"CCD-841CoN Adherent人正常結(jié)腸上皮細胞系
細胞背景資料：結(jié)腸上皮細胞；女性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內(nèi)取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
CCD-841CoN Adherent人正常結(jié)腸上皮細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
Pa16C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：F9細胞、Panc02-H0細胞、HO-8910 PM細胞
MDCK.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-10A細胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞、Hep G2-Luc細胞
SupB15W細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU387細胞、EOMA細胞、COLO-16細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
H-1672細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M細胞、Calu-3細胞、SK MEL 28細胞
Hs 636.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFO-27細胞、HCC1428細胞、PAa細胞
GM3569細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDA-MB361細胞、KNS-81細胞
細胞生長特性：貼壁
CCD-841CoN Adherent人正常結(jié)腸上皮細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
Pa18C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-766T細胞、BSC40細胞、NCI-441細胞
MES-SA/Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Glioma-261細胞、B16-F1細胞、HANK1細胞
H-747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPC-Y5細胞、H727細胞、VMRC-LCD細胞
SCC 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VeroC1008細胞、NCI-H522細胞、MV4-11細胞
EA.hy 926細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAMSCs細胞、SKMel-5細胞、HEI-193細胞
Hs604T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSCCa細胞、P3X63細胞、GA-10 clone 4細胞
Vero細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3255細胞、A-375SM細胞、32D.3細胞
HT144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-4.2細胞、COLO829細胞、HEK 293-H細胞
MDA-MB-435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H28細胞、3T3 L1細胞、HEK 293FT細胞
HFB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU484細胞、SUSM-1細胞、BA/F3細胞
MC57細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB19-RIKEN細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、NPA細胞
HEK AD293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63.Ag8.653細胞、C918細胞、SF-767細胞
HRCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu3細胞、McArdle RH-7777細胞、OCI-Ly 10細胞
CCD-841CoN Adherent人正常結(jié)腸上皮細胞系
WIL2 Secreting細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-441細胞、SNU-1細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞
HBVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-27細胞、Kelly細胞、OCI AML4細胞
U343細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK AD293細胞、FO [Mouse myeloma]細胞、SKNBE(2)細胞
U343細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK AD293細胞、FO [Mouse myeloma]細胞、SKNBE(2)細胞
SK-N-BE(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2023細胞、NEC8細胞、CALU 1細胞
KYSE520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-85細胞、Lewis lung carcinoma細胞、LC-2 ad細胞
HSF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1/2 clone8細胞、MGECs細胞、NCIH2106細胞
HuH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-8細胞、DHL10細胞、NCI-H2291細胞
Vero 76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(1)細胞、HM細胞、PG-4 S+L-細胞
IM95細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL279細胞、Nakata-1細胞、Panc_04_03細胞
HT clone H9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AsPC-1細胞、KU-19-19細胞、NCI-H2081細胞
TE-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-20細胞、C33A細胞、HEC1A細胞
130 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2106細胞、3396細胞、MDAMB231細胞
A 2058細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE2C細胞、G-292, clone A141B1細胞、LS 174 T細胞
LTEP a2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 AG 8.653細胞、870細胞、Malme-3 M細胞
HASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS TE 85細胞、LIPF178C細胞、OCI Ly1細胞
RT-BM 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B95.8細胞、SK MEL-28細胞、CemT4細胞
Colon-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN 382細胞、PM6細胞、COLO 357細胞
LC1sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞、RPMI-8226S細胞、RenCa細胞
OCI AML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-45細胞、SUNE1細胞、GM00346B細胞
UM-UC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FM88細胞、YT細胞、C3H/10T1/2細胞
Laboratory of Allergic Diseases 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-1細胞、Hep 3B2_1-7細胞、GM-215細胞
AN3 CA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV-2細胞、Ishikawa細胞、COLO 679細胞
KBM-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY-50細胞、GS-9L細胞、SK-N-MC細胞
Hs 343.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TN5B14細胞、HKC細胞、V79-1細胞
HCC38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2171細胞、Hs 766.T細胞、MGC803細胞
MZCRC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT-1A細胞、YD15細胞、HLF-a細胞
BSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV 504細胞、Tn5B1-4細胞、RBMVEC細胞
HGSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE12細胞、RC92A細胞、NCI H82細胞
CX-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA-Pa-Ca-2細胞、BV-2細胞、GM03320細胞
SiHa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 620細胞、HCT8細胞、A.704細胞
Capan-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-1細胞、SNU-520細胞、RPMI1846細胞
HOMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MES細胞、KYSE-510細胞、BEL 7404細胞
Mono Mac 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHP-10細胞、KE 37細胞、Leukemia 1210細胞
J774.A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS114細胞、UMR 106細胞、RGC-6細胞
RPMI 7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 53細胞、SR-786細胞、SN12C-PM6細胞
Balb/c3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-SF 21AE細胞、DLM8細胞、BL6細胞
NCI-BL1339細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro-2a細胞、Tb 1-Lu細胞、NCTC1469細胞
SK-N-BE(1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AZ-521細胞、NOR-10細胞、RAMOS2G64C10細胞
NCI-H920細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEC-B3細胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞、CORL279細胞
C8161細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1238細胞、H196細胞、FO [Mouse myeloma]細胞
K1735細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H 10T1/2細胞、Hs 742.T細胞、LI7細胞
CCD-841CoN Adherent人正常結(jié)腸上皮細胞系
RDES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-4B/C細胞、CD 18細胞、BT 549細胞
CEM-C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL120細胞、NOMO-1細胞、Farage OL細胞
NCIH520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-16細胞、A 172細胞、DC2.4細胞
Emory University-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME 180細胞、MDA-MB-157細胞、HIT clone T15細胞
MRC9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEB-3細胞、NCI-H226細胞、NCIH510細胞
NIT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA 87細胞、Co-115細胞、HCC202細胞
SKES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192B細胞、WRL 68細胞、KMB-17細胞
SNU119細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA1386細胞、MUTZ-3細胞、CL1-0細胞
NCI-H1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC26細胞、H2030細胞、D-283 Med細胞
Panc2_03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1836細胞、SW620細胞、Mahlavu細胞
OVCAR-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WML2細胞、CT-26細胞、PLA 802細胞
H-740細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC 812細胞、Hs746T細胞、Emory University-2細胞
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