"OKa-C-1 epithelioid cells人低分化肺癌鱗癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
RA-FLSs細胞系相關產(chǎn)品：HCC0044細胞、ZR75-30細胞、L6細胞
SuperTube細胞系相關產(chǎn)品：H1930細胞、TGW-I-nu細胞、LM6細胞
KNS81細胞系相關產(chǎn)品：3T3-J2細胞、LS-513細胞、LUDLU 1細胞
細胞生長：貼壁
OKa-C-1 epithelioid cells人低分化肺癌鱗癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
UPCISCC090細胞系相關產(chǎn)品：LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞、2PK-3細胞、3T3F442A細胞
SNU-407細胞系相關產(chǎn)品：HCC-44細胞、SK UT 1細胞、TE-1細胞
HuP-T3細胞系相關產(chǎn)品：SK-CO-1細胞、SMMC-7721細胞、HCT-116細胞
DHL5細胞系相關產(chǎn)品：B16 BL6細胞、HCC-366細胞、PL-12細胞
OVCA-420細胞系相關產(chǎn)品：RIN-m5F細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞、Pa14C細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
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細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
CCC-HEL-1細胞系相關產(chǎn)品：SF763細胞、MDA.MB.231細胞、WM-266-mel細胞
OP-9細胞系相關產(chǎn)品：MADB-106細胞、RERF-LCMS細胞、Y3-Ag1.2.3細胞
KYSE410細胞系相關產(chǎn)品：PTK-1細胞、HOS (TE85, Clone F5)細胞、WPE-int細胞
NCI-H295細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2141細胞、HUC-1細胞、Keio University-19-19細胞
T-HSC細胞系相關產(chǎn)品：SNU-119細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、ROS17/2.8細胞
BT549細胞系相關產(chǎn)品：HEC1-A細胞、U343MG細胞、DMS79細胞
Colo-206F細胞系相關產(chǎn)品：Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞、V-79細胞、NCI-H1930細胞
Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞系相關產(chǎn)品：SW-1088細胞、NK92-MI細胞、HAEC細胞
RGC5細胞系相關產(chǎn)品：HeLa.S3細胞、L- cell細胞、SW839細胞
BHK-21細胞系相關產(chǎn)品：QGP 1細胞、U266-B1細胞、SUM-190細胞
OKa-C-1 epithelioid cells人低分化肺癌鱗癌細胞系
HKBML細胞系相關產(chǎn)品：HL-1細胞、8226細胞、SW 962細胞
LTEP a2細胞系相關產(chǎn)品：P3X63 AG 8.653細胞、870細胞、Malme-3 M細胞
MDA-231細胞系相關產(chǎn)品：HOS(TE85)細胞、MNNG/HOS Clone F-5細胞、OC 316細胞
L428細胞系相關產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 2650細胞、MCF-7/AdrR細胞、H82細胞
Leukemia 1210細胞系相關產(chǎn)品：293T細胞、CL 1-0細胞、U-2OS細胞
WSU-DLCL2細胞系相關產(chǎn)品：RL-95-2細胞、MIO-M1細胞、CEM/C1細胞
WSU-DLCL2細胞系相關產(chǎn)品：RL-95-2細胞、MIO-M1細胞、CEM/C1細胞
Neuro 2a細胞系相關產(chǎn)品：A10細胞、HCC-95細胞、OLN 93細胞
MN9D細胞系相關產(chǎn)品：U251n細胞、Vero from pool #76細胞、HAPI細胞
KE37細胞系相關產(chǎn)品：H2107細胞、J111細胞、M14細胞
PC-9細胞系相關產(chǎn)品：CWR-22rv1細胞、V79-GalK1細胞、JJN3細胞
WSUDLCL2細胞系相關產(chǎn)品：CCC-HPF-1細胞、TE 32細胞、LAN5細胞
Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞系相關產(chǎn)品：SCC VII細胞、OCI/AML5細胞、MONO-MAC 6細胞
HSC-T6細胞系相關產(chǎn)品：Hs742T細胞、MM6細胞、HOC-1細胞
H1838細胞系相關產(chǎn)品：DCS細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDAMB157細胞
32D CL3細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H87細胞、Colo-201細胞、DAKIKI Clone 1細胞
WiDrTC細胞系相關產(chǎn)品：SNU-251細胞、H-1954細胞、CHO-K1細胞
Mouse INsulinoma 6細胞系相關產(chǎn)品：U251MG細胞、H1436細胞、WI38細胞
Hca-F細胞系相關產(chǎn)品：ARO81細胞、RASMCs細胞、SK Mel 2細胞
SK-N-BE(2)-M17細胞系相關產(chǎn)品：MAntle cell VERona-1細胞、Mono-Mac-1細胞、J111細胞
NCI-H1650細胞系相關產(chǎn)品：P30/0HK細胞、Normal fibroblast-10細胞、SKRC-42細胞
PANC0504細胞系相關產(chǎn)品：ATN1細胞、HIT細胞、SK-MEL-24細胞
P31FUJ細胞系相關產(chǎn)品：DHL-16細胞、ME1細胞、FU-OV-1細胞
FOXNY細胞系相關產(chǎn)品：B16/F1細胞、P815細胞、251 MG細胞
UCLA NPA871細胞系相關產(chǎn)品：MADB106細胞、A2780 CP70細胞、MDAMB361細胞
CT 26細胞系相關產(chǎn)品：NCI/ADR-RES細胞、CMT 64細胞、GM-346細胞
KGN細胞系相關產(chǎn)品：SO-RB50細胞、HS688AT細胞、SKCO1細胞
NuTu 19細胞系相關產(chǎn)品：RGE細胞、PT-K75細胞、HB611細胞
NCTC-929細胞系相關產(chǎn)品：SW1417細胞、HGSMC細胞、HO8910PM細胞
SGC7901/DDP細胞系相關產(chǎn)品：MHCC 97-H細胞、SUM190PT細胞、Co-115細胞
H-1581細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H841細胞、HLE細胞、YH細胞
RPMI8402細胞系相關產(chǎn)品：C-33 A細胞、MDCC MSB1細胞、Rat 1細胞
Capan 1細胞系相關產(chǎn)品：CAOV3細胞、BHP 10-3細胞、NCI-SNU-5細胞
My-La 2059細胞系相關產(chǎn)品：U-266 AR1細胞、H345細胞、MIMVEC細胞
BJA-B1細胞系相關產(chǎn)品：Me Wo細胞、Granta 519細胞、TR146細胞
As-PC1細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-435-S細胞、U373細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞
KE39細胞系相關產(chǎn)品：HFT8810細胞、ChaGo K-1細胞、HBE 135-E6/E7細胞
Fox/NY細胞系相關產(chǎn)品：ZR751細胞、HCS-2/8細胞、SNB-19細胞
Fox/NY細胞系相關產(chǎn)品：ZR751細胞、HCS-2/8細胞、SNB-19細胞
BSC-1細胞系相關產(chǎn)品：COV 504細胞、Tn5B1-4細胞、RBMVEC細胞
HCM細胞系相關產(chǎn)品：HEK-AD293細胞、AG 9細胞、WIL2-S細胞
NCIH2110細胞系相關產(chǎn)品：CL1.0細胞、SK-N-BE(1)細胞、LA 4細胞
RPE-hTERT細胞系相關產(chǎn)品：alpha TC1.6細胞、NTERA2細胞、D-283MED細胞
JHH-2細胞系相關產(chǎn)品：MRC-9細胞、LP1細胞、IM95細胞
SAOS 2細胞系相關產(chǎn)品：EO771細胞、SU.86細胞、Toledo細胞
CAL 148細胞系相關產(chǎn)品：TPC-1細胞、SNK-1細胞、HRA-19細胞
HEK-293-H細胞系相關產(chǎn)品：LK-2細胞、Reh細胞、SHG 44細胞
Panc-813細胞系相關產(chǎn)品：IA-LM細胞、PCI:SG-231細胞、OE-19細胞
HCT-8/V細胞系相關產(chǎn)品：DR2R 1610細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、TCCSUP細胞
TE354T細胞系相關產(chǎn)品：A2008細胞、RPMI6666細胞、PANC 813細胞
293F細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1876細胞、T_T_細胞、MV4;11細胞
OKa-C-1 epithelioid cells人低分化肺癌鱗癌細胞系
C3H/10T1/2 clone 8細胞系相關產(chǎn)品：TE 32細胞、PIG1細胞、RPMI-8402細胞
RT-112細胞系相關產(chǎn)品：C32-mel細胞、T47D:A細胞、A-875細胞
MMQ細胞系相關產(chǎn)品：Potorous tridactylus Kidney 2細胞、FET細胞、CemT4細胞
KYSE30細胞系相關產(chǎn)品：MCF7/WT細胞、GA-10 clone 4細胞、JB6 Cl 30-7b細胞
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