"NCI-H2052 Adherent人惡性胸膜間皮瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng)：細(xì)胞凍存好了，接下來(lái)要注意什么問(wèn)題呢？沒(méi)錯(cuò)，就是記得到時(shí)間了，拿出來(lái)復(fù)蘇。那么，細(xì)胞復(fù)蘇的過(guò)程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢？細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬(wàn)不要使用不健康的細(xì)胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長(zhǎng)行為。凍存細(xì)胞：補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開(kāi)始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長(zhǎng)至７０%單層時(shí)收獲細(xì)胞，計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類(lèi)型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞，有不同類(lèi)型的凍存液，根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)２４小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類(lèi)型，日期，凍存人等信息，并保證每?jī)龃婀懿怀^(guò)１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒(méi)有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個(gè)最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞，以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問(wèn)題！細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點(diǎn)：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí)，有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要；其實(shí)，細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)，不過(guò)這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié)，不然，也不一定會(huì)盡如人意。例如說(shuō)，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護(hù)目鏡；盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
NCI-H2052 Adherent人惡性胸膜間皮瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗(yàn)分享：支原體是一類(lèi)缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長(zhǎng)，營(yíng)養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個(gè)世界性問(wèn)題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá)，又不能通過(guò)可視法對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，而且它對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)率影響較小，不易引起注意。國(guó)內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無(wú)膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見(jiàn)的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細(xì)胞的支原體種類(lèi)是很多的，國(guó)外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞，有的細(xì)胞株可以同時(shí)污染兩種以上的支原體。支原體污染的來(lái)源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來(lái)的污染和用來(lái)制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個(gè)方面來(lái)預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作；細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無(wú)菌；在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后，特別是重要的細(xì)胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒(méi)有細(xì)胞壁，一般來(lái)講，對(duì)作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素，如萬(wàn)古霉素等完全不敏感；對(duì)多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對(duì)支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類(lèi)、大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)及一些喹諾酮;其他類(lèi)抗生素如基糖苷類(lèi)、霉素對(duì)支原體有較小抑制作用，所以常不用來(lái)作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
H1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 2細(xì)胞、NRK clone 49F細(xì)胞、D6P2T細(xì)胞
THLE-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human podocyte細(xì)胞、SKMES細(xì)胞、95D細(xì)胞
Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jeko1細(xì)胞、hEM15A細(xì)胞、Ca 9-22細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：３-１：６傳代
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
RPE1-hTERT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1993細(xì)胞、FRTL 5細(xì)胞、A2780S細(xì)胞
ROS17/28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞、MC57G細(xì)胞、IGROV-1細(xì)胞
GTL 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FO [Mouse myeloma]細(xì)胞、UPCISCC154細(xì)胞、MDAMB436細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
NCI-H2052 Adherent人惡性胸膜間皮瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞
常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中一些問(wèn)題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過(guò)２０%，因?yàn)楹窟^(guò)低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不足，過(guò)高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時(shí)須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間，按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換；３)購(gòu)買(mǎi)的復(fù)蘇細(xì)胞，為何會(huì)有脫落？因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中不可避免的會(huì)有震蕩，收到后可以離心收集；４)購(gòu)買(mǎi)的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購(gòu)買(mǎi)的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見(jiàn)原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí)，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
alphaTC1 Clone 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF.CEM細(xì)胞、HBE135-E6E7細(xì)胞、ZR-75-1細(xì)胞
HPF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2B4-L細(xì)胞、SVHUC細(xì)胞、Hepatoma-22細(xì)胞
HTR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2330細(xì)胞、MDA-157細(xì)胞、V 79細(xì)胞
Hs 611.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞、P3/X63-Ag8細(xì)胞、HPAF/CD18細(xì)胞
NCIH1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-10A細(xì)胞、Hs 683細(xì)胞、A-172MG細(xì)胞
R 1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：E0771細(xì)胞、PA1細(xì)胞、MLE12細(xì)胞
TE-85 clone 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE6細(xì)胞、MRC-5細(xì)胞、FT-293細(xì)胞
COLO320HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2110細(xì)胞、SuDHL 4細(xì)胞、H2073細(xì)胞
HEK-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos 2G6.4C10細(xì)胞、OCI-Ly19細(xì)胞、NPA'87細(xì)胞
MES-SA/Dx-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS1細(xì)胞、HEK 293T/17細(xì)胞、HSCT6細(xì)胞
MPP 89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY180細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、INS1細(xì)胞
PC12(高分化)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Oregon J-111細(xì)胞、HO-1-N-1細(xì)胞、PC3細(xì)胞
H-1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2 Secreting細(xì)胞、H125細(xì)胞、Bat lung細(xì)胞
NCI-H2052 Adherent人惡性胸膜間皮瘤細(xì)胞系
TE-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wien-133細(xì)胞、Daudi細(xì)胞、Wien 133細(xì)胞
HIEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 600.T細(xì)胞、DoHH-2細(xì)胞、CCRF.CEM細(xì)胞
Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-138-MG細(xì)胞、MDA-MB157細(xì)胞、Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞
Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-138-MG細(xì)胞、MDA-MB157細(xì)胞、Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞
SN12-PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc08.13細(xì)胞、CNE-1細(xì)胞、108CC15細(xì)胞
TM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRCEC細(xì)胞、NS653細(xì)胞、HSC-1細(xì)胞
C8161細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1238細(xì)胞、H196細(xì)胞、FO [Mouse myeloma]細(xì)胞
KRC-Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞、EAC細(xì)胞、Y3M細(xì)胞
HCC9724細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIU87細(xì)胞、MRAEC細(xì)胞、T-47D細(xì)胞
C8D1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1930細(xì)胞、HELA-GFP細(xì)胞、Dunn LM8細(xì)胞
NCI-SNU-182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIC細(xì)胞、WEHI-231細(xì)胞、PNT1/A細(xì)胞
Ramos-2G6-4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT 549細(xì)胞、PANC0327細(xì)胞、COS7細(xì)胞
HeLa/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320細(xì)胞、KATO 3細(xì)胞、L-6 myoblast細(xì)胞
CCD966SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-150細(xì)胞、Hs821T細(xì)胞、YD38細(xì)胞
NRK49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN4741細(xì)胞、GM04678細(xì)胞、3T3-L1 ad細(xì)胞
UCH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBZY1細(xì)胞、H-650細(xì)胞、P3J HR1-K細(xì)胞
HT 1197細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RFL 6細(xì)胞、HEK293-FT細(xì)胞、IALM細(xì)胞
Farage OL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F-36P細(xì)胞、SK-RC 52細(xì)胞、SK-MEL5細(xì)胞
CWR22R-V1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE-SRA-01/04細(xì)胞、NG-108-15細(xì)胞、CAL12T細(xì)胞
ssMCF7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mc Coy細(xì)胞、NCI-H2106細(xì)胞、BEL/FU細(xì)胞
Hs 852.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IR 983F細(xì)胞、HS852.T細(xì)胞、NTC-200細(xì)胞
RKO-E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RetroPack PT67細(xì)胞、HMEL細(xì)胞、SF126細(xì)胞
IMCD-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2009細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞、LIM 1215細(xì)胞
MKN-45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHSY-5Y細(xì)胞、HPB/ALL細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞
Pro-5WgaRI3C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-423細(xì)胞、NCIH69細(xì)胞、Hs 934.T細(xì)胞
RCC10 RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1187細(xì)胞、HEC-1B細(xì)胞、Rat Skin 1細(xì)胞
RPMI no 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH82細(xì)胞、KYSE-450細(xì)胞、ARH77細(xì)胞
BeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-5細(xì)胞、TE-3A細(xì)胞、UM-UC-3細(xì)胞
RASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly8細(xì)胞、TPC-1細(xì)胞、WSU-DLCL-2細(xì)胞
IFRS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-423細(xì)胞、GM06141細(xì)胞、TE13細(xì)胞
OCI-LY-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-251細(xì)胞、SK-ES-1細(xì)胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞
MHCC97L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSADX5細(xì)胞、COLO 741細(xì)胞、CEM-C7細(xì)胞
ZR75-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSB-1細(xì)胞、SF126細(xì)胞、Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞
ANA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBE4細(xì)胞、Rat 2細(xì)胞、NCI-460細(xì)胞
HCC2157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR-32細(xì)胞、Panc10.05細(xì)胞、OV433細(xì)胞
SW1088細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63NS1細(xì)胞、SUDHL-2細(xì)胞、SW-1573細(xì)胞
HCS2/8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUSM-1細(xì)胞、CHP126細(xì)胞、H-2227細(xì)胞
Calu6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ra #1細(xì)胞、RPMI8402細(xì)胞、HEK-A細(xì)胞
HCC-94細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE D407細(xì)胞、8226/S細(xì)胞、H2081細(xì)胞
L5178Y-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：mIMCD3細(xì)胞、RT-BM細(xì)胞、HK2細(xì)胞
Normal fibroblast-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：58F細(xì)胞、PNT1A細(xì)胞、JVM-2細(xì)胞
OCI-Ly8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL5細(xì)胞、LCMS細(xì)胞、NCI-H69細(xì)胞
NCI-H2052 Adherent人惡性胸膜間皮瘤細(xì)胞系
H1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Opossum Kidney細(xì)胞、SUP-T1細(xì)胞、JEKO細(xì)胞
3T3-Swiss albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC/TERT1細(xì)胞、SVG(P12)細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞
BrCL15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep II細(xì)胞、Cates 1B細(xì)胞、P388-D1細(xì)胞
SUDHL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LP-1細(xì)胞、SK-N-BE-2細(xì)胞、8226細(xì)胞
MES 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA38細(xì)胞、HLEB-3細(xì)胞、SUM 149PT細(xì)胞
H69C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H522細(xì)胞、MEF (CF-1)細(xì)胞、Jurkat E6-1細(xì)胞
MALME 3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A204細(xì)胞、HaCaT細(xì)胞、MDCK II細(xì)胞
HEK 293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CBRH7919細(xì)胞、HBE細(xì)胞、IAR 20細(xì)胞
Duke University 145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M619細(xì)胞、D-283 Med細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞
Co 205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs1.Tes細(xì)胞、MOLM-16細(xì)胞、H-EMC-SS細(xì)胞
AHH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOTO細(xì)胞、Jurkat-FHCRC細(xì)胞、RD-2細(xì)胞
HTR8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH2細(xì)胞、SGC-7901細(xì)胞、NIH3T3細(xì)胞
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