"MX-1 Adherent人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問(wèn)題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問(wèn)題：目前主要有兩種見(jiàn)解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來(lái)說(shuō)，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過(guò)了活細(xì)胞會(huì)受壓過(guò)大，死亡。此外在操作過(guò)程中容易污染，所以不推薦。另一種說(shuō)法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無(wú)異常。５.細(xì)胞貼壁少的問(wèn)題：教科書(shū)中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問(wèn)題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過(guò)多，細(xì)胞濃度過(guò)低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問(wèn)題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問(wèn)題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，從以前的資料來(lái)看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒(méi)有什么影響，還有一個(gè)說(shuō)法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無(wú)害濃度。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
MX-1 Adherent人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。如果一次無(wú)法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無(wú)菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時(shí)體積會(huì)增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無(wú)菌，不需再無(wú)菌過(guò)濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾，勿直接過(guò)濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無(wú)菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會(huì)因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會(huì)影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過(guò)濾。不建議用過(guò)濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因?yàn)闀?huì)阻塞過(guò)濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”：通常經(jīng)過(guò)熱處理之血清，沈淀物的形成會(huì)顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”，常會(huì)誤認(rèn)為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會(huì)使此沈淀物增多，更會(huì)誤認(rèn)為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測(cè)，又沒(méi)有污染。一般而言，此小黑點(diǎn)應(yīng)不會(huì)影響細(xì)胞之生長(zhǎng)，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號(hào)的血清。
KP-N-RT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1563細(xì)胞、Ca-Ski細(xì)胞、HG2855細(xì)胞
JVM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YES-2細(xì)胞、MES-SA/Dx-5細(xì)胞、SKHEP1細(xì)胞
210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32 [Human melanoma]細(xì)胞、QSG-7701細(xì)胞、NCIH650細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-12細(xì)胞、HSC/mHSC細(xì)胞、CAL27細(xì)胞
H-1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 863.T細(xì)胞、MCF 10A細(xì)胞、H-1238細(xì)胞
JTC-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G 292 Clone A 141B1細(xì)胞、HSC2細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分
MX-1 Adherent人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無(wú)措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無(wú)菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤(pán)里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開(kāi)的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開(kāi)；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
RIN m5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2141細(xì)胞、ROS-17/2.8細(xì)胞、SF 295細(xì)胞
CAL 27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-4細(xì)胞、OCI Ly19細(xì)胞、H1373細(xì)胞
MFE 280細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞、SK ES 01細(xì)胞、HCC-1833細(xì)胞
RD 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACCLM細(xì)胞、PANC-10-05細(xì)胞、COLO-HSR細(xì)胞
DMS-79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U031細(xì)胞、AM38細(xì)胞、UMUC1細(xì)胞
Hs 888.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT細(xì)胞、PL12細(xì)胞、P3J細(xì)胞
ACCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Skin 1細(xì)胞、143B細(xì)胞、SW626細(xì)胞
Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SSP-25細(xì)胞、H6c7細(xì)胞、HANK細(xì)胞
ME 180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞、RD 2細(xì)胞、IR 983F細(xì)胞
McA-RH 8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-375細(xì)胞、Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞、SCL II細(xì)胞
Hs 604.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2073細(xì)胞、L(TK-)細(xì)胞、U266-B1細(xì)胞
COLO824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U87MG細(xì)胞、G422細(xì)胞、H146細(xì)胞
VMRCLCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-5178-Y-R細(xì)胞、PaTu-8988s細(xì)胞、Astrocyte type I clone細(xì)胞
MX-1 Adherent人乳腺癌細(xì)胞系
A-172MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEpiC細(xì)胞、SKG IIIa細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞
CT26WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW-264.7細(xì)胞、hRMECs細(xì)胞、P3JHR-1細(xì)胞
VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hce8693細(xì)胞、Calu3細(xì)胞、IGROV 1細(xì)胞
VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hce8693細(xì)胞、Calu3細(xì)胞、IGROV 1細(xì)胞
LA-N-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP-62細(xì)胞、B16F10細(xì)胞、CHG-5細(xì)胞
SBC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-C2A細(xì)胞、KLE細(xì)胞、RD細(xì)胞
CEMC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DK-MG細(xì)胞、H9c2 (2-1)細(xì)胞、MDCK.2細(xì)胞
HUT 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1666細(xì)胞、SNU-475細(xì)胞、MEG-01細(xì)胞
NCI-SNU-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA1細(xì)胞、UC-3細(xì)胞、H-2009細(xì)胞
PANC-02-03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-EBNA細(xì)胞、MSTO211H細(xì)胞、MeWo細(xì)胞
NCIH1792細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS TE85細(xì)胞、Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞、HCC1833細(xì)胞
HCC1599細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARO 81-1細(xì)胞、ChaGo-K-1細(xì)胞、HCC95細(xì)胞
OCI-Ly07細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-175細(xì)胞、Nthy-ori 3-1細(xì)胞、U118MG細(xì)胞
95-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Line 870 Emory University-4細(xì)胞、SHP77細(xì)胞、SCI1細(xì)胞
UMUC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JJN3細(xì)胞、hTERT-RPE1細(xì)胞、Rat Lung-65細(xì)胞
A-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co-115細(xì)胞、CF-PAC1細(xì)胞、SJ-RH30細(xì)胞
BC-027細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOVAS細(xì)胞、SW 620細(xì)胞、CT-26 WT細(xì)胞
SKN-SH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs606細(xì)胞、GOS-3細(xì)胞、B16-F0細(xì)胞
5637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2T細(xì)胞、H292細(xì)胞、SUP T1細(xì)胞
HCC-2935細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：746T細(xì)胞、MOLT4細(xì)胞、253JBV細(xì)胞
NCIH838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAVER1細(xì)胞、KMM-1細(xì)胞、NE-4C細(xì)胞
T-98細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKml2細(xì)胞、MKN-28細(xì)胞、MDCK Type II細(xì)胞
SK-RC 52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BLO11細(xì)胞、McCoy細(xì)胞、Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞
NB1RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-2-LUC細(xì)胞、H-1819細(xì)胞、SHIN-3細(xì)胞
NCIH650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K7M2 wt細(xì)胞、T 24細(xì)胞、MDA-361細(xì)胞
BC-3H-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H766T細(xì)胞、BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞、MCA 205細(xì)胞
MDA-MB157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hUC-MSC細(xì)胞、CZ-1細(xì)胞、SUM-102細(xì)胞
CV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 1112SK細(xì)胞、HCPEpiC細(xì)胞、WiDrTC細(xì)胞
MOLT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HME-1細(xì)胞、VeroE6細(xì)胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞
Hs 822.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-MC細(xì)胞、CV 1細(xì)胞、GCT0404細(xì)胞
CA-46細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-95-8細(xì)胞、Daoy細(xì)胞、9L細(xì)胞
TE671/RD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WB-F344細(xì)胞、NCIH345細(xì)胞、SNU739細(xì)胞
GM15452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 343.T細(xì)胞、Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、COLO 320細(xì)胞
K7M2 wt細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caov-4細(xì)胞、J-774A.1細(xì)胞、Jeko1細(xì)胞
TE15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-Tera-2細(xì)胞、PAEC細(xì)胞、4T1-LUC細(xì)胞
H-1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Porcine Kidney-13細(xì)胞、IOSE 80細(xì)胞、U343MG細(xì)胞
LC1sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞、RPMI-8226S細(xì)胞、RenCa細(xì)胞
SU-DHL-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CII細(xì)胞、HMrSV5細(xì)胞、MCA38細(xì)胞
OCI Ly10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-1細(xì)胞、HD-LM-2細(xì)胞、A2780-CP細(xì)胞
Hs 832(C).T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2085細(xì)胞、NW38細(xì)胞、HCC-202細(xì)胞
Sc-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS 4;11細(xì)胞、SCI1細(xì)胞、D283MED細(xì)胞
Malme-3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H920細(xì)胞、HEK-EBNA細(xì)胞、Hs 343.T細(xì)胞
MX-1 Adherent人乳腺癌細(xì)胞系
VeroE6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HANK細(xì)胞、SF 767細(xì)胞、A-20細(xì)胞
MIA PaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H82細(xì)胞、SP2細(xì)胞、DoTc2-4510細(xì)胞
SK ES 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN45細(xì)胞、PSN-1細(xì)胞、NCI-H1385細(xì)胞
CMT-167細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCLC21H細(xì)胞、Hs-578-T細(xì)胞、SU8686細(xì)胞
NMCG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00215細(xì)胞、TE-32細(xì)胞、CAL 62細(xì)胞
H283細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266 Bl細(xì)胞、beta TC6細(xì)胞、Gerner 7666細(xì)胞
SGC-7901細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH596細(xì)胞、NK-92細(xì)胞、V-79-4細(xì)胞
SW-1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDBK (NBL-1)細(xì)胞、IM 9細(xì)胞、NR 8383細(xì)胞
NTERA2-D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGBC11TKB細(xì)胞、H378細(xì)胞、BT-549細(xì)胞
J45.01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-87細(xì)胞、SJ-RH30細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞
HCC-4006細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU869細(xì)胞、8305-C細(xì)胞、COS-1細(xì)胞
MFE 280細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞、GM3570細(xì)胞、Molm 14細(xì)胞
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