"WM115 Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:黑色素瘤;女性
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶?jī)?nèi)沒有血清了,減少對(duì)胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來時(shí),拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢(shì)),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會(huì)死亡脫落,在換液的時(shí)候可以清除掉!
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
WM115 Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗(yàn)分享:支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長(zhǎng),營(yíng)養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個(gè)世界性問題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá),又不能通過可視法對(duì)其進(jìn)行檢測(cè),而且它對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)率影響較小,不易引起注意。國(guó)內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的,國(guó)外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞,有的細(xì)胞株可以同時(shí)污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來的污染和用來制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個(gè)方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作;細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后,特別是重要的細(xì)胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細(xì)胞壁,一般來講,對(duì)作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對(duì)多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對(duì)支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對(duì)支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
Y3Ag1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLMS1細(xì)胞、SNU16細(xì)胞、MDA MB 361細(xì)胞
SNU886細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh 7.5細(xì)胞、SNU-719細(xì)胞、Hu-P-T3細(xì)胞
HKC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-982細(xì)胞、PL9細(xì)胞、BL1339細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
XWLC-05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1770細(xì)胞、V79-1細(xì)胞、Hela-mock細(xì)胞
CCC-HEH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-GT-4細(xì)胞、Tn5 B1-4細(xì)胞、MESSADX5細(xì)胞
Ly10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-LU-1細(xì)胞、NRK 52E細(xì)胞、HT 144細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁
WM115 Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長(zhǎng)不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長(zhǎng),可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
KYSE0520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caki-1細(xì)胞、RM-1細(xì)胞、S16細(xì)胞
ssMCF-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-C1細(xì)胞、NCI.H522細(xì)胞、AZ 521細(xì)胞
FU-OV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH526細(xì)胞、MDA-MB-231-GFP細(xì)胞、U-CH1細(xì)胞
GalK 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞、HEB細(xì)胞、WiDr細(xì)胞
HUVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1436細(xì)胞、H2081細(xì)胞、SKMEL-1細(xì)胞
NCIH1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03570E細(xì)胞、COLO-738細(xì)胞、TOV112D細(xì)胞
T-98細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKml2細(xì)胞、MKN-28細(xì)胞、MDCK Type II細(xì)胞
Ly1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細(xì)胞、Sp2/0細(xì)胞、NCIH847細(xì)胞
SJRH-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞、746T細(xì)胞、SuDHL 4細(xì)胞
NCI-HUT-125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos.2G6.4C10細(xì)胞、Jurkat E6細(xì)胞、C33細(xì)胞
VP267細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細(xì)胞、COV-434細(xì)胞、H2029細(xì)胞
HOC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIXC-002細(xì)胞、H1092細(xì)胞、OVCA420細(xì)胞
RIN-m 14B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1783細(xì)胞、SHG44細(xì)胞、SupB15W細(xì)胞
WM115 Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
HCE-2 [50.B1]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-401細(xì)胞、HRA-19細(xì)胞、NCIH378細(xì)胞
NCIH1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFSC-2G細(xì)胞、LAN1細(xì)胞、KP-N-YN細(xì)胞
CHP-100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC9細(xì)胞、CAL-33細(xì)胞、HPDE6c7細(xì)胞
CHP-100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC9細(xì)胞、CAL-33細(xì)胞、HPDE6c7細(xì)胞
GM00637B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neukoplast細(xì)胞、L-M(TK-)細(xì)胞、alphaTC1 Clone 6細(xì)胞
U-373MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Astrocyte type I clone細(xì)胞、FU-97細(xì)胞、DoTc2 4510細(xì)胞
CL34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuP-T4細(xì)胞、RCCJF細(xì)胞、OCI AML3細(xì)胞
H.Ep. #2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1792細(xì)胞、Hs 739.T細(xì)胞、COV-362細(xì)胞
MT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAC細(xì)胞、PANC0813細(xì)胞、BBE細(xì)胞
H-510A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT28細(xì)胞、Line 207細(xì)胞、McCoy細(xì)胞
OCI AML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1693細(xì)胞、Hs-688A-T細(xì)胞、X63Ag8.653細(xì)胞
HCC2935細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC82細(xì)胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞、OC-3-VGH細(xì)胞
MC/CAR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-2058細(xì)胞、A 72細(xì)胞、WEHI 3B細(xì)胞
G361-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM-5細(xì)胞、TK-1細(xì)胞、REC 1細(xì)胞
SW13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1436細(xì)胞、WERI-Rb1細(xì)胞、hTERT-HME-1細(xì)胞
IPI-2I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-RT-BM-1細(xì)胞、Hs870T細(xì)胞、TE-14細(xì)胞
HT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FDC-P1細(xì)胞、HEK293EBNA細(xì)胞、OK細(xì)胞
253J-Bladder-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA 4細(xì)胞、KMST-6細(xì)胞、PAI細(xì)胞
Molm14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL78細(xì)胞、HCE-2 [50.B1]細(xì)胞、HS 445T細(xì)胞
H-1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3 LL細(xì)胞、Hs 274細(xì)胞、IHH4細(xì)胞
MOLT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL92.1.7細(xì)胞、RGC-5細(xì)胞、SNU668細(xì)胞
EC-109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRIF細(xì)胞、P3-X63Ag8.653細(xì)胞、SUDHL-1細(xì)胞
SW 1271細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774 A1細(xì)胞、T-T細(xì)胞、COLO-699細(xì)胞
NFS60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT-125細(xì)胞、PLC PRF 5細(xì)胞、P1-Raji細(xì)胞
TCC Sup細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 695.T細(xì)胞、OCI-Ly01細(xì)胞、OCILY10細(xì)胞
MDA-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS(TE85)細(xì)胞、MNNG/HOS Clone F-5細(xì)胞、OC 316細(xì)胞
P3HR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU119細(xì)胞、KYSE 450細(xì)胞、Clone 166細(xì)胞
HSC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc3_27細(xì)胞、NCI-H498細(xì)胞、HuTu-80細(xì)胞
67NR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs839T細(xì)胞、H2195細(xì)胞、LLCMK2細(xì)胞
MRC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE-1細(xì)胞、DSL6A/C1細(xì)胞、PCI-4B細(xì)胞
HANK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-II/CD18細(xì)胞、Hs274T細(xì)胞、NCI-H1618細(xì)胞
NCI-H1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIADRRES細(xì)胞、NCI-H2195細(xì)胞、SK-N-BE-2c細(xì)胞
H2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞、N87細(xì)胞、210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞
Jurkat FHCRC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-1395細(xì)胞、KMY1022細(xì)胞、SNK6細(xì)胞
HFL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIA Paca2細(xì)胞、Panc 04.03細(xì)胞、HCC-1937細(xì)胞
MUTZ3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero-76細(xì)胞、HCC202細(xì)胞、HUCCT1細(xì)胞
SW-1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDBK (NBL-1)細(xì)胞、IM 9細(xì)胞、NR 8383細(xì)胞
HFF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAEC細(xì)胞、HuH 6細(xì)胞、P3.653細(xì)胞
KMB-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE354T細(xì)胞、IOSE-80細(xì)胞、Med 283細(xì)胞
CCC-HSF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:McArdle RH-7777細(xì)胞、UMNSAH-DF-1細(xì)胞、2780細(xì)胞
LA-N-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1781細(xì)胞、HLEC-SRA 01/04細(xì)胞、KLN 205細(xì)胞
HEK293-FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVEC 4-10細(xì)胞、LM2-4175細(xì)胞、PL12細(xì)胞
WM115 Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
H1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1581細(xì)胞、MUGCHOR1細(xì)胞、GM00215A細(xì)胞
Mono-Mac-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-NS細(xì)胞、OSA細(xì)胞、P 815細(xì)胞
MCF7/WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB134VI細(xì)胞、MMAc-Serum Free細(xì)胞、C26細(xì)胞
CL-40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE-3細(xì)胞、HIBEC細(xì)胞、NG108-15細(xì)胞
H-2171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2030細(xì)胞、MO59J細(xì)胞、HIT T-15細(xì)胞
EB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP-M2細(xì)胞、CTLA4 Ig-24細(xì)胞、SUD6細(xì)胞
HMSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780CP細(xì)胞、SNU-387細(xì)胞、KU.812細(xì)胞
MIHA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCS-2/8細(xì)胞、NPC-039細(xì)胞、PaTu8988s細(xì)胞
MES13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FTC-133細(xì)胞、COLO201細(xì)胞、A-2780細(xì)胞
BALB/3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03573細(xì)胞、HO-8910 PM細(xì)胞、CG4細(xì)胞
SF-126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGSMC細(xì)胞、KP 4細(xì)胞、BIC細(xì)胞
FU-OV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH526細(xì)胞、NCIH2081細(xì)胞、GCT細(xì)胞
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