"MDBK Adherent牛腎細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞!
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
MDBK Adherent牛腎細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。
SW403細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V-79細胞、no-11細胞、6T-CEM細胞
C-Lu-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT-167細胞、AU565細胞、RH7777細胞
MDAMB231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUTZ-1細胞、PANC-08-13細胞、H128細胞
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
OAC-P4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hut292細胞、Karpas 422細胞、AG06814-M細胞
bEnd3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-7細胞、T 98 G細胞、HEL9217細胞
SNK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1882細胞、NCI-H847細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞
細胞生長特性:貼壁生長
MDBK Adherent牛腎細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-15細胞、H-1930細胞、NCI H295R細胞
Med 283細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeT5A細胞、CHO-Lec1細胞、MS751細胞
MH7A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOK細胞、BHP-10細胞、H1793細胞
rRTEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H596細胞、NCI-H1105細胞、MCF7ADR細胞
KYSE 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HR1細胞、EA.Hy926細胞、PCI-04B細胞
He-La細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1703細胞、J 82細胞、THP1細胞
RPMI7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)-C細胞、HT144細胞、TGW-nu細胞
B958細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774A.1細胞、C4-2 Bone metastatic細胞、NCI-H2195細胞
NTC-200細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-05.04細胞、MDAMB-231細胞、K7M2 wt細胞
786-O RCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMA 560細胞、Murine Carcinoma-38細胞、VK2/E6E7細胞
HKF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-157細胞、OV1063細胞、NCIH520細胞
NCIH1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST 486細胞、CT26.WT細胞、H-1299細胞
SUDHL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-Swiss albino細胞、MPC-11細胞、GM0637細胞
MDBK Adherent牛腎細胞系
H87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-ATCC細胞、HEK293F細胞、RC-2細胞
Lieming Xu-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC細胞、H810細胞、U251n細胞
M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB-1細胞、COLO-320細胞、MDA-MB-435S細胞
CCLP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW-039細胞、CORL51細胞、A20細胞
APRE-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuTu-80細胞、RAW2647細胞、OCI-LY-1細胞
TF-1a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas299細胞、KYSE-140細胞、S37細胞
ARH 77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC-14細胞、MDA-453細胞、HET1A細胞
H196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-2664細胞、HcaF細胞、GM01232細胞
PCI:SG231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC-1469細胞、NCI747細胞、A10細胞
NCI-H498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE1-hTERT細胞、B16 subline B78細胞、22Rv-1細胞
YD-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ketr3細胞、NSC34細胞、Panc-10.05細胞
LP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE520細胞、Colon26細胞、HIBEC細胞
HFSF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:526-mel細胞、C4-I細胞、TE15細胞
FTC-133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-C1細胞、SNU-251細胞、NSC34細胞
OAW42細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAC細胞、M210B4細胞、MDA-MB-175-VII細胞
NS1-Ag 4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Meat Animal Research Center-145細胞、AMO-1細胞、ESC細胞
A-549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB468細胞、HCC1937細胞、P30-OHK細胞
SNUC2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu 8988 S細胞、H-727細胞、C-28/I2細胞
MC-CAR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSH細胞、SKLU1細胞、BE2M17細胞
HKC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-982細胞、PL9細胞、BL1339細胞
HCC0366細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF/Adr細胞、RN-c細胞、NTC200細胞
Hi5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JC細胞、SKCO1細胞、CEMx721.174.T2細胞
MB-49細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT29細胞、KOPN-8細胞、UC-3細胞
Alpha Mouse Liver 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTC-1細胞、COV-362細胞、EAhy 926細胞
L78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L929(NCTC)細胞、HEC-151細胞、MCF-12F細胞
MCF-7/AdrR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI no 8226細胞、NCIH28細胞、HBE135-E6E7細胞
KU.812細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J-774A.1細胞、Hi-five細胞、HEK-293-H細胞
MUTZ-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1915細胞、NCIH1734細胞、DV-90細胞
3AA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、LN299細胞、F9細胞
CCLP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW-039細胞、CORL51細胞、A20細胞
BTT739細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-937細胞、H1869細胞、My-La 2059細胞
A-875細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA-433細胞、Helacyton gartleri細胞、MIA Paca2細胞
J111細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH650細胞、Hs819T細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞
DC 2.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:526細胞、HFLS-OA細胞、NBL-S細胞
HT 1376.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U138細胞、hADSCs細胞、OVCA432細胞
LA-N-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP-62細胞、B16F10細胞、CHG-5細胞
IEC 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H865細胞、H4細胞、Hs 606.T細胞
HS-766-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuCCT-1細胞、COLO 394細胞、ONS-76細胞
Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87 MG細胞、LAN-1細胞、MeT 5A細胞
DoHH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSCs(mUCMSCs)細胞、Lung cancer-1/squamous細胞、RAW264.7細胞
C-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-878細胞、NS-1-Ag4-1細胞、J-774A.1細胞
KMS18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS20-Y細胞、UCLA NPA-87-1細胞、JHH-7細胞
MDBK Adherent牛腎細胞系
H-1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUCEC細胞、RCSMC細胞、SkChA-1細胞
T 84細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SACC83細胞、Strain L-929細胞、BCP1細胞
MM134細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H526細胞、SKOV-433細胞、KFB細胞
EC-109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRIF細胞、P3-X63Ag8.653細胞、SUDHL-1細胞
159 PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T2細胞、H526細胞、HCC1937細胞
HL 60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 948細胞、B-104細胞、RERFLCMS細胞
MA-782細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKT細胞、AR41P細胞、UCLA SO M14細胞
H-2291細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 4細胞、BCaP-37細胞、HeLa/DDP細胞
Malme3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1993細胞、MDCK2細胞、HEP3B2細胞
Hs729T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIHOVCAR3細胞、Tregs細胞、NCIH3255細胞
Hs-343-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL83B細胞、NWA細胞、UPCI-SCC-90細胞
MH7A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOK細胞、Rat 1細胞、kms 11細胞
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