"V79 Adherent倉鼠肺細胞系
細胞背景資料：肺；自發(fā)永生；雄性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當(dāng)會事。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
V79 Adherent倉鼠肺細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至?xí)斐杉毎劳?。我談?wù)剛€人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當(dāng)放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
MUVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-25細胞、MOLT-3細胞、SNB19細胞
KHYG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cates 1B細胞、OVCAR8/ADR細胞、H2172細胞
PK-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-BE1細胞、NCI H747細胞、EBNA-293細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
H7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 18細胞、NCIH2073細胞、PY8119細胞
H7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 18細胞、NCIH2073細胞、PY8119細胞
MSTO211H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFS-60細胞、SUM-159PT細胞、CATH-a細胞
細胞生長特性：貼壁
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細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251細胞、SNU1040細胞、MLFC細胞
BCAP37細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSCT6細胞、HSC-3細胞、GM00637細胞
GOS-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-837細胞、8305C_1細胞、OV-90細胞
H596細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10(Clone 4)細胞、CCD 19Lu細胞、Dakiki細胞
NCI-SNU-449細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-330細胞、D-341Med細胞、EOC20細胞
NCI-H1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 2650細胞、COR-L105細胞、KOSC-2細胞
118MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-B1細胞、Detroit 562細胞、LM1細胞
Jurkat77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEC細胞、P3.times.63 Ag8.653細胞、H766T細胞
BeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-5細胞、TE-3A細胞、UM-UC-3細胞
NCI-H522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJCRH30細胞、RIN-m 14B細胞、H2170細胞
OV-CA 432細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLM-1細胞、CV-1 in Origin Simian-1細胞、OP-9細胞
FO [Mouse myeloma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31/Fujioka細胞、Colo16細胞、MHH-CALL-2細胞
3T3 Swiss Albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVTOKO細胞、BNL CL2細胞、CCK81細胞
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NOZC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：F442A細胞、MFE-280細胞、Hs 636.T細胞
NCI-H865細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-6細胞、AZ-521細胞、SU-DHL-2細胞
HCC-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLM1細胞、KE39細胞、SW-756細胞
HCC-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLM1細胞、KE39細胞、SW-756細胞
DoTc2 4510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO201細胞、SACC-83細胞、T-47-D細胞
18G3.cl 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-216細胞、NCI H157細胞、SKGIIIA細胞
UM-UC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1A細胞、H1299細胞、HD-LM-2細胞
Hep G2-Luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-5細胞、A673細胞、Ls-174-T細胞
CCD19-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCD-MLA-144細胞、NG 108-15細胞、AAV-293細胞
NCI-H647細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCLM6細胞、SPC-A-1細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞
OVCAR 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM/S細胞、Ball 1細胞、JIMT細胞
KP2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs832.Tc細胞、PAa細胞、NRCC細胞
SKNEP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-138MG細胞、U14細胞、BIC1細胞
H-774細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637細胞、SKNBE細胞、GB-1細胞
KYSE-410細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE1細胞、SKMEL-1細胞、BTT739細胞
D10.G4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP-126細胞、QGY-7703細胞、MDA-MB157細胞
Human Kidney-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1975細胞、B16-F10細胞、H-1876細胞
H-1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-28細胞、U-343-MG細胞、PT67細胞
Panc4.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMG-1細胞、EB2細胞、Melanoma 14細胞
T 98 G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHs74Int細胞、MLA144細胞、MPC-83細胞
NCIH1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMSC細胞、D341細胞、T. T細胞
NCIH226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-524細胞、LTPA細胞、COLO320DM細胞
NCI-H2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H102細胞、Mouse podocyte細胞、Evsa-T細胞
AU565細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV2細胞、COLO-741細胞、RL-952細胞
Epstein-Barr-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HK2細胞、MLTC-1細胞、SKMES細胞
High 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC 327細胞、MA104細胞、MKN7細胞
KE-37細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE39細胞、6-T CEM細胞、HM1900細胞
B-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-320DM細胞、SaOS細胞、RMS 13細胞
BC-3-H-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP126細胞、Lewis Lung細胞、NBL-3細胞
UMR106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW-nu細胞、Panc203細胞、Mouse INsulinoma 6細胞
CESS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-19細胞、B16 melanoma細胞、CaSki細胞
Tu 177細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-4細胞、NCI-SNU-1細胞、H-82細胞
TALL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-12F細胞、SW837細胞、MPC-5細胞
Hs-729-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI8226細胞、OCILY-10細胞、MM96L細胞
MHCC97-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、RIN m5F細胞、MC3T3-E1(C4)細胞
SW839細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-2細胞、Kit 225 K6細胞、SNU182細胞
TE9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03569細胞、NCIH838細胞、RPMI-6666細胞
PC3M-1E8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMx721.174.T2細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞、Hs839.T細胞
NUGC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP C4-2細胞、HBE 135-E6/E7細胞、H1703細胞
NB19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHC-ST1細胞、U-251 MG細胞、NCI-H1869細胞
ELD-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNEP-1細胞、22Rv-1細胞、BT-483細胞
Verda reno細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、H9c2(2-1)細胞、KG1A細胞
V79 Adherent倉鼠肺細胞系
L-M (TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/0細胞、SKGT2細胞、SKG IIIa細胞
FHL 124細胞系相關(guān)產(chǎn)品：38C13細胞、L-M[TK-]細胞、FRO 81-2細胞
P3-NS1/1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHLF細胞、NCI-H524細胞、Caco 2細胞
HFF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAEC細胞、HuH 6細胞、P3.653細胞
AU 565細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Det 562細胞、OCM1細胞、WC00097細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHEK細胞、T-HEECs細胞、SV40-MES13細胞
RINm-5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan-2細胞、NCIH1781細胞、hs 68細胞
BEAS2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JOSK-M細胞、MCA 38細胞、WM-239-A細胞
Pa16C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：F9細胞、Panc02-H0細胞、HO-8910 PM細胞
A-673細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2085細胞、Granta519細胞、LC-MS細胞
H-1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H841細胞、NCIH1048細胞、Hs675T細胞
GOS3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH660細胞、Institute for Medical Research-32細胞、HCC366細胞
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