"LA-N-5 Adherent人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：神經(jīng)母細(xì)胞瘤；骨髓轉(zhuǎn)移；男性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng)：細(xì)胞凍存好了，接下來(lái)要注意什么問(wèn)題呢？沒(méi)錯(cuò)，就是記得到時(shí)間了，拿出來(lái)復(fù)蘇。那么，細(xì)胞復(fù)蘇的過(guò)程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢？細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬(wàn)不要使用不健康的細(xì)胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長(zhǎng)行為。凍存細(xì)胞：補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開(kāi)始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長(zhǎng)至７０%單層時(shí)收獲細(xì)胞，計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類(lèi)型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞，有不同類(lèi)型的凍存液，根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)２４小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類(lèi)型，日期，凍存人等信息，并保證每?jī)龃婀懿怀^(guò)１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒(méi)有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個(gè)最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞，以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問(wèn)題！細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點(diǎn)：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí)，有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要；其實(shí)，細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)，不過(guò)這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié)，不然，也不一定會(huì)盡如人意。例如說(shuō)，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護(hù)目鏡；盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
LA-N-5 Adherent人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代的一般方法：開(kāi)始細(xì)胞傳代前，仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細(xì)胞(單層細(xì)胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬(wàn)單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細(xì)胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細(xì)胞，挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好，細(xì)胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無(wú)污染、無(wú)異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細(xì)胞；先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細(xì)胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定)；填寫(xiě)傳代記錄。
H-1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTX TNA2細(xì)胞、OCI-AML-4細(xì)胞、SK-MEL24細(xì)胞
Tb1Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-774細(xì)胞、SUM-52細(xì)胞、BE(2)C細(xì)胞
A2780/CP70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-375SM細(xì)胞、SNU-16細(xì)胞、alpha TC1-6細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
LUDLU 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC9204細(xì)胞、CCD841CoTr細(xì)胞、NPC-TW-039細(xì)胞
SW1353細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP293細(xì)胞、L5178Y細(xì)胞、CAL-51細(xì)胞
K7M2-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW.620細(xì)胞、CMT93細(xì)胞、SCL-I細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
LA-N-5 Adherent人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中一些問(wèn)題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過(guò)２０%，因?yàn)楹窟^(guò)低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不足，過(guò)高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時(shí)須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間，按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換；３)購(gòu)買(mǎi)的復(fù)蘇細(xì)胞，為何會(huì)有脫落？因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中不可避免的會(huì)有震蕩，收到后可以離心收集；４)購(gòu)買(mǎi)的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購(gòu)買(mǎi)的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見(jiàn)原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí)，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
4T1.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG-44細(xì)胞、143 B細(xì)胞、Colon26細(xì)胞
GM03320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.OV.3細(xì)胞、675T細(xì)胞、L-02細(xì)胞
RT-112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32-mel細(xì)胞、HeLa/DDP細(xì)胞、RCC10細(xì)胞
K7M2 wt細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caov-4細(xì)胞、J-774A.1細(xì)胞、Jeko1細(xì)胞
SW 1990細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLE12細(xì)胞、NB19細(xì)胞、R2C細(xì)胞
SUDHL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly19細(xì)胞、N1E115細(xì)胞、GM05887細(xì)胞
C127細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M 1細(xì)胞、PTK 1細(xì)胞、TE6細(xì)胞
MIO-M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL12細(xì)胞、OCI/AML2細(xì)胞、ZR7530細(xì)胞
WI38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH748細(xì)胞、WC00059細(xì)胞、CCRF/CEM-C7細(xì)胞
AR4-2J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞、HNEpC細(xì)胞、HS0578T細(xì)胞
FHL 124細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：38C13細(xì)胞、L-M[TK-]細(xì)胞、FRO 81-2細(xì)胞
V79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCKII-WT細(xì)胞、SW-948細(xì)胞、Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞
HEL 92.1.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA104細(xì)胞、MSTO-211 H細(xì)胞、T-24細(xì)胞
LA-N-5 Adherent人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
NCI747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N87細(xì)胞、KYSE0520細(xì)胞、NCI-H735細(xì)胞
WSU-HN13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 8402細(xì)胞、H2073細(xì)胞、DAN-G細(xì)胞
SK HEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-H細(xì)胞、HTR8細(xì)胞、HTori 3細(xì)胞
SK HEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-H細(xì)胞、HTR8細(xì)胞、HTori 3細(xì)胞
MFD-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAPC-4細(xì)胞、JHH-7細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞
10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BGC-823細(xì)胞、MT2細(xì)胞、NTERA2細(xì)胞
H520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1 cell細(xì)胞、NCIH660細(xì)胞、MLA-144細(xì)胞
NCIH1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03570E細(xì)胞、COLO-738細(xì)胞、TOV112D細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP-FGC細(xì)胞、HOC-1細(xì)胞、CMT-64細(xì)胞
Mink細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS 17/28細(xì)胞、SUIT2細(xì)胞、Human Microglia Clone 3細(xì)胞
NCIH1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C1498細(xì)胞、NR-8383細(xì)胞、ES2細(xì)胞
A-375細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H647ell細(xì)胞、A.704細(xì)胞、Hs683T細(xì)胞
NB9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM451細(xì)胞、A-9細(xì)胞、MPC11細(xì)胞
SUIT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K1735細(xì)胞、GalK 1細(xì)胞、HLCL9B10細(xì)胞
NCI-H1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3396細(xì)胞、H-1417細(xì)胞、SNU-1細(xì)胞
OSC-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE2_C細(xì)胞、MDA 1386細(xì)胞、CL 1-0細(xì)胞
NCIH211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-10細(xì)胞、MDA-361細(xì)胞、NCI-H740細(xì)胞
B16-F10-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.4細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞、NP69細(xì)胞
mREC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(2c)細(xì)胞、16-HBE14o細(xì)胞、LLC-PK-1細(xì)胞
OCI-LY-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKO007細(xì)胞、NCI-H2591細(xì)胞、HOP-62細(xì)胞
BCECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC403細(xì)胞、MCF-7/ADR-RES細(xì)胞、MDA-MB 468細(xì)胞
H-1404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI.8226細(xì)胞、CCC-HSF-1細(xì)胞、HTR-8細(xì)胞
BXPC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARPE-19細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞、H-7721細(xì)胞
Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa S-3細(xì)胞、RPMI-8402細(xì)胞、G-Olig2細(xì)胞
GM03570E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-2細(xì)胞、WM-239A細(xì)胞、Lu-165細(xì)胞
Henrietta Lacks cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM 9細(xì)胞、OVHM細(xì)胞、MOLT16細(xì)胞
SK-OV-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-450細(xì)胞、WIL2S細(xì)胞、DMS 273細(xì)胞
SL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cates-1B細(xì)胞、NCI-H2347細(xì)胞、TFK1細(xì)胞
SupT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HB611細(xì)胞、HCC1171細(xì)胞、H4-IIE-C3細(xì)胞
EOL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2126細(xì)胞、NCI-SNU-475細(xì)胞、CMT.64細(xì)胞
ME180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT1-a細(xì)胞、L78細(xì)胞、Fetal Human Colon細(xì)胞
HLF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-T6細(xì)胞、NCI-H774細(xì)胞、SW-1222細(xì)胞
SKUT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-498細(xì)胞、Kit225細(xì)胞、Ra #1細(xì)胞
hTERT-HME-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-EBNA細(xì)胞、HGF-1細(xì)胞、KOPN-8細(xì)胞
MN60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-679細(xì)胞、VMRCRCZ細(xì)胞、WISH細(xì)胞
UMNSAH/DF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCM-460細(xì)胞、NCIH1666細(xì)胞、H-1993細(xì)胞
NCTC-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1417細(xì)胞、HGSMC細(xì)胞、HO8910PM細(xì)胞
H-548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HHL-5細(xì)胞、BMSC/hBMSCs細(xì)胞、HR8348細(xì)胞
N87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDSMC細(xì)胞、Th17細(xì)胞、L-M(TK-)細(xì)胞
Tca8113細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 695T細(xì)胞、SUDHL-5細(xì)胞、Tu-212細(xì)胞
YD-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ketr3細(xì)胞、NSC34細(xì)胞、Panc-10.05細(xì)胞
Swiss3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T6-Swiss albino細(xì)胞、NCI-BL6細(xì)胞、NCIH661細(xì)胞
LA-N-5 Adherent人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系
MDAMB415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293F細(xì)胞、SCL-I細(xì)胞、MDA436細(xì)胞
HIBEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293A細(xì)胞、Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞、H2107細(xì)胞
RWPE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞、DMS 153細(xì)胞、SCLC21H細(xì)胞
NCIH2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-3細(xì)胞、NMCG1細(xì)胞、HPMEC細(xì)胞
NCI H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-606-T細(xì)胞、HPAF/CD18細(xì)胞、KGN細(xì)胞
NCI-H2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTA-7細(xì)胞、Ca9-22細(xì)胞、BIC-1細(xì)胞
CMT-64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP2d細(xì)胞、tdott細(xì)胞、UMNSAH-DF1細(xì)胞
Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-PCa-2b細(xì)胞、HT-22細(xì)胞、293FT細(xì)胞
Hos TE-85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS1細(xì)胞、H650細(xì)胞、ACC3細(xì)胞
NE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：159 PT細(xì)胞、HK-2 [Human kidney]細(xì)胞、COV 434細(xì)胞
C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT4細(xì)胞、SCCVII/St細(xì)胞、MHCC97細(xì)胞
RT-112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32-mel細(xì)胞、T47D:A細(xì)胞、A-875細(xì)胞
"