"ONS-76 Adherent人腦髓母細胞瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質(zhì)，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
ONS-76 Adherent人腦髓母細胞瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
RCC-JF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUVEC-C[HUVEC]細胞、T47D細胞、EFM19細胞
HEK-AD 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H184A1細胞、M059K細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞
MOVAS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM159PT細胞、KHYG細胞、M-O7e細胞
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
WM-239-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Daudi細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞、MKN-28細胞
H1404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：He-La細胞、Hs-343-T細胞、PT-67細胞
TE671細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AU-Mel細胞、SK.MEL.28細胞、Y3.AG.1.2.3細胞
細胞生長特性：貼壁生長
ONS-76 Adherent人腦髓母細胞瘤細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮樣
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié)：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔毎硕嗫陔s，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當風衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
HEL9217細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kato-III細胞、H1836細胞、TE 85.T細胞
OVCA-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS細胞、NCC-IT細胞、Bowes melanoma cells細胞
Huh7.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs819.T細胞、L-WRN細胞、Mono Mac6細胞
FRTL-5 Cl 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8.653細胞、HUCEC細胞、MCF-7/AdrR細胞
HDLM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-115細胞、HIC細胞、Duke University 4475細胞
C-33 A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST2細胞、KRC-Y細胞、VP 229細胞
NS1-Ag4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHH-CALL2細胞、MDA-MB-175細胞、BHK細胞
MEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J 111細胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細胞、SK Col 1細胞
TOV-112細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-626細胞、RWPE2細胞、RCSMC細胞
CEM C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW 039細胞、A2008細胞、BeWo細胞
SUDHL8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly19細胞、N1E115細胞、GM05887細胞
NE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：159 PT細胞、MGC803細胞、HSC-6細胞
130T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 132細胞、HuPT4細胞、F81細胞
ONS-76 Adherent人腦髓母細胞瘤細胞系
SNU-407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-44細胞、SK UT 1細胞、TE-1細胞
UK Pan-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPMEC細胞、DAN-G細胞、RBE4細胞
RINm-5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan-2細胞、NCIH1781細胞、hs 68細胞
RINm-5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan-2細胞、NCIH1781細胞、hs 68細胞
AZ521細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T6 Swiss Albino細胞、X63Ag8-653細胞、Uhth-74細胞
NS1-Ag4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHH-CALL2細胞、MDA-MB-175細胞、BHK細胞
NCIH727細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-N87細胞、TN5B14細胞、SW1573細胞
HEK AD293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63.Ag8.653細胞、C918細胞、SF-767細胞
FHs74Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D341細胞、KP-N-RT-BM細胞、CAL85-1細胞
Strain V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NeHepLxHT細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞、SUDHL6細胞
COLO320-DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuO9細胞、RBMEC細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞
SCL I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCW 100細胞、SF-295細胞、Centre Antoine Lacassagne-33細胞
IPEC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 (Jiyoye)細胞、CCRF/CEM/0細胞、SKNO1細胞
SK-N-BE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS 17/2.8細胞、CCD841CoN細胞、KYSE-410細胞
AZ 521細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A72細胞、H1651細胞、U-343-MG細胞
BHT101細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-7細胞、MB231細胞、UMUC-3細胞
LC-1/sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 10.05細胞、Scott細胞、EC-GI細胞
Panc 02.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、VK2/E6E7細胞、CCD-841CoN細胞
TE9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03569細胞、NCIH838細胞、RPMI-6666細胞
Alexander cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293 c18細胞、M2-10B4細胞、CAL 85-1細胞
NK92-MI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPP 89細胞、CHP 126細胞、BRL3A細胞
Line 697細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT 226細胞、L-cells細胞、HeLa-S3細胞
HAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney 21細胞、A-72細胞、DU4475細胞
TALL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VERO76細胞、293-H細胞、SHZ-88細胞
HEK293T/17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNSH細胞、University of Arizona Cell Culture-893細胞、SUM149PT細胞
VK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L26細胞、H2170細胞、H2171細胞
OCIAML5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leukemia 1210細胞、HS-294細胞、HEL-92-1-7細胞
DHL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTHY-ORI3.1細胞、Panc-813細胞、H2110細胞
H1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-4-I細胞、Jurkat細胞、T8細胞
Hs-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE2細胞、NTERA2-D1細胞、SNU5細胞
LNCaP C4-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW480E細胞、DI TNC-1細胞、NK92細胞
huH 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma細胞、D283 Med細胞、343MG細胞
HPAF2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB-2細胞、NCI-H1373細胞、NCIH358細胞
MESSA-DX5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLC-15細胞、PLA801D細胞、OCI-AML2細胞
HS940細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_02_03細胞、Anip-973細胞、A-9細胞
ECV304細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H82細胞、3T3L1細胞、GOS-3細胞
MDA.MB.231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC 203細胞、VP267細胞、KY70細胞
HFF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC 97-L細胞、McARH7777細胞、HCC827細胞
OE21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H508細胞、ECV304細胞、H64細胞
MNNG/HOS Clone F-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJSA1細胞、DHL-16細胞、GM02131A細胞
HVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML5細胞、1.1B4細胞、BLO 11細胞
OCI-LY-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 445細胞、L6細胞、SMMC7721細胞
ONS-76 Adherent人腦髓母細胞瘤細胞系
HGF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAN 02細胞、SNU-869細胞、JIMT-1細胞
Jurkat-E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney-21細胞、WM-451Lu細胞、NIH 3T6細胞
GM03569B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1819細胞、HCC1588細胞、MOLT 3細胞
HL-60 clone15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLOY4細胞、Tn-5B1-4細胞、NIH-OVCAR-3細胞
SJRH30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMEL細胞、SKOV3細胞、WEHI 164 TC細胞
JB-6 Cl 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-343 MG細胞、EC-109細胞、V79細胞
HLEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：50.B1細胞、HEK293A細胞、KE-39細胞
HPAF-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM.12細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞、Hs 832(C).T細胞
NPC-TW01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pfeiffer細胞、H1770細胞、C57/B6-L細胞
CAL-120細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ishikawa細胞、Balb/c 3T3細胞、MES23.5細胞
A9(Hamprecht)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-15細胞、JURKAT E-61細胞、CA46細胞
Huh-7.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293-H細胞、COLO829細胞、NWA細胞
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