可視法對其進行檢測，而且它對細胞的生長率影響較小，不易引起注意。國內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細胞的支原體種類是很多的，國外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細胞，有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個方面來預防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作；細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后，特別是重要的細胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁，一般來講，對作用于細胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。
SW 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD18Co細胞、UMUC-14細胞、CAOV4細胞
HEL299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV3細胞、SK.OV.3細胞、TGBC11T細胞
COLO 205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-II-E細胞、SUM 102PT細胞、COLO_320DM細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HDMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs895.T細胞、GLC-82細胞、Karpas 422細胞
BIC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1563細胞、Adeno 293細胞、Panc-3_27細胞
P-2003細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC 15細胞、TYK-nu細胞、HSAS4細胞
細胞生長特性：貼壁
NP69SV40T Adherent人鼻咽上皮細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
PC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb2細胞、HOP92細胞、HLEB3細胞
MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS411細胞、QGP1細胞、TE 85 ClF-5細胞
SK-GT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-407細胞、KP-N-RT-BM-1細胞、H-774細胞
TFK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT1A細胞、MES-SA-Dx5細胞、MDA PCa 2b細胞
32D clone3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A9細胞、4T1-A細胞、PANC-02-03細胞
CCC-HEH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-GT-4細胞、Tn5 B1-4細胞、MESSADX5細胞
beta TC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI1788細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞、STTG1細胞
BEL 7402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR-8/SVneo細胞、SW403細胞、NT-2細胞
NCI-H1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30/0HK細胞、Normal fibroblast-10細胞、SKRC-42細胞
TK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM3細胞、PC-3M細胞、GLC-15細胞
HCC1428細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-388細胞、CTLL-2細胞、NR8383.1細胞
SKMEL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C57 Mouse Tumor 93細胞、PC-3M-1E8細胞、293-EBNA1細胞
NHEK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA 435細胞、526 mel細胞、OCI-Ly 18細胞
NP69SV40T Adherent人鼻咽上皮細胞系
IAR20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1222細胞、WIL2-S細胞、NCIH1573細胞
NCIH446細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Medical University of Graz-Chordoma 1細胞、Ketr3細胞、HRA 19細胞
U2OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hela-Ap-1細胞、BIU-87細胞、KLN-205細胞
U2OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hela-Ap-1細胞、BIU-87細胞、KLN-205細胞
KYSE-270細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA 38細胞、NCI-H2108細胞、GM02132C細胞
U266細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-4-11細胞、H1993細胞、AZ-521細胞
RPMI no. 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHT-101細胞、G292細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞
VE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-2spd(ts)細胞、LM3細胞、EA.Hy926細胞
Panc813細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero-E6細胞、HPB-ALL細胞、SuDHL 2細胞
Hs 636 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNG-M細胞、Hs.27細胞、A-101D細胞
HCC1187細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARIP細胞、BNL.CL2細胞、MM6細胞
CV-1 in Origin Simian-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7/ADR細胞、U937細胞、Vero C1008細胞
Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan-1細胞、HIT.T15細胞、MB 157細胞
HMC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1Sq細胞、CG-4細胞、HConEpic細胞
TE-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE細胞、U2-OS細胞、SuDHL 1細胞
NB9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM451細胞、A-9細胞、MPC11細胞
SW 756細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G422細胞、RBL-1細胞、CCD 966SK細胞
UMNSAH-DF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U343MG細胞、WM115mel細胞、VAESBJ細胞
U-251-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-962細胞、RPTEC TERT1細胞、Hs840T細胞
Rat Glomerular Endothelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH747細胞、JeKo-1細胞、NCI747細胞
CCC-ESF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1781細胞、Namalwa細胞、MB231細胞
174xCEM.T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H446細胞、GA10細胞、H-460細胞
KM12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Farage Original Line細胞、NCI-H165細胞、SW-839細胞
AG06814-J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAC1.2F5細胞、Pt K2細胞、LWnt-3A細胞
KRCY細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK-II細胞、Ly18細胞、MDA231-LM2細胞
HTori3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM637A細胞、MDA330細胞、P30/Ohkubo細胞
MDA-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKOAS451細胞、BNL-CL.2細胞、HUT28細胞
CCD-841CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fao細胞、NuTu 19細胞、UPCI-SCC-090細胞
H1876細胞系相關(guān)產(chǎn)品：22Rv-1細胞、Mo7e細胞、GC9811-P細胞
HHL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H322細胞、HTori3細胞、DOK細胞
OVCAR-420細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-HN-6細胞、MDA435細胞、SNU-216細胞
Astrocyte type I clone細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-1細胞、H2.35細胞、SHI1細胞
A-375細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H647ell細胞、A.704細胞、Hs683T細胞
BNL 1MEA.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO K1細胞、SF17細胞、NCTC 1469細胞
NCI-H2087細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW962細胞、2B4細胞、KYSE30細胞
CAL 62細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTC200細胞、TB1 Lu細胞、SP2-0-Ag14細胞
GC9811-P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anip973細胞、HNE-3細胞、BE2_C細胞
HSC（Human Schwann）細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HHM-2細胞、SupB15W細胞、GM17219細胞
Loucy細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep G2/C3A細胞、Mc Ardle 7777細胞、Hs294T細胞
Rat Chondrosarcoma Swarm細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL1細胞、HEK-293A細胞、MES 23.5細胞
Anglne細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COC1/CDDP細胞、HO-8910 PM細胞、GM03573細胞
SKRC20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32 mel細胞、SV40-HCEC細胞、CCD-112CoN細胞
NP69SV40T Adherent人鼻咽上皮細胞系
UPCISCC154細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FTC133細胞、SK-N-BE(1)n細胞、138 MG細胞
Hs 578.Bst細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2107細胞、MPC-5細胞、HL-60細胞
IM-95細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-204細胞、AMJ2-C8細胞、JB6 Cl 30-7b細胞
MDA-134細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV1細胞、OACP4C細胞、LLC細胞
SkMel31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22R-V1細胞、LS-174細胞、32D:cl3細胞
B16 melanoma F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH69細胞、OKT3細胞、EFO-27細胞
C17.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U 138 MG細胞、Eca109細胞、U266S細胞
SK-MEL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU638細胞、Mouse Bladder Tumor line-2細胞、CCD 841 CoN細胞
SV40-MES13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRC Y細胞、G519細胞、149 PT細胞
GM03320細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.OV.3細胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、293細胞
Kupffer細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-729-T細胞、KNS62細胞、NCI H157細胞
SK-GT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-407細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、Adeno-293細胞
"