"PNEC30 epithelioid cells小鼠前列腺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
H-460細胞系相關產(chǎn)品：GLC-82細胞、RT-4細胞、B16F0細胞
TJ905細胞系相關產(chǎn)品：CCC-HEL-1細胞、SNU-407細胞、Pa017C細胞
NK-92.05細胞系相關產(chǎn)品：32D-Cl3細胞、H1573細胞、NCI-H146細胞
細胞生長：貼壁
PNEC30 epithelioid cells小鼠前列腺癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉移到液氮中貯存。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
EAC-E2G8細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR3細胞、TM-3細胞、A9 (Hamprecht)細胞
SW-948細胞系相關產(chǎn)品：SW 1573細胞、CL-34細胞、SKG-3a細胞
SHIN-3細胞系相關產(chǎn)品：Ball 1細胞、N2a細胞、HTR8細胞
SUM-52細胞系相關產(chǎn)品：AG 9細胞、B16/F0細胞、HCC 2185細胞
TE 32.T細胞系相關產(chǎn)品：SF 767細胞、WEHI-3B細胞、C1498細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
PNEC30 epithelioid cells小鼠前列腺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
3T3-A31細胞系相關產(chǎn)品：RBE細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、SupB15WT細胞
Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞系相關產(chǎn)品：GH3細胞、DrG細胞、Hs 819.T細胞
HFL 1細胞系相關產(chǎn)品：MIA Paca2細胞、Panc 04.03細胞、HCC-1937細胞
B16 F10細胞系相關產(chǎn)品：A-704細胞、253JBV細胞、LNCaP subline C4-2細胞
HL 60細胞系相關產(chǎn)品：SW 948細胞、B-104細胞、RERFLCMS細胞
PNT-1A細胞系相關產(chǎn)品：SV40 MES 13細胞、A9 (Hamprecht)細胞、GMK,BSC-1細胞
HepaRG細胞系相關產(chǎn)品：Sp2/O細胞、HRVEC細胞、HEMCSS細胞
RTMC細胞系相關產(chǎn)品：PL 45細胞、J-111細胞、KMH-2細胞
NCI H929細胞系相關產(chǎn)品：SUM 159細胞、J82COT細胞、CCRF-CEM細胞
CL40細胞系相關產(chǎn)品：HEK-293H細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞、B16BL-6細胞
PNEC30 epithelioid cells小鼠前列腺癌細胞系
SW 1116細胞系相關產(chǎn)品：WM239A細胞、PF382細胞、MCF-12A細胞
RS(4;11)細胞系相關產(chǎn)品：Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、MUTZ1細胞、THLE2細胞
HLEC-B3細胞系相關產(chǎn)品：MOLT 16細胞、BN-CL2細胞、MTEC1細胞
GM00637H細胞系相關產(chǎn)品：A101D細胞、SUDHL16細胞、IM-95細胞
SNU-182細胞系相關產(chǎn)品：B-104細胞、Hep 3B細胞、MDA-MB-175細胞
NCI-ADR-RES細胞系相關產(chǎn)品：Wayne State University-Head and Neck 13細胞、RPMI1846細胞、WEHI164細胞
NCI-ADR-RES細胞系相關產(chǎn)品：Wayne State University-Head and Neck 13細胞、RPMI1846細胞、WEHI164細胞
NCI-H441-4細胞系相關產(chǎn)品：H1975細胞、BNL.1ME A.7R.1細胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細胞
H-1417細胞系相關產(chǎn)品：CFPAC1細胞、NCIH1581細胞、KOSC-2 cl3-43細胞
NIH-3T3細胞系相關產(chǎn)品：TM-4細胞、CAL-85-1細胞、HA1800細胞
C6661細胞系相關產(chǎn)品：MOLP-8細胞、THLE-3細胞、NS1細胞
TOG細胞系相關產(chǎn)品：Human Epidermoid carcinoma #2細胞、H441細胞、CCRF-SB細胞
MM6細胞系相關產(chǎn)品：Kit225細胞、Rabbit Kidney 13細胞、C3A細胞
AML 12細胞系相關產(chǎn)品：Kit225 K6細胞、NCI-H1882細胞、NCIN87細胞
HT 1080.T細胞系相關產(chǎn)品：SK-Hep1細胞、HANK細胞、HFL細胞
MOLT 16細胞系相關產(chǎn)品：R.K.13細胞、HANK1細胞、NS20-Y細胞
TU 686細胞系相關產(chǎn)品：NF639細胞、KOPN8細胞、N-Tera-2細胞
H-1954細胞系相關產(chǎn)品：OV 1063細胞、ZR75_1細胞、C-Lu65細胞
ST細胞系相關產(chǎn)品：HGF-1細胞、THPI細胞、RGM-1細胞
ST細胞系相關產(chǎn)品：HGF-1細胞、THPI細胞、RGM-1細胞
Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞系相關產(chǎn)品：SW-1088細胞、NK92-MI細胞、HAEC細胞
hFOB 1.19細胞系相關產(chǎn)品：HTR8細胞、MiaPaCa2細胞、THP-1(ATCC)細胞
PNT1-a細胞系相關產(chǎn)品：DHL4細胞、GC-1細胞、MSTO-211細胞
LS 174T細胞系相關產(chǎn)品：HS 445T細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞、L 540細胞
8505C細胞系相關產(chǎn)品：BGC823細胞、NCI-H1930細胞、Danio rerio Gill細胞
H-157細胞系相關產(chǎn)品：U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞
NCI-H1581細胞系相關產(chǎn)品：ROS1728細胞、NCI-SNU-C2A細胞、GBC-SD細胞
Porcine Kidney-15細胞系相關產(chǎn)品：PLA801C細胞、LS-1034細胞、8305C_1細胞
MKN7細胞系相關產(chǎn)品：Panc 1細胞、HS-445細胞、WM266mel細胞
P-388D1細胞系相關產(chǎn)品：OV1063細胞、L-Wnt3A細胞、Neuro 2a細胞
HTR-8/SV neo細胞系相關產(chǎn)品：BDCM細胞、RMa-bm細胞、NCI-H747細胞
COLO 206細胞系相關產(chǎn)品：H-1650細胞、MC-3T3-E1細胞、HEC-1-A細胞
HTR-8/SV neo細胞系相關產(chǎn)品：BDCM細胞、RMa-bm細胞、NCI-H747細胞
NTERA-2cl.D1細胞系相關產(chǎn)品：DHBE細胞、MDA PCa 2b細胞、KCL22S細胞
H8細胞系相關產(chǎn)品：SNU-354細胞、HCC-78細胞、Jurkat Clone E6-1細胞
H35細胞系相關產(chǎn)品：OV 2008細胞、6T-CEM細胞、OVCAR8細胞
HSC3細胞系相關產(chǎn)品：Panc3_27細胞、NCI-H498細胞、HuTu-80細胞
SNUC2B細胞系相關產(chǎn)品：PaTu 8988 S細胞、H-727細胞、C-28/I2細胞
SNUC2B細胞系相關產(chǎn)品：PaTu 8988 S細胞、H-727細胞、C-28/I2細胞
U-266 AR1細胞系相關產(chǎn)品：DI TNC1細胞、SU86.86細胞、H1819細胞
IBRS2細胞系相關產(chǎn)品：DoTc2-4510細胞、NCI-H1092細胞、SW780細胞
SK-N-BE(2)C細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB157細胞、NCI-H64細胞、J-111細胞
SKNBE(2)細胞系相關產(chǎn)品：786-0WT細胞、HEL細胞、MDCK-2細胞
GES1細胞系相關產(chǎn)品：HEK293FT細胞、Hs832.Tc細胞、MG-HU-3細胞
VMM-5A細胞系相關產(chǎn)品：CC-LP-I細胞、AtT20細胞、PL-9細胞
SK-GT-2細胞系相關產(chǎn)品：D-407細胞、KP-N-RT-BM-1細胞、H-774細胞
EOC20細胞系相關產(chǎn)品：COV-434細胞、AgC11x3A細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞
H-82細胞系相關產(chǎn)品：NCIH295R細胞、HEL 299細胞、PG-BE1細胞
DMS-273細胞系相關產(chǎn)品：Hs840_T細胞、2780細胞、201T細胞
H-187細胞系相關產(chǎn)品：Hs27F細胞、MDA-MB468細胞、JTC-39細胞
SUM190細胞系相關產(chǎn)品：SW 780細胞、JURKAT E-61細胞、SCC15細胞
PNEC30 epithelioid cells小鼠前列腺癌細胞系
NCIH1184細胞系相關產(chǎn)品：AU-565細胞、H498細胞、H-847細胞
GM05887A細胞系相關產(chǎn)品：MDCK Type II細胞、SNUC2B細胞、G422細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞系相關產(chǎn)品：GM17219細胞、SupB15W細胞、HEC1A細胞
HFF細胞系相關產(chǎn)品：MAEC細胞、HepG2/C3A細胞、MJ細胞
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