"SNU-878 Adherent人肝癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SNU-878 Adherent人肝癌細胞系
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結凍時體積會增加約10%,必須預留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質,應立即停用,更換另一批號的血清。
BNCL2細胞系相關產品:H647細胞、IGR.OV1細胞、U-251_MG細胞
TCC-SUP細胞系相關產品:NTERA-2/D1細胞、COLO824細胞、SK-RC-20細胞
ATDC5細胞系相關產品:L23/P細胞、RGC-6細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
SKMEL-31細胞系相關產品:NOMO1細胞、EST81細胞、b.End3細胞
MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞系相關產品:SHP-77細胞、JF305細胞、SKMEL28細胞
MFD-1細胞系相關產品:LAPC-4細胞、JHH-7細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
SNU-878 Adherent人肝癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結:1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當地溫度,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
HCC-1954細胞系相關產品:CMECs細胞、P3-X63Ag8細胞、EST50細胞
P3X63 Ag8.653細胞系相關產品:Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞、HHL-5細胞、MDA231-LM2-4175細胞
H2172細胞系相關產品:alphaTC clone 6細胞、Med 341細胞、MKN74細胞
UC-3細胞系相關產品:HCFB(HCF)細胞、NCIH650細胞、DH-82細胞
A375-S2細胞系相關產品:Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、SU-DHL-16細胞、C8166細胞
WEHI-3細胞系相關產品:BERH-2細胞、PC-12細胞、SKGT4細胞
Medical University of Graz-Chordoma 1細胞系相關產品:HEH2細胞、CA46細胞、B95-8細胞
NCI-H1648細胞系相關產品:CT26-clone 25細胞、UPCI:SCC154細胞、MSTO-211H細胞
MESSA細胞系相關產品:M109細胞、KYSE-70細胞、L1210細胞
HLFa細胞系相關產品:H1563細胞、SNU-398細胞、H2196細胞
Hs 870.T細胞系相關產品:RPVSMC細胞、MRC5細胞、KYSE510細胞
OSKM-1細胞系相關產品:CMEC/D3細胞、Hs 839.T細胞、CCD-841-CoTr細胞
Line 870 Emory University-4細胞系相關產品:CCD841CoTr細胞、U343細胞、Wien-133細胞
SNU-878 Adherent人肝癌細胞系
PY8119細胞系相關產品:Lu-165細胞、LN382細胞、BC-022細胞
MCF12F細胞系相關產品:hs 68細胞、MGc80-3細胞、TM4細胞
KM12細胞系相關產品:Farage Original Line細胞、NCI-H165細胞、SW-839細胞
McG-1細胞系相關產品:Y3.AG.1.2.3細胞、HPDEC細胞、ECV-304細胞
Anip[973]細胞系相關產品:B16BL6細胞、WTRL1細胞、293-EBNA細胞
RIN-m5F細胞系相關產品:NCIN87細胞、CCC-HHM-2細胞、639V細胞
A-2058細胞系相關產品:U-2-OS細胞、MC-3T3細胞、PK15細胞
DR2R1610細胞系相關產品:253J細胞、50.B1細胞、Tregs細胞
MDAPCa2b細胞系相關產品:TE3細胞、JM1細胞、Lieming Xu-2細胞
M059J細胞系相關產品:Reuber-H-35 hepatoma細胞、RPE D407細胞、CFSC-8B細胞
Molm 13細胞系相關產品:NTERA2-cloneD1細胞、PNT1/A細胞、SK-NSH細胞
MDA MB 453細胞系相關產品:M-G63細胞、T47D:A細胞、C32-mel細胞
Hs 729.T細胞系相關產品:H-820細胞、KYSE-50細胞、WM115mel細胞
COR-L51細胞系相關產品:C26細胞、MC/9細胞、LM8細胞
Buffalo Rat Liver-3A細胞系相關產品:VMRCLCD細胞、Hs940.T細胞、Verda reno細胞
MIA Paca2細胞系相關產品:HUT-28細胞、rRTEC細胞、BL2141細胞
OCI-Ly18細胞系相關產品:HCC9724細胞、C-643細胞、LoVo細胞
A-704細胞系相關產品:CEM C7細胞、HCV29細胞、NCI-H676B細胞
A-673細胞系相關產品:NCI-H2085細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、KG-1a細胞
HIT clone T15細胞系相關產品:NL20細胞、SVEC4-10細胞、NW-38細胞
SNU-1細胞系相關產品:MDA436細胞、U-138MG細胞、U373-MG細胞
MSTO211H細胞系相關產品:NFS-60細胞、SUM-159PT細胞、CATH-a細胞
JM1細胞系相關產品:MG-HU-3細胞、MOLT 4細胞、S3-HeLa細胞
MG-63細胞系相關產品:TEV-1細胞、NRK-52E細胞、FK81細胞
SHIN3細胞系相關產品:HO8910PM細胞、H187細胞、PC 61細胞
HCAEC細胞系相關產品:NCIH522細胞、H.Ep.-2細胞、PLC細胞
H-735細胞系相關產品:P30/Ohkubo細胞、LS 1034細胞、IPAM-WT細胞
BALL-1細胞系相關產品:HepG2細胞、SACC-LM細胞、LCLC-103H細胞
L-Wnt-3A細胞系相關產品:MC3T3-E細胞、A-172細胞、RPMI-1788細胞
Hs934T細胞系相關產品:Kit-225-K6細胞、hRPTC細胞、HEK293F細胞
HOS TE 85細胞系相關產品:293AD細胞、LI7細胞、MOVAS-1細胞
5-8F細胞系相關產品:Hs852細胞、TE1細胞、NCI-H1417細胞
brain-derived Endothelial cells.3細胞系相關產品:NH-6細胞、RPMI 7951細胞、OCI-Ly 3細胞
OE-19細胞系相關產品:Nthy-ori 3.1細胞、CTLA4Ig-24細胞、JM-1細胞
NCIH1770細胞系相關產品:J45.01細胞、293 F細胞、Kasumi 1細胞
CHP 212細胞系相關產品:HCC-1806細胞、H-1155細胞、KMS-11細胞
Pt-K1細胞系相關產品:HCC0070細胞、Kasumi-6細胞、NCI-H1373細胞
SKRC20細胞系相關產品:C32 mel細胞、SV40-HCEC細胞、CCD-112CoN細胞
H1688細胞系相關產品:T/G HA VSMC細胞、KLM1細胞、HEL-299細胞
NuTu 19細胞系相關產品:RGE細胞、PT-K75細胞、HB611細胞
Hep3B細胞系相關產品:P3J-HR-1細胞、OCI-AML3細胞、IPI-2I細胞
TCC Sup細胞系相關產品:Hs 695.T細胞、OCI-Ly01細胞、OCILY10細胞
SNU-878 Adherent人肝癌細胞系
SK_HEP1細胞系相關產品:WIL2 S細胞、Panc 03.27細胞、Hk-2細胞
RPTC細胞系相關產品:MES13細胞、293A細胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞
ATC241細胞系相關產品:HT 1080.T細胞、CA922細胞、MDBK細胞
Ly10細胞系相關產品:SK-LU-1細胞、NRK 52E細胞、HT 144細胞
S37細胞系相關產品:HBE135-E6E7細胞、Jurkat, Clone E6-1細胞、NCIH716細胞
COLO_320DM細胞系相關產品:HANK-1細胞、SUDHL-8細胞、H22細胞
SN4741細胞系相關產品:Tb1.Lu細胞、Tn-5細胞、Fetal Human Lens-124細胞
T. T細胞系相關產品:Experimental Mammary Tumour-6細胞、FDC-P1細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞
MLTC-1細胞系相關產品:MV3細胞、HemECs細胞、SK N SH細胞
Swiss 3T3細胞系相關產品:JROECL 19細胞、LLC-MK2細胞、FD-LSC-1細胞
Mouse podocyte細胞系相關產品:PANC 813細胞、HDMEC細胞、N-2a細胞
H2171細胞系相關產品:LS513細胞、MCF-7B細胞、CHOK1細胞
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