"BPH-1 Adherent人前列腺增生細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：良性前列腺增生；男性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng)：細(xì)胞凍存好了，接下來(lái)要注意什么問(wèn)題呢？沒(méi)錯(cuò)，就是記得到時(shí)間了，拿出來(lái)復(fù)蘇。那么，細(xì)胞復(fù)蘇的過(guò)程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢？細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬(wàn)不要使用不健康的細(xì)胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長(zhǎng)行為。凍存細(xì)胞：補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開(kāi)始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長(zhǎng)至７０%單層時(shí)收獲細(xì)胞，計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)２４小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每?jī)龃婀懿怀^(guò)１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒(méi)有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個(gè)最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞，以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問(wèn)題！細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點(diǎn)：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí)，有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要；其實(shí)，細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)，不過(guò)這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié)，不然，也不一定會(huì)盡如人意。例如說(shuō)，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護(hù)目鏡；盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
BPH-1 Adherent人前列腺增生細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代的一般方法：開(kāi)始細(xì)胞傳代前，仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細(xì)胞(單層細(xì)胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬(wàn)單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細(xì)胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細(xì)胞，挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好，細(xì)胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無(wú)污染、無(wú)異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細(xì)胞；先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細(xì)胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定)；填寫(xiě)傳代記錄。
OVCAR.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero C1008細(xì)胞、SKNEP1細(xì)胞、Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞
CWR-22rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-929細(xì)胞、Hs 606細(xì)胞、DF-1細(xì)胞
Panc-8_13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUV-EC-C細(xì)胞、KMST6細(xì)胞、NCIH838細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
hEM15A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2591細(xì)胞、U-251_MG細(xì)胞、M-14細(xì)胞
H-1623細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP-92細(xì)胞、Caki-2細(xì)胞、MFM-223細(xì)胞
JIII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-468細(xì)胞、LS1034細(xì)胞、3D4/21細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
BPH-1 Adherent人前列腺增生細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中一些問(wèn)題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過(guò)２０%，因?yàn)楹窟^(guò)低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不足，過(guò)高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時(shí)須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間，按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換；３)購(gòu)買的復(fù)蘇細(xì)胞，為何會(huì)有脫落？因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中不可避免的會(huì)有震蕩，收到后可以離心收集；４)購(gòu)買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購(gòu)買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見(jiàn)原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí)，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
CF Pac1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：bEND.3細(xì)胞、32D-Cl3細(xì)胞、HCC-1588細(xì)胞
JROECL19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1/Sq細(xì)胞、U118細(xì)胞、BT483細(xì)胞
Line 870 Emory University-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD841CoTr細(xì)胞、U343細(xì)胞、Wien-133細(xì)胞
CHL-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U373 MG細(xì)胞、Chang Cells細(xì)胞、HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞
NCI-H865細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-6細(xì)胞、AZ-521細(xì)胞、SU-DHL-2細(xì)胞
D341MD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHI-1細(xì)胞、Verda reno細(xì)胞、COLO-320-HSR細(xì)胞
OVCAR 420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 02.03細(xì)胞、GM01232細(xì)胞、Hs675T細(xì)胞
TGBC11T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co 205細(xì)胞、CLONE M3細(xì)胞、CMT167細(xì)胞
OSA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHIN3細(xì)胞、SUDHL-4細(xì)胞、OCI-Ly07細(xì)胞
Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2107細(xì)胞、NCI-H1581細(xì)胞、NFS-60細(xì)胞
HEK293EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OACP4 C細(xì)胞、NCIH2110細(xì)胞、3AA細(xì)胞
HEC1-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HConEpic細(xì)胞、HT 1376.T細(xì)胞、GDM-1細(xì)胞
Hs-281-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW01細(xì)胞、OVCA432_Bast細(xì)胞、HT 1080細(xì)胞
BPH-1 Adherent人前列腺增生細(xì)胞系
253JBV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT549細(xì)胞、Hs 578.T細(xì)胞、BJ [Human fibroblast]細(xì)胞
NCI-H1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sol8細(xì)胞、Colo-678細(xì)胞、H-2135細(xì)胞
184A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B2_1-7細(xì)胞、BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞、RK13細(xì)胞
NCI-SNU-878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VERO C 1008細(xì)胞、CCRF-CEM C7細(xì)胞、COR L279細(xì)胞
TE-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4:11細(xì)胞、CHOS細(xì)胞、NCI-H820細(xì)胞
P388-D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-I細(xì)胞、SU8686細(xì)胞、CoCL3細(xì)胞
Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TMK-1細(xì)胞、Ramos.2G6.4C10細(xì)胞、COLO 206F細(xì)胞
MPC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U2OS細(xì)胞、SJSA細(xì)胞、HIT.T15細(xì)胞
J45.01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-87細(xì)胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞、KYSE0030細(xì)胞
KYSE50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMVEC細(xì)胞、OCI-Ly10細(xì)胞、EJ-1細(xì)胞
NS1-Ag 4/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Meat Animal Research Center-145細(xì)胞、AMO-1細(xì)胞、ESC細(xì)胞
JS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-O RCC細(xì)胞、GM07404A細(xì)胞、CHP-126細(xì)胞
LM TK negative細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1088細(xì)胞、P3J細(xì)胞、HR1K細(xì)胞
NCI-SNU-886細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJSA-1細(xì)胞、MGC-803細(xì)胞、R 2 C細(xì)胞
HCC-1428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL-CL.2細(xì)胞、HFL1細(xì)胞、130-T細(xì)胞
SUDHL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LP-1細(xì)胞、SK-N-BE-2細(xì)胞、8226細(xì)胞
SHIN-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ball 1細(xì)胞、N2a細(xì)胞、HTR8細(xì)胞
AtT-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1436細(xì)胞、HConEpic細(xì)胞、A-253細(xì)胞
3T3F442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Microbiological Associates-104細(xì)胞、JB-6 Cl 30細(xì)胞、NWA細(xì)胞
GI-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-10細(xì)胞、SW-1088細(xì)胞、National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞
COV-434細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-1376細(xì)胞、PNT-1A細(xì)胞、B16BL6細(xì)胞
SK Col 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOSC-2細(xì)胞、NCIH2228細(xì)胞、NCI H929細(xì)胞
NCIH2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：74Int細(xì)胞、HPAFII細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞
F442-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT-16細(xì)胞、DH 82細(xì)胞、UCLA-SO-M14細(xì)胞
FU-MMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG-1a細(xì)胞、H-522細(xì)胞、SK-Mel 2細(xì)胞
HIEC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04679細(xì)胞、SW1573細(xì)胞、RPMI2650細(xì)胞
NCIH1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2-C12細(xì)胞、MH-S細(xì)胞、BJAB-1細(xì)胞
VCaP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs274T細(xì)胞、LNCaP-C4-2細(xì)胞、SKOV-3細(xì)胞
HemECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Beta-TC-6細(xì)胞、H-1184細(xì)胞、COS-7細(xì)胞
MC-3T3-E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC-4細(xì)胞、Mo 59J細(xì)胞、NCI-SNU-182細(xì)胞
AHH-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Be Wo細(xì)胞、3T6-Swiss albino細(xì)胞、WEHI231細(xì)胞
NHDF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 33細(xì)胞、UCLA-SO-M21細(xì)胞、D341 Med細(xì)胞
PATU-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHZ-88細(xì)胞、NCI-460細(xì)胞、SW620細(xì)胞
NCI-H2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-5細(xì)胞、NCI-H2009細(xì)胞、KPL4細(xì)胞
SUNE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM06141B細(xì)胞、NCIH1930細(xì)胞、NCIH446細(xì)胞
AGS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Glioma 261細(xì)胞、B 95.8細(xì)胞、H-596細(xì)胞
Hx-147細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLB 985細(xì)胞、MES-23.5細(xì)胞、PG-4細(xì)胞
G401細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu-8988s細(xì)胞、GM03571細(xì)胞、H322細(xì)胞
P-2003細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC 15細(xì)胞、TYK-nu細(xì)胞、HSAS4細(xì)胞
U 937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAHY-926細(xì)胞、N1S1細(xì)胞、HBdSMC細(xì)胞
MDA157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mink Lung細(xì)胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、UCLA NPA-87-1細(xì)胞
MPP 89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY180細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、INS1細(xì)胞
BPH-1 Adherent人前列腺增生細(xì)胞系
MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHP-77細(xì)胞、JF305細(xì)胞、SKMEL28細(xì)胞
P3-X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-11細(xì)胞、RMS1598細(xì)胞、MUTZ-1細(xì)胞
Hs578Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC10 RGB細(xì)胞、A427細(xì)胞、EFM192C細(xì)胞
RPMI 8226/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AC16 [Human hybrid]細(xì)胞、NCIH1650細(xì)胞、PANC-1細(xì)胞
SW-954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HB 611細(xì)胞、KG1細(xì)胞、PC 12細(xì)胞
3T3F442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Microbiological Associates-104細(xì)胞、JB-6 Cl 30細(xì)胞、NWA細(xì)胞
H-1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98G細(xì)胞、P116細(xì)胞、MFE 296細(xì)胞
HEK/EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K 562細(xì)胞、HT3細(xì)胞、NCI-H1693細(xì)胞
MRAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP C4-2B細(xì)胞、LS-123細(xì)胞、RAMSCs細(xì)胞
FRO81-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-m細(xì)胞、TR-146細(xì)胞、SW1088細(xì)胞
P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EU-3細(xì)胞、SNU354細(xì)胞、PL9細(xì)胞
Line 870 Emory University-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD841CoTr細(xì)胞、Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞、U373MG細(xì)胞
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