"MC3T3-E1 Subclone 14 Adherent小鼠顱頂前骨細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞是從克隆的但是表型各異的MC３T３-E１細(xì)胞系中分離出一系列亞克隆。從含抗壞血酸培養(yǎng)基生長的成骨細(xì)胞中選擇高或低成骨細(xì)胞分化、礦化的亞克隆。 MC３T３亞克隆４（ATCC CRL-２５９３）和MC３T３亞克?。保矗ˋTCC CRL-２５９４）在抗壞血酸和３到４mM無機(jī)鹽中生長表現(xiàn)出高水平的成骨細(xì)胞分化。 它們１０天后形成一個(gè)礦化良好的細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）。MC３T３亞克?。玻矗ˋTCC CRL-２５９４）和MC３T３亞克?。常埃ˋTCC CRL-２５９６）在抗壞血酸中生長表現(xiàn)出很差的成骨細(xì)胞分化
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細(xì)胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱唵危宜腊?。１、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個(gè)問題，太長的消化時(shí)間會讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻，這個(gè)有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個(gè)事情，因?yàn)檫@個(gè)東西流程長。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個(gè)概念的，所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話，這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個(gè)很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個(gè)見得太多了，別不當(dāng)會事。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
MC3T3-E1 Subclone 14 Adherent小鼠顱頂前骨細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動作輕，避免晃動。細(xì)胞生長挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長：二、細(xì)胞細(xì)化太過，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
HS578T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-468細(xì)胞、EAhy 926細(xì)胞、LA-N-6(OAN)細(xì)胞
SW403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：V-79細(xì)胞、no-11細(xì)胞、6T-CEM細(xì)胞
C-Lu-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-167細(xì)胞、AU565細(xì)胞、RH7777細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
H-660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63細(xì)胞、WM266mel細(xì)胞、Y3-Ag123細(xì)胞
NCI-H847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Namalwa細(xì)胞、NCI-H-128細(xì)胞、IPLB-SF 21AE細(xì)胞
LSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1703細(xì)胞、NIH 3T3細(xì)胞、CF-1 MEF細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁
MC3T3-E1 Subclone 14 Adherent小鼠顱頂前骨細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：成纖維細(xì)胞樣
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況，請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過８０%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時(shí)，請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會造成細(xì)胞無法存活。
RKN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu177細(xì)胞、OE33細(xì)胞、ECV304細(xì)胞
NBL_S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KCL22細(xì)胞、HEK.EBNA細(xì)胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞
OCI-LY-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS17/2.8細(xì)胞、MCA38細(xì)胞、HCC-9724細(xì)胞
NCI-H28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nittby-Salford 1細(xì)胞、L929(NCTC)細(xì)胞、H774細(xì)胞
PLCPRF5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-II細(xì)胞、QBC939細(xì)胞、L929(NCTC)細(xì)胞
NCI-H460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel28細(xì)胞、NCI-H1793細(xì)胞、SW 480細(xì)胞
SR-786細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-4細(xì)胞、EFM-192B細(xì)胞、SK-RC-52細(xì)胞
HIT-T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA560細(xì)胞、H747細(xì)胞、SNU886細(xì)胞
C8166細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T 84細(xì)胞、Pa17C細(xì)胞、L-929細(xì)胞
KM932細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-24細(xì)胞、Caco-2細(xì)胞、HRC-99細(xì)胞
Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOMA細(xì)胞、McCoy B細(xì)胞、MES-SA Dx5細(xì)胞
SiHa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 620細(xì)胞、HCT8細(xì)胞、A.704細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tsup-1細(xì)胞、P3X63Ag8細(xì)胞、HTori-3.1細(xì)胞
MC3T3-E1 Subclone 14 Adherent小鼠顱頂前骨細(xì)胞系
Plaepi 34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA PCa 2b細(xì)胞、NBL_S細(xì)胞、CA922細(xì)胞
OE-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon26細(xì)胞、Jurkat E6.1細(xì)胞、H250細(xì)胞
IPLB-SF 21AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKO3細(xì)胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞、HCC-2108細(xì)胞
IPLB-SF 21AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKO3細(xì)胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞、HCC-2108細(xì)胞
MRASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞、EC9706細(xì)胞、CCD-18Co細(xì)胞
MKN28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV112細(xì)胞、D324細(xì)胞、SKLU1細(xì)胞
OVCAR-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435 S細(xì)胞、BC3H1細(xì)胞、Hs578Bst細(xì)胞
LTPA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH244細(xì)胞、HT-55細(xì)胞、NCIH1299細(xì)胞
Hs 281.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-320-DM細(xì)胞、NCM460細(xì)胞、ARH-77細(xì)胞
NCIADR.RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUNE 1細(xì)胞、SU-DHL-5細(xì)胞、3LL細(xì)胞
HuP-T4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-6細(xì)胞、OCI/AML-2細(xì)胞、EL4細(xì)胞
Reuber H35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC-1[JHU-1]細(xì)胞、M-1 myeloid leukemia細(xì)胞、JM細(xì)胞
CD18/HPAF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-9細(xì)胞、RL95-2細(xì)胞、Chinese Hamster Lung細(xì)胞
COLO-357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU449細(xì)胞、S91細(xì)胞、MM1.S細(xì)胞
NCI-Hut 125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R1800[RA]細(xì)胞、NMCG-1細(xì)胞、Strain V細(xì)胞
SKRC-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VA-ES-BJ細(xì)胞、Ly19細(xì)胞、Sci-1細(xì)胞
G-292 clone A141B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB2細(xì)胞、NCIH244細(xì)胞、LLC1細(xì)胞
HCC-1500細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMES1細(xì)胞、Nb-2細(xì)胞、SW-1783細(xì)胞
SUM-159PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs683細(xì)胞、OCI-LY-3細(xì)胞、LC2/Ad細(xì)胞
HEC151細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Monomac-1細(xì)胞、LN-382細(xì)胞、253J細(xì)胞
CCD-1095Sk細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC 9細(xì)胞、hFOB 1.19細(xì)胞、HCO細(xì)胞
NCTC-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1417細(xì)胞、HGSMC細(xì)胞、HO8910PM細(xì)胞
Mouse Colon 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTC1細(xì)胞、SNU-484細(xì)胞、MDA-231細(xì)胞
MPC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-HSR細(xì)胞、CCRF.CEM細(xì)胞、H-2052細(xì)胞
Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1588細(xì)胞、MPC5細(xì)胞、SW-527細(xì)胞
MV-4-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-3細(xì)胞、SPC-A1細(xì)胞、UACC-893細(xì)胞
BEL7405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GDM1細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞、CAL33細(xì)胞
HSC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2081細(xì)胞、Nb2細(xì)胞、HUCEC細(xì)胞
ANA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-127細(xì)胞、KBM7細(xì)胞、H-2081細(xì)胞
Hep-G2/C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha TC1-6細(xì)胞、BJA-B-1細(xì)胞、aTC1-6細(xì)胞
A-498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Raji細(xì)胞、HBSMC細(xì)胞、A2780/CP細(xì)胞
MM.1S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1419細(xì)胞、C-4I細(xì)胞、F36P細(xì)胞
OVCAR420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SiHa細(xì)胞、MDA MB 134VI細(xì)胞、SF767細(xì)胞
aTC1 Clone 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D407 RPE細(xì)胞、NCTC 1469細(xì)胞、4T1細(xì)胞
M14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK MEL-28細(xì)胞、T1-73細(xì)胞、Douglas Foster-1細(xì)胞
WM 2664細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-9細(xì)胞、SK-MEL24細(xì)胞、MV411細(xì)胞
H-35 Reuber細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 394細(xì)胞、SHSY5Y細(xì)胞、HCC1569細(xì)胞
DLD1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AgC11x3A細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞、Mahlavu細(xì)胞
CL40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293H細(xì)胞、Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞、B16BL-6細(xì)胞
Neuro2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DKMG細(xì)胞、IPAM-WT細(xì)胞、H-1651細(xì)胞
MOLP-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 742.T細(xì)胞、HSC-4細(xì)胞、SNU475細(xì)胞
32D.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TKB-1細(xì)胞、Hs 636.T細(xì)胞、Capan1細(xì)胞
MC3T3-E1 Subclone 14 Adherent小鼠顱頂前骨細(xì)胞系
Lec1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ChaGo-K-1細(xì)胞、Caco-2/BBe 1細(xì)胞、EOMA細(xì)胞
G519細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H747細(xì)胞、OVCAR-432細(xì)胞、GTL 16細(xì)胞
RCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375細(xì)胞、GM17219細(xì)胞、PANC3.27細(xì)胞
NRK 49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA205細(xì)胞、YAC-1細(xì)胞、T-CAM2細(xì)胞
SUM-149細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAMOS2G64C10細(xì)胞、HMEC-1細(xì)胞、KYSE-150細(xì)胞
VMM-5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CC-LP-I細(xì)胞、AtT20細(xì)胞、PL-9細(xì)胞
OE-33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEC1細(xì)胞、Hs 934.T細(xì)胞、KM12 SM細(xì)胞
HSC/mHSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞、Danio rerio Gill細(xì)胞、hESC細(xì)胞
C1498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB-3細(xì)胞、BJA-B1細(xì)胞、Mono Mac 1細(xì)胞
HT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FDC-P1細(xì)胞、LNCaP.FGC細(xì)胞、HTori:3細(xì)胞
Panc05.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCPEpiC細(xì)胞、HSC3細(xì)胞、LICR-LON-HN6-R細(xì)胞
OCI-LY-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS17/2.8細(xì)胞、P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞、NG10815細(xì)胞
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