"SUNE1 epithelioid cells人低分化鼻咽癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
ETCC-007細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92-1-7細胞、UT-7細胞、HCC1187細胞
Hela-mock細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-123細胞、HCV 29細胞、Hs 578.Bst細胞
R 1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品：E0771細胞、PA1細胞、MLE12細胞
細胞生長：貼壁
SUNE1 epithelioid cells人低分化鼻咽癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
CAL-33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 678細胞、WM451細胞、hTERT-HPNE細胞
HHL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL 5細胞、NCI-H1963細胞、LAD2細胞
KM12-SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：143B TK-細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞、HLFa細胞
B-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-320DM細胞、SaOS細胞、RMS 13細胞
PANC0327細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 L1細胞、EU-2細胞、Granta-519細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SUNE1 epithelioid cells人低分化鼻咽癌細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
M059J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reuber-H-35 hepatoma細胞、RPE D407細胞、CFSC-8B細胞
HeLa S 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YD-38細胞、C2BBe 1細胞、L-363細胞
CL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞、MGH-U3 (RN)細胞、RC13細胞
NCIH209細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-5細胞、Capan 1細胞、VE細胞
H.Ep. No. 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL 2H3細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞、OVCAR8/ADR細胞
Panc_08_13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-112CoN細胞、Jurkat 77細胞、PCI-4M細胞
H-2110細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC 786-O細胞、Hs-729-T細胞、WC00079細胞
SF763細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H510A細胞、MONO-MAC 6細胞、PBMC細胞
HFL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-SB細胞、RCC10RGB細胞、H196細胞
OCI-Ly01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578Bst細胞、COLO 699細胞、E6-1細胞
SUNE1 epithelioid cells人低分化鼻咽癌細胞系
Tn5 B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL51細胞、UCLA-RO 81細胞、B-3細胞
T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-38細胞、Mel-624細胞、Hs-695-T細胞
NOZC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：F442A細胞、MFE-280細胞、Hs 636.T細胞
ARO81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12C細胞、Y3-Ag1,2,3細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞
G361mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP 267細胞、HCC-202細胞、HPB/ALL細胞
EFO 27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TU 686細胞、Kit-225細胞、JB6 [Mouse]細胞
EFO 27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TU 686細胞、Kit-225細胞、JB6 [Mouse]細胞
J774A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D:cl3細胞、UCLA-SO-14細胞、U-138-MG細胞
DMS 53細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM C7細胞、VB細胞、Eca 109細胞
HCC2218細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 819.T細胞、rHSC-99細胞、HCC-78細胞
Murine Lung Epithelial-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-10細胞、JEG3細胞、HBVP細胞
NCI-H358細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly3細胞、3T3F442A細胞、WPMY1細胞
M21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1385細胞、RKO細胞、SKCO 1細胞
Panc-02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC3細胞、LC-2 ad細胞、MARC-145細胞
PC 61-5-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM637細胞、NIH-3T3細胞、BNL.CL2細胞
LM(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0015細胞、373 MG細胞、B/C3T3細胞
CL1-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH-1細胞、HEp-2細胞、SW 626細胞
SW837細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC 5細胞、293AD細胞、EBC-1細胞
PLB985細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-5WgaRI3C細胞、P30-OHKUBO細胞、Panc-05.04細胞
Walker256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1993細胞、kms 11細胞、624mel細胞
JM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MG-HU-3細胞、MOLT 4細胞、S3-HeLa細胞
GH3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC090細胞、HCT15細胞、293T細胞
LNCaP-ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLA 144細胞、Japanese Tissue Culture-28細胞、P3HRI細胞
BRL 3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PFSK細胞、UO.31細胞、HCC1954BL細胞
Transformed Human Liver Epithelial-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKT3細胞、MOLM-13細胞、RAW264細胞
P3JHR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV40-MES13細胞、NCI-H920細胞、SKNBE細胞
7860細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF II細胞、IMR90細胞、RS411細胞
GM0637細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM149細胞、TOV112D細胞、Leukemic 1210細胞
Lu-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LO2細胞、NCIH661細胞、MDAMB175細胞
MDCC-MSB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-33-A細胞、RDES-1細胞、NCI-H1623細胞
LC1-Sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCI1細胞、NBL-2細胞、Pa17C細胞
HCV-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：E.L.4細胞、NCI-H-295細胞、Hmy.2 CIR細胞
MKN-74細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMS 1598細胞、IHHA-1細胞、alpha-TC1-6細胞
KB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-ALL1細胞、H-2171細胞、SUM-159PT細胞
D-341Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT2細胞、hTERT-HPNE細胞、RPMI #8226細胞
MLA-144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1963細胞、WEHI 231細胞、P3X63Ag8653細胞
Immortal Pig Intestinal-2I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO Lec1細胞、LM TK negative細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞
JiyoyeP-2003細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA SO M14細胞、B5537SKIN細胞、Panc813細胞
Pt-K2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA 231-LM2-4175細胞、HFT-8810細胞、HKF細胞
TK 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-116細胞、AG06814-N細胞、CAL851細胞
MCA 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeSoTheliOma-211H細胞、NSI/1-Ag4-1細胞、GC-1spg細胞
MB39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mc Ardle 7777細胞、JROECL 19細胞、NIH-3T3-L1細胞
SW 839細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EL 4細胞、TT細胞、FU-97細胞
DU 4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WRL68細胞、32D.cl3細胞、K562/ADR細胞
CAL-120細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ishikawa細胞、RAT2細胞、MBT-2細胞
MyLa2059細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL-24細胞、PC 61 5.3細胞、NCI-H1781細胞
SMMC7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTLA4Ig-24細胞、C-6細胞、GM07404細胞
OCILY10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLF-a細胞、RSMC細胞、C3H10T1/2 clone8細胞
MPVECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 239A細胞、PL-9細胞、Hs819.T細胞
NBLS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEF細胞、RT-BM 1細胞、RK 13細胞
Madin-Darby Bovine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2細胞、WM 239-A細胞、U-266 AR1細胞
SUNE1 epithelioid cells人低分化鼻咽癌細胞系
CHL-CL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AE1201細胞、H-2228細胞、H125細胞
Mel-624細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCK81細胞、BNL CL2細胞、SCC90細胞
A-1847細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SL-29細胞、Centre Antoine Lacassagne-62細胞、NCI.H460細胞
CL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞、Hs819T細胞、NR 8383細胞
"