"BT-B Adherent人膀胱癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
BT-B Adherent人膀胱癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
H69/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mo 59J細胞、SNU-1040細胞、HFT-8810細胞
EBTr (NBL-4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep3B細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、HHL5細胞
MHH-CALL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIEC細胞、KYSE 270細胞、OCI/AML-3細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
U87-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1385細胞、C3H10T1-2細胞、C33-A細胞
COLO-HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H.Ep. #2細胞、HOC1細胞、rRTEC細胞
BC-019細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 8細胞、VMRC-RCZ細胞、Jurkat細胞
細胞生長特性:貼壁
BT-B Adherent人膀胱癌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
D324細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR32細胞、NCI-H211細胞、RMC-1細胞
Capan 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAOV3細胞、BHP 10-3細胞、NCI-SNU-5細胞
Alexander細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF-21-AE細胞、95D細胞、Sp2/0-Ag-14細胞
MDA-MB-415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H23細胞、QSG7701細胞、H-1930細胞
GM2131細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-112細胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細胞、PIEC細胞
NK 10a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1734細胞、alpha TC1.6細胞、MPP-89細胞
DMS 114細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB175VII細胞、BrCL12細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞
MUTZ3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero-76細胞、HCC202細胞、HUCCT1細胞
Bovine ENDometrial cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N9細胞、MDA-MB-134-VI細胞、CF Pac1細胞
U-251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1116細胞、EC-GI-10細胞、P 3 HR 1細胞
P-815細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞、Panc-327細胞
Panc04.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK92細胞、NF639細胞、Rabbit Kidney 13細胞
NCI-HUT-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TR-146細胞、ECV 304細胞、H-1869細胞
BT-B Adherent人膀胱癌細胞系
C-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC9細胞、JIMT細胞、GM-637細胞
H-1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI:SG-231細胞、JROECL 33細胞、BC-019細胞
RCC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM933細胞、NCI-SNU-423細胞、HEK 293-F細胞
RCC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM933細胞、NCI-SNU-423細胞、HEK 293-F細胞
MCF-12A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LSC-1細胞、SKHEP-1細胞、EB-2細胞
BNL CL.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TF1細胞、JURKAT E-6.1細胞、Colo-206F細胞
MDA-1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-0細胞、VMM-5A細胞、SK BR 03細胞
IPLB-SF-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Z-138細胞、COLO320 DM細胞、786O細胞
Sup T-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2 cl.D1細胞、MC116細胞、SK-MEL-MeWo細胞
DU4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP細胞、MT-4細胞、KTC1細胞
UACC-893細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGC27細胞、NCIH810細胞、NB19細胞
HEK293T/17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNSH細胞、University of Arizona Cell Culture-893細胞、SUM149PT細胞
BTI-Tn5B14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 281.T細胞、CNE2細胞、LNCaP-ATCC細胞
HeLa-S3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞、P3-X63-Ag8細胞、SW 579細胞
Melan-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC15細胞、HNE1細胞、HPAF-2細胞
F98細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-CAR細胞、YES 2細胞、YAC-1細胞
Pro-Lec1.3C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3 clone A31細胞、UACC 812細胞、NCI-H1770細胞
P30/Ohkubo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 433細胞、SUM 149細胞、CEM T4細胞
293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M-IE8細胞、JIII細胞、C8161細胞
SCC90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO.205細胞、U-373MG ATCC細胞、W256細胞
ROS-17/2.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA2B細胞、COLO 824細胞、GM03570E細胞
TK.10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa/DDP細胞、ECV-304細胞、TOV112細胞
Hs 695.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC6細胞、IBRS-2細胞、CHL-11細胞
BNL-HCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker 256細胞、Vero細胞、QGY細胞
HR1K細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 Cl 30-7b細胞、TM-4細胞、IB-RS2細胞
UPCI-SCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L M (TK-)細胞、Panc 1細胞、NCI.H460細胞
WM115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE1細胞、SN12PM6細胞、Jurkat FHCRC細胞
SKBr3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-281-T細胞、HFTF細胞、OAW 42細胞
MC3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-NS1/1-Ag4-1細胞、Panc 02細胞、COLO 201細胞
STO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1092細胞、WEHI3B細胞、H-146細胞
NCI-SNU-1040細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-2細胞、NIE 115細胞、H-1417細胞
SB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU8686細胞、KG-1細胞、Tu 177細胞
EFM192B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-394細胞、NCI-H2227細胞、Helacyton gartleri細胞
EB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP-M2細胞、CTLA4 Ig-24細胞、SUD6細胞
LAN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE細胞、SKG-IIIa細胞、Mac-1細胞
NCI-H1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE13細胞、HUT-226細胞、PCI:SG-231細胞
CHG5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2-M17細胞、OCI-Ly1細胞、UCLA-SO-M20細胞
HARAB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EA. hy 926細胞、Jurkat FHCRC細胞、FUOV1細胞
GM03569B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1819細胞、HCC1588細胞、MOLT 3細胞
HK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 10細胞、2E8細胞、H-4-II-E細胞
PaTu-8988s細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305-C細胞、EBC-1/original細胞、SCC154細胞
AMO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO-AS-45-1細胞、MHCC 97-L細胞、OPM2細胞
BT-B Adherent人膀胱癌細胞系
Pa14C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLD 1細胞、HL7702細胞、RPMI no. 8226細胞
HEK 293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs870T細胞、KYSE510細胞、PLA801-95C細胞
RAG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFTF細胞、OSRC2細胞、CD18細胞
DMS-53細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDEC細胞、Hs 695.T細胞、HL-7702細胞
KE-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs706T細胞、SUP-B1細胞、T47D:A細胞
RPMI no 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH82細胞、KYSE-450細胞、ARH77細胞
H-23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 363細胞、SK-N-BE(2C)細胞、NCI-H187細胞
NCI-H-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMDC細胞、HOS-TE85細胞、M619細胞
NK-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WPMY1細胞、CAL-62細胞、MDA-MB-361細胞
BEL7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Detroit562細胞、GM02219細胞、OSA細胞
SN4741細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb1.Lu細胞、NK10a細胞、ISHI細胞
Alexander細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF-21-AE細胞、G401細胞、ES2細胞
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