"CCD-841CoN Adherent人正常結(jié)腸上皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：結(jié)腸上皮細(xì)胞；女性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng)：細(xì)胞凍存好了，接下來(lái)要注意什么問(wèn)題呢？沒(méi)錯(cuò)，就是記得到時(shí)間了，拿出來(lái)復(fù)蘇。那么，細(xì)胞復(fù)蘇的過(guò)程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢？細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬(wàn)不要使用不健康的細(xì)胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長(zhǎng)行為。凍存細(xì)胞：補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長(zhǎng)至７０%單層時(shí)收獲細(xì)胞，計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)２４小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每?jī)龃婀懿怀^(guò)１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒(méi)有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個(gè)最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞，以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問(wèn)題！細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點(diǎn)：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí)，有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要；其實(shí)，細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)，不過(guò)這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié)，不然，也不一定會(huì)盡如人意。例如說(shuō)，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護(hù)目鏡；盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
CCD-841CoN Adherent人正常結(jié)腸上皮細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長(zhǎng)，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái)，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來(lái)也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒(méi)有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問(wèn)題我覺(jué)得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng)：二、細(xì)胞細(xì)化太過(guò)，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒(méi)有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng)，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
Pa16C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F9細(xì)胞、Panc02-H0細(xì)胞、HO-8910 PM細(xì)胞
MDCK.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞、Hep G2-Luc細(xì)胞
SupB15W細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU387細(xì)胞、EOMA細(xì)胞、COLO-16細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
H-1672細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M細(xì)胞、Calu-3細(xì)胞、SK MEL 28細(xì)胞
Hs 636.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFO-27細(xì)胞、HCC1428細(xì)胞、PAa細(xì)胞
GM3569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3.NS-1/1.Ag4.1細(xì)胞、MDA-MB361細(xì)胞、KNS-81細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
CCD-841CoN Adherent人正常結(jié)腸上皮細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說(shuō)明書
常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問(wèn)題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過(guò)２０%，因?yàn)楹窟^(guò)低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不足，過(guò)高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時(shí)須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間，按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換；３)購(gòu)買的復(fù)蘇細(xì)胞，為何會(huì)有脫落？因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中不可避免的會(huì)有震蕩，收到后可以離心收集；４)購(gòu)買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購(gòu)買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí)，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
Pa18C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-766T細(xì)胞、BSC40細(xì)胞、NCI-441細(xì)胞
MES-SA/Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Glioma-261細(xì)胞、B16-F1細(xì)胞、HANK1細(xì)胞
H-747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPC-Y5細(xì)胞、H727細(xì)胞、VMRC-LCD細(xì)胞
SCC 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VeroC1008細(xì)胞、NCI-H522細(xì)胞、MV4-11細(xì)胞
EA.hy 926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAMSCs細(xì)胞、SKMel-5細(xì)胞、HEI-193細(xì)胞
Hs604T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSCCa細(xì)胞、P3X63細(xì)胞、GA-10 clone 4細(xì)胞
Vero細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3255細(xì)胞、A-375SM細(xì)胞、32D.3細(xì)胞
HT144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-4.2細(xì)胞、COLO829細(xì)胞、HEK 293-H細(xì)胞
MDA-MB-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H28細(xì)胞、3T3 L1細(xì)胞、HEK 293FT細(xì)胞
HFB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU484細(xì)胞、SUSM-1細(xì)胞、BA/F3細(xì)胞
MC57細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB19-RIKEN細(xì)胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞、NPA細(xì)胞
HEK AD293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63.Ag8.653細(xì)胞、C918細(xì)胞、SF-767細(xì)胞
HRCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu3細(xì)胞、McArdle RH-7777細(xì)胞、OCI-Ly 10細(xì)胞
CCD-841CoN Adherent人正常結(jié)腸上皮細(xì)胞系
WIL2 Secreting細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-441細(xì)胞、SNU-1細(xì)胞、Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞
HBVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-27細(xì)胞、Kelly細(xì)胞、OCI AML4細(xì)胞
U343細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK AD293細(xì)胞、FO [Mouse myeloma]細(xì)胞、SKNBE(2)細(xì)胞
U343細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK AD293細(xì)胞、FO [Mouse myeloma]細(xì)胞、SKNBE(2)細(xì)胞
SK-N-BE(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2023細(xì)胞、NEC8細(xì)胞、CALU 1細(xì)胞
KYSE520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-85細(xì)胞、Lewis lung carcinoma細(xì)胞、LC-2 ad細(xì)胞
HSF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1/2 clone8細(xì)胞、MGECs細(xì)胞、NCIH2106細(xì)胞
HuH-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-8細(xì)胞、DHL10細(xì)胞、NCI-H2291細(xì)胞
Vero 76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(1)細(xì)胞、HM細(xì)胞、PG-4 S+L-細(xì)胞
IM95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL279細(xì)胞、Nakata-1細(xì)胞、Panc_04_03細(xì)胞
HT clone H9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AsPC-1細(xì)胞、KU-19-19細(xì)胞、NCI-H2081細(xì)胞
TE-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-20細(xì)胞、C33A細(xì)胞、HEC1A細(xì)胞
130 T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2106細(xì)胞、3396細(xì)胞、MDAMB231細(xì)胞
A 2058細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE2C細(xì)胞、G-292, clone A141B1細(xì)胞、LS 174 T細(xì)胞
LTEP a2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 AG 8.653細(xì)胞、870細(xì)胞、Malme-3 M細(xì)胞
HASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS TE 85細(xì)胞、LIPF178C細(xì)胞、OCI Ly1細(xì)胞
RT-BM 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B95.8細(xì)胞、SK MEL-28細(xì)胞、CemT4細(xì)胞
Colon-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN 382細(xì)胞、PM6細(xì)胞、COLO 357細(xì)胞
LC1sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞、RPMI-8226S細(xì)胞、RenCa細(xì)胞
OCI AML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-45細(xì)胞、SUNE1細(xì)胞、GM00346B細(xì)胞
UM-UC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FM88細(xì)胞、YT細(xì)胞、C3H/10T1/2細(xì)胞
Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-1細(xì)胞、Hep 3B2_1-7細(xì)胞、GM-215細(xì)胞
AN3 CA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV-2細(xì)胞、Ishikawa細(xì)胞、COLO 679細(xì)胞
KBM-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY-50細(xì)胞、GS-9L細(xì)胞、SK-N-MC細(xì)胞
Hs 343.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TN5B14細(xì)胞、HKC細(xì)胞、V79-1細(xì)胞
HCC38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2171細(xì)胞、Hs 766.T細(xì)胞、MGC803細(xì)胞
MZCRC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT-1A細(xì)胞、YD15細(xì)胞、HLF-a細(xì)胞
BSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV 504細(xì)胞、Tn5B1-4細(xì)胞、RBMVEC細(xì)胞
HGSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE12細(xì)胞、RC92A細(xì)胞、NCI H82細(xì)胞
CX-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA-Pa-Ca-2細(xì)胞、BV-2細(xì)胞、GM03320細(xì)胞
SiHa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 620細(xì)胞、HCT8細(xì)胞、A.704細(xì)胞
Capan-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-1細(xì)胞、SNU-520細(xì)胞、RPMI1846細(xì)胞
HOMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MES細(xì)胞、KYSE-510細(xì)胞、BEL 7404細(xì)胞
Mono Mac 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHP-10細(xì)胞、KE 37細(xì)胞、Leukemia 1210細(xì)胞
J774.A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS114細(xì)胞、UMR 106細(xì)胞、RGC-6細(xì)胞
RPMI 7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 53細(xì)胞、SR-786細(xì)胞、SN12C-PM6細(xì)胞
Balb/c3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-SF 21AE細(xì)胞、DLM8細(xì)胞、BL6細(xì)胞
NCI-BL1339細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro-2a細(xì)胞、Tb 1-Lu細(xì)胞、NCTC1469細(xì)胞
SK-N-BE(1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AZ-521細(xì)胞、NOR-10細(xì)胞、RAMOS2G64C10細(xì)胞
NCI-H920細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEC-B3細(xì)胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞、CORL279細(xì)胞
C8161細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1238細(xì)胞、H196細(xì)胞、FO [Mouse myeloma]細(xì)胞
K1735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H 10T1/2細(xì)胞、Hs 742.T細(xì)胞、LI7細(xì)胞
CCD-841CoN Adherent人正常結(jié)腸上皮細(xì)胞系
RDES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-4B/C細(xì)胞、CD 18細(xì)胞、BT 549細(xì)胞
CEM-C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL120細(xì)胞、NOMO-1細(xì)胞、Farage OL細(xì)胞
NCIH520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-16細(xì)胞、A 172細(xì)胞、DC2.4細(xì)胞
Emory University-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME 180細(xì)胞、MDA-MB-157細(xì)胞、HIT clone T15細(xì)胞
MRC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEB-3細(xì)胞、NCI-H226細(xì)胞、NCIH510細(xì)胞
NIT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA 87細(xì)胞、Co-115細(xì)胞、HCC202細(xì)胞
SKES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192B細(xì)胞、WRL 68細(xì)胞、KMB-17細(xì)胞
SNU119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA1386細(xì)胞、MUTZ-3細(xì)胞、CL1-0細(xì)胞
NCI-H1568細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC26細(xì)胞、H2030細(xì)胞、D-283 Med細(xì)胞
Panc2_03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1836細(xì)胞、SW620細(xì)胞、Mahlavu細(xì)胞
OVCAR-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WML2細(xì)胞、CT-26細(xì)胞、PLA 802細(xì)胞
H-740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC 812細(xì)胞、Hs746T細(xì)胞、Emory University-2細(xì)胞
"