"HTR-8/SVneo Adherent人絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時(shí),從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對(duì)細(xì)胞損傷較小,但是,價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無法使組織上的細(xì)胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點(diǎn)是:對(duì)細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺(tái)上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HTR-8/SVneo Adherent人絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長(zhǎng),用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來,很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕,避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng):二、細(xì)胞細(xì)化太過,細(xì)胞成片脫落,吹打時(shí)沒有受力點(diǎn),細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn):HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng),一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
DLD1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AgC11x3A細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞、Mahlavu細(xì)胞
Sp 2817細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI1846細(xì)胞、OUMS27細(xì)胞、NCI-BL6細(xì)胞
NCI-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-RT細(xì)胞、NCIH378細(xì)胞、HCC0038細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
Hs 742.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:High5細(xì)胞、H-1435細(xì)胞、B16 subline B78細(xì)胞
451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-1 Ag4.1細(xì)胞、RPMI No. 1846細(xì)胞、HCa/16A3-F細(xì)胞
MDCC-MSB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-33-A細(xì)胞、RDES-1細(xì)胞、NCI-H1623細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁
HTR-8/SVneo Adherent人絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣
造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時(shí)間,有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí),不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗(yàn);2)器材或者溶液很久沒用,未檢測(cè)是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈;點(diǎn)了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗(yàn);4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面,東西太多太亂:超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)!這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好,啥時(shí)候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔?xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗(yàn)在無菌條件下操作。出入試驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí),喜歡說話聊著做試驗(yàn),要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢!
KYSE-70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK/293細(xì)胞、NCI-H82細(xì)胞、Nthy-ori 3.1細(xì)胞
5-8F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs852細(xì)胞、TE1細(xì)胞、NCI-H1417細(xì)胞
H-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1648細(xì)胞、NALM6細(xì)胞、H4IIE細(xì)胞
JEG-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-295R細(xì)胞、GM02131A細(xì)胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞
H-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC-82細(xì)胞、RT-4細(xì)胞、B16F0細(xì)胞
Mono Mac6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:138 MG細(xì)胞、KATOIII細(xì)胞、SCC-9細(xì)胞
MFE296細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL1細(xì)胞、CCD-841CoTr細(xì)胞、HBL1細(xì)胞
MN-9D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono Mac6細(xì)胞、BT549細(xì)胞、H-2405細(xì)胞
3T6-Swiss albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9/S1細(xì)胞、STC-1細(xì)胞、G361細(xì)胞
GM-3573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD18細(xì)胞、COLO-394細(xì)胞、CCRF-CEM C7細(xì)胞
U-118-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP4細(xì)胞、Hs611T細(xì)胞、NB-9細(xì)胞
SKNBE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞、IMCD3細(xì)胞、SCL I細(xì)胞
COLO 206細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1650細(xì)胞、MC-3T3-E1細(xì)胞、HEC-1-A細(xì)胞
HTR-8/SVneo Adherent人絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞系
SaOS-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2058細(xì)胞、HO8910PM細(xì)胞、LNCaP-FGC細(xì)胞
CCD841CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-72細(xì)胞、MFM223細(xì)胞、U-343細(xì)胞
BC3 H1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-27細(xì)胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞、LAC細(xì)胞
H647ell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMMC-7721細(xì)胞、C3H10T1/2細(xì)胞、OCIAML4細(xì)胞
GC1-SPG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SaOS-2細(xì)胞、SUM149-PT細(xì)胞、H-1048細(xì)胞
PK 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC-MSB1細(xì)胞、HCC95細(xì)胞、Panc 3.27細(xì)胞
Tca-8113細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12細(xì)胞、Hca-F細(xì)胞、NP-69細(xì)胞
OSC19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL-6細(xì)胞、SEG-1細(xì)胞、SU86_86細(xì)胞
LC1/Sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 822.T細(xì)胞、Be-Wo細(xì)胞、HCC-1806細(xì)胞
SKNBE(1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb 1細(xì)胞、HCC-1588細(xì)胞、NBL_S細(xì)胞
KU-812F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:E304細(xì)胞、LAN-6細(xì)胞、BpRc1細(xì)胞
J-774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR 90細(xì)胞、A9細(xì)胞、Rat-1細(xì)胞
H838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:E.G7-OVA細(xì)胞、Hs 600.T細(xì)胞、AML-2細(xì)胞
RPMI 6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV-112細(xì)胞、Fetal Human Colon細(xì)胞、NCI-H1437細(xì)胞
NuTu 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGE細(xì)胞、PT-K75細(xì)胞、HB611細(xì)胞
SKNBE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C17細(xì)胞、ECV細(xì)胞、JiyoyeP-2003細(xì)胞
McA-RH 8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-375細(xì)胞、Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞、SCL II細(xì)胞
HIC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hA549細(xì)胞、GP2d細(xì)胞、SF 763細(xì)胞
SK-BR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS11細(xì)胞、CAMA-1細(xì)胞、OVCAR 432細(xì)胞
143B TK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03571細(xì)胞、MH-22a細(xì)胞、SK RC 52細(xì)胞
IM-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW948細(xì)胞、CPA47細(xì)胞、NCL-H548細(xì)胞
CHL/IU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-747細(xì)胞、DoTc2細(xì)胞、MOLP8細(xì)胞
JVM-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE180細(xì)胞、HEL92.1.7細(xì)胞、Tca8113細(xì)胞
293-GP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHG 44細(xì)胞、SKES1細(xì)胞、Panc2.03細(xì)胞
THLE-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human podocyte細(xì)胞、SKMES細(xì)胞、95D細(xì)胞
L540細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA/Dx5細(xì)胞、P31 FUJ細(xì)胞、RS(4;11)細(xì)胞
Neuro-2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBSMC細(xì)胞、IOSE80細(xì)胞、Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞
Malme-3 M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS-62細(xì)胞、NS1-Ag 4/1細(xì)胞、SRS-82細(xì)胞
HAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞、A-72細(xì)胞、DU4475細(xì)胞
GM00637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0410細(xì)胞、H847細(xì)胞、CTSC-3細(xì)胞
RPMI #1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE37細(xì)胞、HSC4細(xì)胞、HS578T細(xì)胞
RS411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT2-D1細(xì)胞、LAN-5細(xì)胞、HEK293-FT細(xì)胞
PG-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 5細(xì)胞、786-O細(xì)胞、Karpas299細(xì)胞
M-G63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMel-5細(xì)胞、SUIT-2細(xì)胞、HLE-B3細(xì)胞
CAMA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-7702細(xì)胞、MX-1細(xì)胞、2V6.11細(xì)胞
Hepa1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dx5細(xì)胞、CATH-a細(xì)胞、SAS細(xì)胞
Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:STC-1細(xì)胞、LoMeT-ccRcc細(xì)胞、H-1882細(xì)胞
Caco-2/BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TB-1 Lu細(xì)胞、NB4細(xì)胞、TE 671細(xì)胞
MFE-280細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSAS3細(xì)胞、JB6Cl30細(xì)胞、L- cell細(xì)胞
HANK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA-38細(xì)胞、H-1781細(xì)胞、NCI-H322細(xì)胞
rRMECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NEC-8細(xì)胞、751-NA細(xì)胞、U 937細(xì)胞
SKES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-192B細(xì)胞、WRL 68細(xì)胞、KMB-17細(xì)胞
HTR-8/SVneo Adherent人絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞系
MDA 435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP2細(xì)胞、A-375.S2細(xì)胞、T47D細(xì)胞
Hs683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-F細(xì)胞、LK 2細(xì)胞、Line 697細(xì)胞
NCIH211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-10細(xì)胞、MDA-361細(xì)胞、NCI-H740細(xì)胞
MC-3T3-E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC-4細(xì)胞、Mo 59J細(xì)胞、NCI-SNU-182細(xì)胞
OV-2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPAM-WT細(xì)胞、MHCCLM3細(xì)胞、R1610細(xì)胞
H-2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-12細(xì)胞、NIH/3T3細(xì)胞、MDA-MB-453細(xì)胞
NCI-H460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel28細(xì)胞、NCI-H1793細(xì)胞、SW 480細(xì)胞
SNU-C2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AAV293細(xì)胞、SNU-354細(xì)胞、SNU-5細(xì)胞
AML193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH146細(xì)胞、MOLP2細(xì)胞、GM01232E細(xì)胞
HO1N1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Case 3細(xì)胞、AKR細(xì)胞、QG56細(xì)胞
MH-22a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:High-5細(xì)胞、Mono-Mac-6細(xì)胞、WERI-Rb 1細(xì)胞
H9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:8402細(xì)胞、TSCC1細(xì)胞、NCI-H2107細(xì)胞
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