"MLO-Y4 Adherent小鼠骨樣細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：骨；SV４０轉(zhuǎn)化
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
MLO-Y4 Adherent小鼠骨樣細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的衰老:體外細(xì)胞培養(yǎng)實驗證明：成纖維細(xì)胞：來自胎兒傳代５０次后衰老死亡，來自成人傳代２０次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān)；來自小鼠傳代１４--２８次后衰老死亡，來自烏龜傳代９０--１２５次后衰老死亡。細(xì)胞衰老過程中會發(fā)生一系列的變化，包括：蛋白質(zhì)合成速度降低，已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化，特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時，細(xì)胞核，線粒體，膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細(xì)胞衰老原因，尚無定論，出現(xiàn)過好幾種理論與假說，其中得到較廣泛認(rèn)可的是“自由基損傷假說”。細(xì)胞凋亡:細(xì)胞的死亡是個體存活的正?，F(xiàn)象，常見的細(xì)胞死亡形式有３種：壞死、凋亡和細(xì)胞毒性。多細(xì)胞生物的生命活動中，因為環(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵，導(dǎo)致一部分細(xì)胞死去，稱為細(xì)胞的病理死亡，或細(xì)胞壞死。壞死是細(xì)胞暴露于嚴(yán)重的物理或化學(xué)刺激時導(dǎo)致的細(xì)胞死亡；細(xì)胞毒性是由細(xì)胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細(xì)胞殺傷事件，不依賴于其它兩種細(xì)胞死亡機(jī)理，如殺傷T細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用。還有一種情況，一部分細(xì)胞的死亡是生物個體正常生命活動(代謝、生長、發(fā)育、分化)的一個必要部分；似乎帶有“犧牲局部，保全整體”的意味。這種情況下的細(xì)胞死亡，明顯地受遺傳控制，稱為細(xì)胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細(xì)胞死亡，是機(jī)體清除無用的或者不想要的細(xì)胞的手段。它與細(xì)胞壞死是兩個截然不同的過程，無論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來說，都有明顯的區(qū)別。細(xì)胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞增殖、分化和衰老起著互補(bǔ)與平衡的作用，在多細(xì)胞動物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細(xì)胞的一種基本生命現(xiàn)象，凋亡失控的結(jié)果將是可怕的：凋亡不足時，易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病，如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細(xì)胞凋亡及其機(jī)理具有重要的理論和實踐意義。
IEC 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H865細(xì)胞、alpha-TC1-6細(xì)胞、CL-40細(xì)胞
NCIH1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG-1細(xì)胞、HuT 78細(xì)胞、NCIH1792細(xì)胞
GM12878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM-12細(xì)胞、COR-L26細(xì)胞、HDLM2細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
FAO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 174 T細(xì)胞、CORL23細(xì)胞、NCI-H2330細(xì)胞
H-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1648細(xì)胞、NALM6細(xì)胞、H4IIE細(xì)胞
COLO-680N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293FT細(xì)胞、KP 4細(xì)胞、HGSMC細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁
MLO-Y4 Adherent小鼠骨樣細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
IOSE 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-EBNA1細(xì)胞、F442A細(xì)胞、Hx147細(xì)胞
NHLF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：149PT細(xì)胞、A-1847細(xì)胞、Anglne細(xì)胞
P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1088細(xì)胞、Alexander細(xì)胞、CAL-148細(xì)胞
HO8910細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1B細(xì)胞、HBZY 1細(xì)胞、H-2330細(xì)胞
HEK.EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2196細(xì)胞、WM115F細(xì)胞、NCIH226細(xì)胞
Jurkat-FHCRC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK-1細(xì)胞、SKLMS1細(xì)胞、H-508細(xì)胞
NTERA-2 cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02219細(xì)胞、HMC3細(xì)胞、B16/F1細(xì)胞
MIN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1568細(xì)胞、10RGB細(xì)胞、LS 123細(xì)胞
NALM 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-1386細(xì)胞、BT-549細(xì)胞、EC-109細(xì)胞
GA10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-322細(xì)胞、HCT116/L細(xì)胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞
HUCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO細(xì)胞、SUD-4細(xì)胞、HT-29/CX-1細(xì)胞
HS852.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-299細(xì)胞、NCIH1915細(xì)胞、Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞
H-727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293A細(xì)胞、U251細(xì)胞、PK-13細(xì)胞
MLO-Y4 Adherent小鼠骨樣細(xì)胞系
NCIH1184細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AU-565細(xì)胞、H498細(xì)胞、H-847細(xì)胞
RCM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-82細(xì)胞、RMS 1598細(xì)胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞
GTL 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FO [Mouse myeloma]細(xì)胞、UPCISCC154細(xì)胞、MDAMB436細(xì)胞
GTL 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FO [Mouse myeloma]細(xì)胞、UPCISCC154細(xì)胞、MDAMB436細(xì)胞
Hs-729-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI8226細(xì)胞、OCILY-10細(xì)胞、MM96L細(xì)胞
CEM T4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL5細(xì)胞、Douglas Foster-1細(xì)胞、NPA 87細(xì)胞
OAC-P4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hut292細(xì)胞、Karpas 422細(xì)胞、AG06814-M細(xì)胞
Chang Cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z138細(xì)胞、G-361細(xì)胞、KYSE450細(xì)胞
Hs683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-F細(xì)胞、LK 2細(xì)胞、Line 697細(xì)胞
TW 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A20細(xì)胞、ECC-1細(xì)胞、SC細(xì)胞
HDQP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tissue Culture-1細(xì)胞、HuP-T4細(xì)胞、Ect1/E6E7細(xì)胞
HS 683T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H522細(xì)胞、U266細(xì)胞、3T3-Swiss細(xì)胞
253JB-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV2008細(xì)胞、HSC-6細(xì)胞、NCI-HUT-520細(xì)胞
P3JHR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMC7細(xì)胞、ECC-10細(xì)胞、JB6Cl30細(xì)胞
SCLC-21H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPCA-1細(xì)胞、NCIH2107細(xì)胞、231-luc細(xì)胞
A549/ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU-4475細(xì)胞、ReNcell CX細(xì)胞、CCD-841CoTr細(xì)胞
NB-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HREC細(xì)胞、PGLH7細(xì)胞、F98細(xì)胞
SK-MEL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU638細(xì)胞、Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞、CCD 841 CoN細(xì)胞
SNU739細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF-PAC1細(xì)胞、149 PT細(xì)胞、SNU-484細(xì)胞
GM04671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HONE-1細(xì)胞、Karpas-299細(xì)胞、H735細(xì)胞
BALL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepG2細(xì)胞、SACC-LM細(xì)胞、LCLC-103H細(xì)胞
U-251-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-962細(xì)胞、RPTEC TERT1細(xì)胞、Hs840T細(xì)胞
MSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CALU1細(xì)胞、GT38細(xì)胞、ARPE-19細(xì)胞
T-HEECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBI-HEK 293A細(xì)胞、MV4;11細(xì)胞、MDA134細(xì)胞
AM-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK52E細(xì)胞、EBNA-293細(xì)胞、HN-6細(xì)胞
YD-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H64細(xì)胞、293-FT細(xì)胞、MS 751細(xì)胞
Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs600T細(xì)胞、NCI-SNU-182細(xì)胞、NRK clone 52E細(xì)胞
RS411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT2-D1細(xì)胞、LAN-5細(xì)胞、HEK293-FT細(xì)胞
NCI-N87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK細(xì)胞、NCI-H2196細(xì)胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞
343 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUD6細(xì)胞、alpha-TC1.6細(xì)胞、H-747細(xì)胞
P-388D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1063細(xì)胞、L-Wnt3A細(xì)胞、Neuro 2a細(xì)胞
K299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL34細(xì)胞、H-2347細(xì)胞、NK-92細(xì)胞
ECGI10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CG4細(xì)胞、BDCM細(xì)胞、C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞
COLO 738細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T 98 G細(xì)胞、Hs 688(A).T細(xì)胞、P560細(xì)胞
SHSY-5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-1細(xì)胞、SKLMS-1細(xì)胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞
SUPB15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12C-PM6細(xì)胞、HRPEpiC細(xì)胞、A 2058細(xì)胞
Strain KB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：6-T CEM細(xì)胞、RPMI 8226細(xì)胞、H-1792細(xì)胞
Panc 05.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMST6細(xì)胞、CMEC/D3細(xì)胞、NUGC-4細(xì)胞
NB4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep G2細(xì)胞、H524細(xì)胞、COR-L105細(xì)胞
M2-10B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT 64細(xì)胞、IOSE-Van細(xì)胞、H522細(xì)胞
LM(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0015細(xì)胞、373 MG細(xì)胞、B/C3T3細(xì)胞
SK-CO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1734細(xì)胞、NCI-H1437細(xì)胞、CV 1細(xì)胞
MLO-Y4 Adherent小鼠骨樣細(xì)胞系
HFL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tregs細(xì)胞、HT1376細(xì)胞、H-295細(xì)胞
RPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 266-4細(xì)胞、H-2195細(xì)胞、CCD-112 CoN細(xì)胞
OE19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-10.05細(xì)胞、BT 20細(xì)胞、DH82細(xì)胞
C-4I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMF細(xì)胞、YH-13細(xì)胞、Pa18C細(xì)胞
V 79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Liver-02細(xì)胞、LS 123細(xì)胞、Microbiological Associates-104細(xì)胞
WIL2-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 824細(xì)胞、TH1細(xì)胞、HRPEpiC細(xì)胞
MDA-MB361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-53細(xì)胞、LA4細(xì)胞、Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞
EC9706細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EA hy 926細(xì)胞、COR-L 105細(xì)胞、McA-RH 8994細(xì)胞
MCF-7ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker-Ca.256細(xì)胞、KASUMI1細(xì)胞、EJ 138細(xì)胞
HT 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM4細(xì)胞、PL45細(xì)胞、TK.10細(xì)胞
C-32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EST81細(xì)胞、CEMO-1細(xì)胞、N-87細(xì)胞
P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1088細(xì)胞、OLN 93細(xì)胞、LLC-MK2細(xì)胞
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