"ECC12 Adherent人子宮內(nèi)膜癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
ECC12 Adherent人子宮內(nèi)膜癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞復(fù)蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴(yán)，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細胞實驗室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細胞回溫至３７°C，并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中，或細胞已長滿盤，則將細胞做傳代培養(yǎng)。
F9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、NCI-H2052細胞、A-1847細胞
C28/I2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO/dhFr-細胞、Hos TE-85細胞、526 mel細胞
C 643細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW 01細胞、HTh74細胞、MDA-453細胞
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Okayama University Medical School-27細胞、H929細胞、SW480E細胞
FRTL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-675-T細胞、P3X63Ag8.653細胞、SO-RB50細胞
GM03573A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 5.04細胞、NOMO1細胞、LLC-PK1細胞
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
ECC12 Adherent人子宮內(nèi)膜癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
TC-1 [Mouse lung]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 274細胞、HuH-28細胞、NCIH2023細胞
BC3H1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T9細胞、OC 316細胞、NS-20Y細胞
32Dc3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-M(TK-)細胞、BMSCs（mBMSCs）細胞、BE(2)M-17細胞
SUM-159PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs683細胞、OCI-LY-3細胞、LC2/Ad細胞
LoMeT-ccRcc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RASMCs細胞、EoL-1細胞、OVCAR.5細胞
MDA MB 134VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE410細胞、DHL-4細胞、PK-136細胞
SW1222細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRA 19細胞、Normal Rat Kidney-49F細胞、HCC941122細胞
P30OHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat-2細胞、H-4-II-E細胞、SK-MEL-5細胞
HcerEpic細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-596細胞、Hepa1-6細胞、hUC-MSC細胞
EJ-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Functional Liver Cell-7細胞、FHCRC subclone 11細胞、Cor L88細胞
NP-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-4-II-E細胞、Huh7.5細胞、NCIH1105細胞
MFE280細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC1細胞、MG-63細胞、BaF3細胞
SW-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B35細胞、RH35細胞、MCF-7B細胞
ECC12 Adherent人子宮內(nèi)膜癌細胞系
MFM-223細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLU-1細胞、KM12-SM細胞、P3X63Ag8-6-5-3細胞
SK-MEL24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV 1細胞、EFM192B細胞、COLO-1細胞
GalK 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、HEB細胞、WiDr細胞
GalK 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、HEB細胞、WiDr細胞
HPAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero細胞、FBHE細胞、SK-SH-SY5Y細胞
NHDF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 33細胞、UCLA-SO-M21細胞、D341 Med細胞
ST486細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GalK1細胞、BNCL-2細胞、CHP100細胞
MC3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-NS1/1-Ag4-1細胞、Panc 02細胞、COLO 201細胞
KYSE0520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caki-1細胞、RM-1細胞、S16細胞
ONS-76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3D4/21細胞、SC細胞、KRC Y細胞
G-361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118MG細胞、U-87MG細胞、HCMEC細胞
OSA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHIN3細胞、SUDHL-4細胞、OCI-Ly07細胞
HCC2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNCL2細胞、MXI細胞、SW1783細胞
H-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLC-82細胞、RT-4細胞、B16F0細胞
MMQ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Potorous tridactylus Kidney 2細胞、PANC0504細胞、EBTr (NBL-4)細胞
J 111細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2030細胞、MRMT-1細胞、L929細胞
CCRF-CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-601細胞、ZR-75-1細胞、OCLY8細胞
TE-671細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM8細胞、P3/NS1/Ag4-1細胞、ROS 17/28細胞
DU 145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Human Lens-124細胞、McA-RH 8994細胞、U118-MG細胞
EOC20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV-434細胞、AgC11x3A細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞
L5178YR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D10細胞、L M (TK-)細胞、NCIH748細胞
Sp 2817細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI1846細胞、OUMS27細胞、NCI-BL6細胞
H-2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A253細胞、VCaP細胞、Be Wo細胞
Evsa-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9S1細胞、C42細胞、NCI-H1703細胞
KTCTL140細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2009細胞、Evsa-T細胞、COLO 678細胞
GB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 680N細胞、HL1細胞、rUCMSCs細胞
Adeno 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-824細胞、Hep-G2/C3A細胞、HCAEC細胞
3T3-L1 ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-283 Med細胞、Hs 819.T細胞、H2009細胞
H-4-II-E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8505C細胞、SNUC2A細胞、U-373-MG細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：95D細胞、Hs 940.T細胞、UACC812細胞
NCI-H1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MARC 145細胞、RCK8細胞、Hs888Lu細胞
LAD-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293FT細胞、PLC-PRF-5細胞、TB1 Lu細胞
Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251細胞、SNU1040細胞、MLFC細胞
HNE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOPN-8細胞、CL1.0細胞、Hepa 1-6細胞
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B10BR細胞、C-33A細胞、HuH 6細胞
PLA801-95D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJSA細胞、Panc05.04細胞、MPC 11細胞
RBL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS79細胞、NIH-OVCAR-3細胞、HeLa S-3細胞
MT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAC細胞、PANC0813細胞、BBE細胞
Anip973細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WI-38細胞、COLO-320-DM細胞、MDCKII細胞
Mink Lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1915細胞、HCC-44細胞、LNCaP clone FGC細胞
P3HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CA-OV-3細胞、REC 1細胞、KMS11細胞
H-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV522細胞、EOC20細胞、RBL 1細胞
ECC12 Adherent人子宮內(nèi)膜癌細胞系
DKMG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NR8383.1細胞、ECC 12細胞、Hs821T細胞
MDA-MB157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hUC-MSC細胞、CZ-1細胞、SUM-102細胞
H1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVSAHO細胞、LC-2-Ad細胞、SkChA1細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375SM細胞、RL-95-2細胞、IB-RS-2細胞
CEMC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDLF細胞、Jijoye細胞、H.Ep. #2細胞
BALB/3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-ori細胞、RC-2細胞、LS-174細胞
Hs 281.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-320-DM細胞、NCM460細胞、ARH-77細胞
Sp2/0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1623細胞、LS180細胞、NCIH187細胞
U138MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT3細胞、Y3.AG.1.2.3細胞、MSTO-211 H細胞
D283 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：253JB-V細胞、LC-2/ad細胞、MNNG/HOS Clone F-5細胞
CF-1 MEF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-62細胞、PK-13細胞、H1793細胞
32Dc3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-M(TK-)細胞、C22細胞、H-2029細胞
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