"MDCK Adherent犬腎細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
MDCK Adherent犬腎細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
NCIH378細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320-DM細胞、COS-7細胞、EC9706細胞
MKN28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV112細胞、D324細胞、SKLU1細胞
CA-OV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT T15細胞、VK2 (E6/E7)細胞、L6565細胞
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
THP-1(ATCC)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J.E6-1細胞、BLO-11細胞、Vero 76細胞
Fetal Human Colon細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04154細胞、PBMC細胞、SR786細胞
Capan-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1341細胞、NOR 10細胞、NG10815細胞
細胞生長特性：貼壁生長
MDCK Adherent犬腎細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
HFF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAEC細胞、HuH 6細胞、P3.653細胞
CCRF/CEM/0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9c2(2-1)細胞、HCC-1419細胞、H661細胞
EBC-1/original細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caki-2細胞、ACC-3細胞、AN-3細胞
DoTc2 4510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO201細胞、SACC-83細胞、T-47-D細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 294T細胞、U-118MG細胞、HNE-1細胞
K7M2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03569D細胞、Pro-Lec1.3C細胞、NCI-H1092細胞
H-64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-80細胞、RDES細胞、HPASMC細胞
NCI-HUT-292細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2291細胞、H322T細胞、SUDHL4細胞
CCC-ESF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1781細胞、Namalwa細胞、MB231細胞
JB6Cl30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLO-Y4細胞、H661細胞、DHL4細胞
MCF.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNEP1細胞、HCEC細胞、AGS細胞
OEC33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR-75-1細胞、HPF細胞、Wien133細胞
D407 RPE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H508細胞、SuDHL 10細胞、GM05384細胞
MDCK Adherent犬腎細胞系
MDBK (NBL-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H378細胞、RIN-m細胞、COR-L23/P細胞
NRK clone 49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H322T細胞、OVCA-420細胞、OE21細胞
GCT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL-3A細胞、M1細胞、EFM-192B細胞
GCT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL-3A細胞、M1細胞、EFM-192B細胞
Epithelioma Papulosum Cyprini細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOMA細胞、McCoy B細胞、MES-SA Dx5細胞
Caco 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEM-L細胞、hSCC-25細胞、FRO細胞
H-2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Japanese Tissue Culture-39細胞、SBC-5細胞、C4 I細胞
SLK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-52-PE細胞、SK_N_BE2C細胞、CAMA細胞
OCI-LY-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 445細胞、L6細胞、SMMC7721細胞
SW-948細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1573細胞、CL-34細胞、SKG-3a細胞
NCI-H187細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCK8細胞、Y 1細胞、HEK-293H細胞
L2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D562細胞、TALL-104細胞、NPC-TW 039細胞
SNU182細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266細胞、CC-LP-1細胞、hTERT-RPE1細胞
LC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAa細胞、EA. hy 926細胞、AN3 CA細胞
BJ1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、T241細胞、NCI-H510A細胞
A204細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT 102細胞、KY-270細胞、TK10細胞
L-02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4IIE細胞、H-2330細胞、ECC 12細胞
BE(2)M-17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 AG8-653細胞、GM00637B細胞、50.B1細胞
CZ-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST細胞、EFO-27細胞、HMC細胞
GM02131細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC-3960細胞、Rat Fetal Lung-6細胞、LICR-HN6細胞
MCF/Adr細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE(2)M-17細胞、BEL-7404細胞、CCC-ESF-1細胞
Co-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN Cl-5F細胞、HCT-FET細胞、MDAMB415細胞
SCC 25細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1650細胞、hESC細胞、PAN 02細胞
Pa16C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：F9細胞、Panc02-H0細胞、HO-8910 PM細胞
MIA-Pa-Ca-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：451-LU細胞、JEG-3細胞、Panc 08.13細胞
RPMI 1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMC-HN8細胞、CMT64細胞、TE85細胞
CATH.a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC 12細胞、NCIADRRES細胞、SUP-M2細胞
IEC 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H865細胞、H4細胞、Hs 606.T細胞
WEHI-164細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC 3細胞、3T3(A31)細胞、PC-3M-1E8細胞
HCT 116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1694細胞、MOLT-16細胞、Metastatic Variant-522細胞
A-101D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-3細胞、FRTL-5 Cl 2細胞、TE-15細胞
HCC1806細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA420細胞、GM03569細胞、COV-434細胞
kms 11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hopkins-92細胞、293-EBNA1細胞、H-1155細胞
159PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2122細胞、SuDHL 8細胞、CCD-1112sk細胞
ECC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 Swiss Albino細胞、Neuro2a細胞、H2126細胞
BI-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KHYG-1細胞、SkChA1細胞、SW.620細胞
Hs 683細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RDES細胞、Hs606細胞、HuH-6細胞
U138細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ-1細胞、SW-1353細胞、EC-9706細胞
HCC 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC1469細胞、Ku812細胞、NCI-H2171細胞
EL 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178Y細胞、Hs 294T細胞、HuH-28細胞
LYR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL6細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞、HSC6細胞
L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC-12細胞、HCC2108細胞、CHP 100細胞
MDCK Adherent犬腎細胞系
HUT 226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2185細胞、HCoEpiC細胞、CMT 167細胞
MB157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-1細胞、18G3.cl 1細胞、SK-ChA-1細胞
LC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1836細胞、JB6 clone 30, subclone 7b細胞、CO115細胞
beta TC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI1788細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞、STTG1細胞
N-2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL16細胞、B16-BL6細胞、NCI.H226細胞
TE-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-79細胞、MCF/Adr細胞、ECC10細胞
HCASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NR-8383細胞、J-774細胞、MA-104細胞
COLO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 766T細胞、OACP4 C細胞、Hs-675-T細胞
CHP 126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-23細胞、OVCAR.3細胞、Cates-1B細胞
COLO-205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1105細胞、Huh7.5細胞、NeHepLxHT細胞
MNNG/HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2195細胞、MGH-U3細胞、RCC_7860細胞
EBC-1/original細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caki-2細胞、FRTL5細胞、HO8910/PM細胞
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