"SCL-I Adherent人皮膚磷癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉!
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SCL-I Adherent人皮膚磷癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結凍時體積會增加約10%,必須預留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應立即停用,更換另一批號的血清。
MXI細胞系相關產(chǎn)品:Earles's cells細胞、HET-1A細胞、HepG2-luc細胞
CEM-C1細胞系相關產(chǎn)品:Reuber H35細胞、AG06814-J細胞、Hs 729細胞
Tca-83細胞系相關產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-33細胞、NCI-H1648細胞、NCI-H1355細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
IPAM-WT細胞系相關產(chǎn)品:Mink細胞、Hs 822.T細胞、BEND細胞
NS20-Y細胞系相關產(chǎn)品:F442-A細胞、HeLa229細胞、FM-88細胞
HCC-1569細胞系相關產(chǎn)品:WSUDLCL2細胞、AN3 CA細胞、Hs606T細胞
細胞生長特性:貼壁
SCL-I Adherent人皮膚磷癌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
SNU-719細胞系相關產(chǎn)品:HcerEpic細胞、P36細胞、Sp2/0-Ag14細胞
KLN 205細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-175細胞、COLO357細胞、Hep3B細胞
HTori-3細胞系相關產(chǎn)品:LM6細胞、Hs 746T細胞、MUG-Chor1細胞
rUCMSCs細胞系相關產(chǎn)品:HEK.EBNA細胞、SB細胞、ME16C細胞
TALL 1細胞系相關產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-12F細胞、SW837細胞、MPC-5細胞
Human Foreskin Fibroblast細胞系相關產(chǎn)品:STC-1細胞、LoMeT-ccRcc細胞、H-1882細胞
MyLa2059細胞系相關產(chǎn)品:SKMEL-24細胞、PC 61 5.3細胞、NCI-H1781細胞
SNU16細胞系相關產(chǎn)品:CAL39細胞、FL 62891細胞、RIN14B細胞
H209細胞系相關產(chǎn)品:HN6細胞、SKHEP1細胞、SPCA1細胞
HPAF2細胞系相關產(chǎn)品:EB-2細胞、NCI-H1373細胞、NCIH358細胞
KTCTL-140細胞系相關產(chǎn)品:C518細胞、COLO 684細胞、H-1954細胞
IPAM-WT細胞系相關產(chǎn)品:Mink細胞、Hs 822.T細胞、BEND細胞
Tn5B1-4細胞系相關產(chǎn)品:PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、B16/F10細胞、RCC10RGB細胞
SCL-I Adherent人皮膚磷癌細胞系
H23細胞系相關產(chǎn)品:EC-GI細胞、HUSMC細胞、2T細胞
U-2932細胞系相關產(chǎn)品:Hs 839.T細胞、P3HR1細胞、NRK52E細胞
HOP62細胞系相關產(chǎn)品:UM-RC-2細胞、SK-OV-3細胞、Ku812F細胞
HOP62細胞系相關產(chǎn)品:UM-RC-2細胞、SK-OV-3細胞、Ku812F細胞
ADR-RES細胞系相關產(chǎn)品:SG231細胞、B-16細胞、Hs600T細胞
Karpas-299細胞系相關產(chǎn)品:HCM細胞、SHIN-3細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞
KM.12細胞系相關產(chǎn)品:HFLS細胞、GM02131細胞、SK HEP 01細胞
hFOB細胞系相關產(chǎn)品:H.Ep. No. 2細胞、NCI-446細胞、COV 504細胞
NCIH1734細胞系相關產(chǎn)品:SUDHL-1細胞、NCI-H1395細胞、SW-403細胞
HUT28細胞系相關產(chǎn)品:COLO 320 HSR細胞、KS-1 [Human glioblastoma]細胞、QSG7701細胞
KM.12細胞系相關產(chǎn)品:HFLS細胞、GM02131細胞、SK HEP 01細胞
WIL2 Secreting細胞系相關產(chǎn)品:H-441細胞、SNU-1細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞
OCIAML2細胞系相關產(chǎn)品:DF1細胞、Hk-2細胞、GM00637I細胞
SUDHL-8細胞系相關產(chǎn)品:SK-MEL-1細胞、OCI-Ly18細胞、LS123細胞
RBL 2H3細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2023細胞、UPCI-SCC-90細胞、C4-2細胞
MHCC 97-L細胞系相關產(chǎn)品:CT-26 WT細胞、U-2OS細胞、Colon38細胞
MIA PaCa-2細胞系相關產(chǎn)品:NCI H82細胞、SP2細胞、DoTc2-4510細胞
138MG細胞系相關產(chǎn)品:TYKnu細胞、HEK293-EBNA1細胞、DrG細胞
U87MG細胞系相關產(chǎn)品:OE-19細胞、EFM-192C細胞、BHK 21細胞
LC1細胞系相關產(chǎn)品:PAa細胞、EA. hy 926細胞、AN3 CA細胞
KPL-1細胞系相關產(chǎn)品:GM2219C細胞、WC00044細胞、Hs 940.T細胞
Walker-Ca.256細胞系相關產(chǎn)品:Tu 177細胞、WSU-DLCL(2)細胞、KNS42細胞
WM 115細胞系相關產(chǎn)品:FU-OV-1細胞、N-2a細胞、BT325細胞
SO-Rb 50細胞系相關產(chǎn)品:293/EBNA細胞、H-1385細胞、RASMC細胞
HO8910細胞系相關產(chǎn)品:HEC-1B細胞、HBZY 1細胞、H-2330細胞
HCC-2108細胞系相關產(chǎn)品:Human Embryonic Skin細胞、N-9細胞、KYSE-520細胞
KRCY細胞系相關產(chǎn)品:MDCK-II細胞、Ly18細胞、MDA231-LM2細胞
OVCAR420細胞系相關產(chǎn)品:SiHa細胞、MDA MB 134VI細胞、SF767細胞
SW1271細胞系相關產(chǎn)品:BT325細胞、P3X63 AG8-653細胞、3T3L1細胞
10T1/2細胞系相關產(chǎn)品:BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞
Wistar Institute, Susan Hayflick細胞系相關產(chǎn)品:HEK293-EBNA1細胞、RPMI-1846細胞、JROECL 21細胞
Colon 38細胞系相關產(chǎn)品:SKMEL-31細胞、Ls-174-T細胞、SkMel31細胞
Line 870 Emory University-4細胞系相關產(chǎn)品:CCD841CoTr細胞、U343細胞、Wien-133細胞
MIN6細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1568細胞、10RGB細胞、LS 123細胞
UMNSAH-DF-1細胞系相關產(chǎn)品:U343MG細胞、WM115mel細胞、VAESBJ細胞
V-79細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-5細胞、H9細胞、SKM1細胞
A2780/Taxol細胞系相關產(chǎn)品:RT112細胞、OVMANA細胞、HSC/mHSC細胞
SKOV-433細胞系相關產(chǎn)品:H1703細胞、Hs 729.T細胞、MC-26細胞
MSF細胞系相關產(chǎn)品:H2227細胞、U87-MG細胞、Panc 10.05細胞
DH-82細胞系相關產(chǎn)品:PANC-03-27細胞、CMT167細胞、BC-009細胞
M-1 myeloid leukemia細胞系相關產(chǎn)品:NCI H69細胞、H69/P細胞、RAT2細胞
Hs739T細胞系相關產(chǎn)品:OCI-Ly 7細胞、B-cell with DC Morphology細胞、H-2171細胞
SCL-I Adherent人皮膚磷癌細胞系
Normal Rat Kidney-49F細胞系相關產(chǎn)品:A-172MG細胞、Tu177細胞、HCC-1419細胞
UPCI-SCC-154細胞系相關產(chǎn)品:C-28/I2細胞、NCIH209細胞、WM-115細胞
Human Liver-7702細胞系相關產(chǎn)品:JiyoyeP-2003細胞、ATDC5細胞、LICR-HN-6細胞
Z138細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H520細胞、HeLa 229細胞、KATOIII細胞
H-1930細胞系相關產(chǎn)品:PaCa2細胞、HS-294-T細胞、253J-BV細胞
HOP 62細胞系相關產(chǎn)品:SNU886細胞、NCI-SNU-16細胞、H-1105細胞
LS180細胞系相關產(chǎn)品:SW982細胞、MDA-MB453細胞、Hs 294T細胞
Rat Glomerular Endothelial細胞系相關產(chǎn)品:NCIH747細胞、JeKo-1細胞、NCI747細胞
SK-Mel1細胞系相關產(chǎn)品:PC-3M-2B4細胞、OVCAR-433細胞、Ketr3細胞
OCI/AML5細胞系相關產(chǎn)品:ACC3細胞、H650細胞、Malme-3M細胞
Meat Animal Research Center-145細胞系相關產(chǎn)品:Hu-P-T3細胞、SNU-719細胞、MIA Paca2細胞
HTori3細胞系相關產(chǎn)品:GM637A細胞、BIU-87/Adr細胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞
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