"NCM460 Adherent結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細(xì)胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱唵?，而且死板。１、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個(gè)問題，太長的消化時(shí)間會讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻，這個(gè)有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個(gè)事情，因?yàn)檫@個(gè)東西流程長。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個(gè)概念的，所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話，這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個(gè)很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個(gè)見得太多了，別不當(dāng)會事。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NCM460 Adherent結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞學(xué)在生命科學(xué)科中起著至關(guān)重要的作用，近年來細(xì)胞學(xué)蓬勃發(fā)展，并取得了重大的進(jìn)展，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室的構(gòu)建也是各個(gè)院校生物學(xué)科必備的實(shí)驗(yàn)室。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)謹(jǐn)慎復(fù)雜，需要的實(shí)驗(yàn)設(shè)備種類繁多，下面就一些動物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器進(jìn)行簡單介紹：CO２培養(yǎng)箱是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器，它為細(xì)胞提供了一個(gè)體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境，如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O２濃度等。細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)很容易受到各種細(xì)菌、微生物的感染，因此，CO２培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng)：細(xì)胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水，實(shí)際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標(biāo)準(zhǔn)方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的，而且水中的內(nèi)毒素直接參與細(xì)胞凋亡，血清中內(nèi)毒素含量越低，對細(xì)胞毒性越小，越利于細(xì)胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高，會直接導(dǎo)致細(xì)胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜：細(xì)胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高，在細(xì)胞操作時(shí)，一般需要在１００級空氣質(zhì)量條件下進(jìn)行，因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐：為了保存細(xì)胞，特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株，要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-１９６℃，因此，需要液氮罐。在此環(huán)境中，一般細(xì)胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱：細(xì)胞的凍存過程需要一系列程序降溫，一般４℃下存放３０min，轉(zhuǎn)放-２０℃ １ hour，再轉(zhuǎn)入-７０至-８０℃過夜，之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-１９６℃)，這時(shí)就必須配備一臺-８６℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細(xì)胞可達(dá)數(shù)月，對于不需要長期凍存的細(xì)胞，可暫時(shí)放于超低溫冰箱保存。恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾?xì)胞凍存管需要立即放于３７℃水浴中快速復(fù)蘇之后才傳代培養(yǎng)，因此，恒溫水浴也是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器。離心機(jī)：細(xì)胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細(xì)胞，所以需要配置低速的常溫離心機(jī)，對于后期細(xì)胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機(jī)。移液器和細(xì)胞培養(yǎng)的大量耗材：細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中有大量頻繁的移液操作，因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的，而且一次性，用量極大。除上述儀器外，高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器，發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機(jī)等也常常見于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室。
HCC1419細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞、LC-1Sq細(xì)胞、SK-RC 52細(xì)胞
hTERTHME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-3細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞、LY-R細(xì)胞
NCI-SNU-387細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Scott and White No. 13細(xì)胞、SK-BR-3細(xì)胞、Y1細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Murine Long bone Osteocyte-Y4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC VII細(xì)胞、OCI/AML5細(xì)胞、MONO-MAC 6細(xì)胞
SUPM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05887A細(xì)胞、JAR細(xì)胞、Tu177細(xì)胞
MRCV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H524細(xì)胞、BEP2D細(xì)胞、D-283細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
NCM460 Adherent結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況，請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過８０%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時(shí)，請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會造成細(xì)胞無法存活。
IBMF-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC/mHSC細(xì)胞、SW954細(xì)胞、L5178-R細(xì)胞
NCI-H1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2110細(xì)胞、KYSE 510細(xì)胞、CNE1細(xì)胞
H-727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293A細(xì)胞、U251細(xì)胞、PK-13細(xì)胞
AN3CA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB 157細(xì)胞、C6661細(xì)胞、Rat podocyte細(xì)胞
JVM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YES-2細(xì)胞、MES-SA/Dx-5細(xì)胞、SKHEP1細(xì)胞
293-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞、NRK49F細(xì)胞、CBRH-7919細(xì)胞
SUDHL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H345細(xì)胞、NW-MEL-38細(xì)胞、H-676B細(xì)胞
PL 45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RK 13細(xì)胞、HC-11細(xì)胞、Human Embryo Lung-1細(xì)胞
H1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2171細(xì)胞、PLB-985細(xì)胞、HCCLM6細(xì)胞
HEEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞、BE(2)-C細(xì)胞、JCA1細(xì)胞
SKMEL3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H146細(xì)胞、NCI-ADR-RES細(xì)胞、COV434細(xì)胞
R 2 C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-841-CoTr細(xì)胞、MDA-468細(xì)胞、HCEC-12細(xì)胞
G292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb 2細(xì)胞、HS940細(xì)胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞
NCM460 Adherent結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
CHL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MBMEC細(xì)胞、NCI-H220細(xì)胞、MDA157細(xì)胞
RMC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM-CUB-I細(xì)胞、LC-1-sq細(xì)胞、HuT102細(xì)胞
KFB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YAC-1細(xì)胞、KYSE0030細(xì)胞、TK-10細(xì)胞
KFB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YAC-1細(xì)胞、KYSE0030細(xì)胞、TK-10細(xì)胞
OCI-LY-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKO007細(xì)胞、NCI-H2591細(xì)胞、HOP-62細(xì)胞
HEK293-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI:SCC154細(xì)胞、H-2170細(xì)胞、C-4-I細(xì)胞
S37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE135-E6E7細(xì)胞、Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞、NCIH716細(xì)胞
L-M(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GB-1細(xì)胞、BALB/3T3細(xì)胞、KMM1細(xì)胞
COLO-680N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293FT細(xì)胞、KP 4細(xì)胞、HGSMC細(xì)胞
M-1 myeloid leukemia細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H69細(xì)胞、H69/P細(xì)胞、RAT2細(xì)胞
NCI-H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu 212細(xì)胞、SUD4細(xì)胞、CAL 12T細(xì)胞
OUMS-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE270細(xì)胞、H774細(xì)胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞
TEV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：4175細(xì)胞、Pan02細(xì)胞、Normal fibroblast-10細(xì)胞
IMR32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu686細(xì)胞、TE8細(xì)胞、266 Bl細(xì)胞
NCI-HUT-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TR-146細(xì)胞、ECV 304細(xì)胞、H-1869細(xì)胞
HeLa 229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2cl.D1細(xì)胞、LS 180細(xì)胞、FRTL5細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA435細(xì)胞、HIT-T15細(xì)胞、C17.2細(xì)胞
A 253細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31 FUJ細(xì)胞、HFLS-RA細(xì)胞、FOXNY細(xì)胞
SNU-869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P 3 HR 1細(xì)胞、Uhth-74細(xì)胞、T-98細(xì)胞
BrCL18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ3細(xì)胞、SKMEL-2細(xì)胞、VK-2/E6E7細(xì)胞
SNU-475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 10細(xì)胞、TF-1a細(xì)胞、SuDHL 10細(xì)胞
C-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-878細(xì)胞、NS-1-Ag4-1細(xì)胞、J-774A.1細(xì)胞
TE10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：V-79-4細(xì)胞、GM12878細(xì)胞、MPC5細(xì)胞
Vero E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-60細(xì)胞、OCIAML3細(xì)胞、HOS TE 85細(xì)胞
C-33-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PVEC細(xì)胞、293c18細(xì)胞、NCI-H2107細(xì)胞
Huh-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCM細(xì)胞、EAhy926細(xì)胞、MDAMB435S細(xì)胞
U251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞、H-2444細(xì)胞、B16-F10-BL6細(xì)胞
NTERA2D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MARC145細(xì)胞、MGH-U3細(xì)胞、H2195細(xì)胞
GES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293FT細(xì)胞、Hs832.Tc細(xì)胞、MG-HU-3細(xì)胞
ASH3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞、MM1細(xì)胞、NCTC-929細(xì)胞
U373 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-341細(xì)胞、NUGC-4細(xì)胞、H-1395細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 294T細(xì)胞、U-118MG細(xì)胞、HNE-1細(xì)胞
COLO 320F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-402細(xì)胞、IAR-20細(xì)胞、Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞
Epstein-Barr-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG44細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞、NEC-8細(xì)胞
H1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/G HA VSMC細(xì)胞、KLM1細(xì)胞、HEL-299細(xì)胞
GM00346B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ReNcell CX細(xì)胞、RCC10 RGB細(xì)胞、TR-146細(xì)胞
TGBC11T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co 205細(xì)胞、CLONE M3細(xì)胞、CMT167細(xì)胞
NCI-H810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACHN細(xì)胞、JB6 Cl 30-7b細(xì)胞、H2228細(xì)胞
COLO-829細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-10細(xì)胞、SW48細(xì)胞、CA 46細(xì)胞
NU-GC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-460細(xì)胞、Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞
A-375細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H647ell細(xì)胞、A.704細(xì)胞、Hs683T細(xì)胞
Y3Ag1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLMS1細(xì)胞、SNU16細(xì)胞、MDA MB 361細(xì)胞
NCM460 Adherent結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
LC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1836細(xì)胞、JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞、CO115細(xì)胞
P3 (Jiyoye)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hMSC-BM細(xì)胞、CCD-1095Sk細(xì)胞、B-95-8細(xì)胞
293-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI/ADRRES細(xì)胞、SKNAS細(xì)胞、Vero E-6細(xì)胞
E.G7-OVA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOC20細(xì)胞、CAKI 1細(xì)胞、AD-293細(xì)胞
N-87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：108CC15細(xì)胞、Hs 895 T細(xì)胞、KYSE 520細(xì)胞
P815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL2細(xì)胞、NPA'87細(xì)胞、hFOB 1.19細(xì)胞
H-2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F10--RED細(xì)胞、H341細(xì)胞、GM04671細(xì)胞
BSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV 504細(xì)胞、Tn5B1-4細(xì)胞、RBMVEC細(xì)胞
KYSE-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：95-D細(xì)胞、NCTC929細(xì)胞、3T3 L1細(xì)胞
B16-F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/mIL-6細(xì)胞、UPCISCC090細(xì)胞、Calu-1細(xì)胞
H727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCM-1細(xì)胞、UCH-1細(xì)胞、SN4741細(xì)胞
H719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-78細(xì)胞、OKT 3細(xì)胞、NIH:OVCAR-10細(xì)胞
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