"MDBK Adherent牛腎細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí),棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細(xì)胞施加胰酶選擇,因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落,對腫瘤細(xì)胞來說,這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn),直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞!
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
MDBK Adherent牛腎細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個(gè)月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時(shí)體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因?yàn)闀枞^濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”,常會誤認(rèn)為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認(rèn)為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點(diǎn)應(yīng)不會影響細(xì)胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。
SW403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V-79細(xì)胞、no-11細(xì)胞、6T-CEM細(xì)胞
C-Lu-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT-167細(xì)胞、AU565細(xì)胞、RH7777細(xì)胞
MDAMB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUTZ-1細(xì)胞、PANC-08-13細(xì)胞、H128細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
OAC-P4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hut292細(xì)胞、Karpas 422細(xì)胞、AG06814-M細(xì)胞
bEnd3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-7細(xì)胞、T 98 G細(xì)胞、HEL9217細(xì)胞
SNK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1882細(xì)胞、NCI-H847細(xì)胞、Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
MDBK Adherent牛腎細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長不宜超過72小時(shí));2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。
8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-15細(xì)胞、H-1930細(xì)胞、NCI H295R細(xì)胞
Med 283細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeT5A細(xì)胞、CHO-Lec1細(xì)胞、MS751細(xì)胞
MH7A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOK細(xì)胞、BHP-10細(xì)胞、H1793細(xì)胞
rRTEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H596細(xì)胞、NCI-H1105細(xì)胞、MCF7ADR細(xì)胞
KYSE 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HR1細(xì)胞、EA.Hy926細(xì)胞、PCI-04B細(xì)胞
He-La細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1703細(xì)胞、J 82細(xì)胞、THP1細(xì)胞
RPMI7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)-C細(xì)胞、HT144細(xì)胞、TGW-nu細(xì)胞
B958細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774A.1細(xì)胞、C4-2 Bone metastatic細(xì)胞、NCI-H2195細(xì)胞
NTC-200細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-05.04細(xì)胞、MDAMB-231細(xì)胞、K7M2 wt細(xì)胞
786-O RCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMA 560細(xì)胞、Murine Carcinoma-38細(xì)胞、VK2/E6E7細(xì)胞
HKF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-157細(xì)胞、OV1063細(xì)胞、NCIH520細(xì)胞
NCIH1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST 486細(xì)胞、CT26.WT細(xì)胞、H-1299細(xì)胞
SUDHL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-Swiss albino細(xì)胞、MPC-11細(xì)胞、GM0637細(xì)胞
MDBK Adherent牛腎細(xì)胞系
H87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-ATCC細(xì)胞、HEK293F細(xì)胞、RC-2細(xì)胞
Lieming Xu-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC細(xì)胞、H810細(xì)胞、U251n細(xì)胞
M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB-1細(xì)胞、COLO-320細(xì)胞、MDA-MB-435S細(xì)胞
CCLP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW-039細(xì)胞、CORL51細(xì)胞、A20細(xì)胞
APRE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuTu-80細(xì)胞、RAW2647細(xì)胞、OCI-LY-1細(xì)胞
TF-1a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas299細(xì)胞、KYSE-140細(xì)胞、S37細(xì)胞
ARH 77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC-14細(xì)胞、MDA-453細(xì)胞、HET1A細(xì)胞
H196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-2664細(xì)胞、HcaF細(xì)胞、GM01232細(xì)胞
PCI:SG231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC-1469細(xì)胞、NCI747細(xì)胞、A10細(xì)胞
NCI-H498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE1-hTERT細(xì)胞、B16 subline B78細(xì)胞、22Rv-1細(xì)胞
YD-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ketr3細(xì)胞、NSC34細(xì)胞、Panc-10.05細(xì)胞
LP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE520細(xì)胞、Colon26細(xì)胞、HIBEC細(xì)胞
HFSF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:526-mel細(xì)胞、C4-I細(xì)胞、TE15細(xì)胞
FTC-133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-C1細(xì)胞、SNU-251細(xì)胞、NSC34細(xì)胞
OAW42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAC細(xì)胞、M210B4細(xì)胞、MDA-MB-175-VII細(xì)胞
NS1-Ag 4/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Meat Animal Research Center-145細(xì)胞、AMO-1細(xì)胞、ESC細(xì)胞
A-549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB468細(xì)胞、HCC1937細(xì)胞、P30-OHK細(xì)胞
SNUC2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu 8988 S細(xì)胞、H-727細(xì)胞、C-28/I2細(xì)胞
MC-CAR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSH細(xì)胞、SKLU1細(xì)胞、BE2M17細(xì)胞
HKC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-982細(xì)胞、PL9細(xì)胞、BL1339細(xì)胞
HCC0366細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF/Adr細(xì)胞、RN-c細(xì)胞、NTC200細(xì)胞
Hi5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JC細(xì)胞、SKCO1細(xì)胞、CEMx721.174.T2細(xì)胞
MB-49細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT29細(xì)胞、KOPN-8細(xì)胞、UC-3細(xì)胞
Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTC-1細(xì)胞、COV-362細(xì)胞、EAhy 926細(xì)胞
L78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L929(NCTC)細(xì)胞、HEC-151細(xì)胞、MCF-12F細(xì)胞
MCF-7/AdrR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI no 8226細(xì)胞、NCIH28細(xì)胞、HBE135-E6E7細(xì)胞
KU.812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J-774A.1細(xì)胞、Hi-five細(xì)胞、HEK-293-H細(xì)胞
MUTZ-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1915細(xì)胞、NCIH1734細(xì)胞、DV-90細(xì)胞
3AA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞、LN299細(xì)胞、F9細(xì)胞
CCLP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW-039細(xì)胞、CORL51細(xì)胞、A20細(xì)胞
BTT739細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-937細(xì)胞、H1869細(xì)胞、My-La 2059細(xì)胞
A-875細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA-433細(xì)胞、Helacyton gartleri細(xì)胞、MIA Paca2細(xì)胞
J111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH650細(xì)胞、Hs819T細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞
DC 2.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:526細(xì)胞、HFLS-OA細(xì)胞、NBL-S細(xì)胞
HT 1376.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U138細(xì)胞、hADSCs細(xì)胞、OVCA432細(xì)胞
LA-N-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP-62細(xì)胞、B16F10細(xì)胞、CHG-5細(xì)胞
IEC 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H865細(xì)胞、H4細(xì)胞、Hs 606.T細(xì)胞
HS-766-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuCCT-1細(xì)胞、COLO 394細(xì)胞、ONS-76細(xì)胞
Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87 MG細(xì)胞、LAN-1細(xì)胞、MeT 5A細(xì)胞
DoHH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSCs(mUCMSCs)細(xì)胞、Lung cancer-1/squamous細(xì)胞、RAW264.7細(xì)胞
C-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-878細(xì)胞、NS-1-Ag4-1細(xì)胞、J-774A.1細(xì)胞
KMS18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS20-Y細(xì)胞、UCLA NPA-87-1細(xì)胞、JHH-7細(xì)胞
MDBK Adherent牛腎細(xì)胞系
H-1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUCEC細(xì)胞、RCSMC細(xì)胞、SkChA-1細(xì)胞
T 84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SACC83細(xì)胞、Strain L-929細(xì)胞、BCP1細(xì)胞
MM134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H526細(xì)胞、SKOV-433細(xì)胞、KFB細(xì)胞
EC-109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRIF細(xì)胞、P3-X63Ag8.653細(xì)胞、SUDHL-1細(xì)胞
159 PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T2細(xì)胞、H526細(xì)胞、HCC1937細(xì)胞
HL 60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 948細(xì)胞、B-104細(xì)胞、RERFLCMS細(xì)胞
MA-782細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKT細(xì)胞、AR41P細(xì)胞、UCLA SO M14細(xì)胞
H-2291細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 4細(xì)胞、BCaP-37細(xì)胞、HeLa/DDP細(xì)胞
Malme3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1993細(xì)胞、MDCK2細(xì)胞、HEP3B2細(xì)胞
Hs729T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIHOVCAR3細(xì)胞、Tregs細(xì)胞、NCIH3255細(xì)胞
Hs-343-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL83B細(xì)胞、NWA細(xì)胞、UPCI-SCC-90細(xì)胞
MH7A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOK細(xì)胞、Rat 1細(xì)胞、kms 11細(xì)胞
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