"KYSE-270 Adherent人食道鱗狀細胞癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內生長，應在５０%條件培養(yǎng)基內(細胞在無血清培養(yǎng)基內生長２４小時)內凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
KYSE-270 Adherent人食道鱗狀細胞癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代的一般方法：開始細胞傳代前，仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細胞(單層細胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細胞，挑選生長狀態(tài)良好，細胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細胞；先用PBS洗液沖洗細胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細胞瓶內加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝，然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
Rat Chondrosarcoma Swarm細胞系相關產(chǎn)品：HL1細胞、HEK-293A細胞、MES 23.5細胞
V-79-4細胞系相關產(chǎn)品：HBZY 1細胞、C3H/10T1/2 clone 8細胞、A204細胞
COLO320-DM細胞系相關產(chǎn)品：HuO9細胞、RBMEC細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞
細胞傳代方法：１：５傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
P3/NS1/1-Ag4.1細胞系相關產(chǎn)品：H2444細胞、IR 983F細胞、LC1細胞
HBEpiC細胞系相關產(chǎn)品：RWPE-2細胞、SKO3細胞、GM03571細胞
SKLU01細胞系相關產(chǎn)品：WM 239細胞、MM-1S細胞、ATDC-5細胞
細胞生長特性：貼壁生長
KYSE-270 Adherent人食道鱗狀細胞癌細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮樣
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
CBRH-7919細胞系相關產(chǎn)品：MH-S細胞、J774A.1細胞、BT20細胞
Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞系相關產(chǎn)品：T-84細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞、PA I細胞
NCI-H2347細胞系相關產(chǎn)品：KATO III細胞、32D/cl3細胞、KAT-5細胞
EA. hy 926細胞系相關產(chǎn)品：SUM190PT細胞、THLE-2細胞、AU 565細胞
HCC-1500細胞系相關產(chǎn)品：SKMES1細胞、Nb-2細胞、SW-1783細胞
Co 115細胞系相關產(chǎn)品：COLO829細胞、JHH7細胞、NCIH1688細胞
JROECL21細胞系相關產(chǎn)品：OsA-CL細胞、HCMEC(BL12-H)細胞、EBC-1/original細胞
ANA-1細胞系相關產(chǎn)品：RBE4細胞、Rat 2細胞、NCI-460細胞
SW-403細胞系相關產(chǎn)品：TF-1a細胞、HSC5細胞、Lewis-Lung細胞
LIPF155C細胞系相關產(chǎn)品：DMS-114細胞、MonoMac6細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞
OCILY-10細胞系相關產(chǎn)品：P3-X63-Ag8-653細胞、WM 239A細胞、Cor L51細胞
MFD-1細胞系相關產(chǎn)品：LAPC-4細胞、JHH-7細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞
H-1573細胞系相關產(chǎn)品：HUCEC細胞、RCSMC細胞、SkChA-1細胞
KYSE-270 Adherent人食道鱗狀細胞癌細胞系
MCF 7B細胞系相關產(chǎn)品：J-111細胞、CCD 1112SK細胞、Hep 2細胞
Me Wo細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB453細胞、SUM 159PT細胞、SW 1417細胞
ST-2細胞系相關產(chǎn)品：SW 756細胞、HEK-293-H細胞、JOSK-M細胞
ST-2細胞系相關產(chǎn)品：SW 756細胞、HEK-293-H細胞、JOSK-M細胞
Hs 274細胞系相關產(chǎn)品：CFPAC-1細胞、TK-10細胞、AML 12細胞
FHC細胞系相關產(chǎn)品：HELA-GFP細胞、T-24細胞、S91細胞
HIBEpiC細胞系相關產(chǎn)品：HEK 293A細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞、H2107細胞
A375-SM細胞系相關產(chǎn)品：RT4-D6-P2T細胞、HepG2細胞、NCI-H165細胞
KMST-6細胞系相關產(chǎn)品：DF-1細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、NCIH441細胞
L5178Y TK+/-3.7.2c細胞系相關產(chǎn)品：293S細胞、A375mel細胞、H4IIEC3細胞
BTI-TN5B1-4細胞系相關產(chǎn)品：HASMC細胞、NTera 2/cl.D1細胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細胞
786-O RCC細胞系相關產(chǎn)品：SMA 560細胞、Murine Carcinoma-38細胞、VK2/E6E7細胞
PC3M細胞系相關產(chǎn)品：BMSC/hBMSCs細胞、KM12SM細胞、PNT-1A細胞
L-5178-Y-R細胞系相關產(chǎn)品：WPE-int細胞、SW260細胞、OUMS23細胞
NCIH128細胞系相關產(chǎn)品：MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、EBTr (NBL-4)細胞、G361mel細胞
McA-RH8994細胞系相關產(chǎn)品：LAN1細胞、PL-45細胞、Mel624細胞
CF PAC-1細胞系相關產(chǎn)品：WSU-DLCL(2)細胞、NCI-H841細胞、TE12細胞
SJRH 30細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H498細胞、GA-10(Clone 4)細胞、HVSMC細胞
COS-1細胞系相關產(chǎn)品：OACP4C細胞、H-2172細胞、CL-34細胞
PANC 203細胞系相關產(chǎn)品：TE4細胞、WEHI-3細胞、L-WRN細胞
THP-1(ATCC)細胞系相關產(chǎn)品：J.E6-1細胞、BLO-11細胞、Vero 76細胞
Cloudman M3細胞系相關產(chǎn)品：Dami細胞、Hs600T細胞、H1650細胞
RT-112細胞系相關產(chǎn)品：C32-mel細胞、HeLa/DDP細胞、RCC10細胞
SKGT2細胞系相關產(chǎn)品：Hs 895 T細胞、SK LU 1細胞、TE 32細胞
HDMEC細胞系相關產(chǎn)品：Hs895.T細胞、GLC-82細胞、Karpas 422細胞
LNCaP FGC細胞系相關產(chǎn)品：H446細胞、SMC-1細胞、H1092細胞
HemECs細胞系相關產(chǎn)品：Beta-TC-6細胞、H-1184細胞、COS-7細胞
IFRS1細胞系相關產(chǎn)品：SNU-423細胞、GM06141細胞、TE13細胞
U-373MG細胞系相關產(chǎn)品：Astrocyte type I clone細胞、FU-97細胞、DoTc2 4510細胞
YES2細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB175細胞、WM2664細胞、H-295R細胞
TK10細胞系相關產(chǎn)品：KY70細胞、SK HEP-1細胞、NCI-H1651細胞
Evsa-T細胞系相關產(chǎn)品：PC-9S1細胞、C42細胞、NCI-H1703細胞
MT2細胞系相關產(chǎn)品：HS-294-T細胞、BIU87細胞、DMS273細胞
N1E-115細胞系相關產(chǎn)品：87MG細胞、MDA-MB-175-VII細胞、AML193細胞
L5178YR細胞系相關產(chǎn)品：D10細胞、L M (TK-)細胞、NCIH748細胞
EVSAT細胞系相關產(chǎn)品：MB49細胞、HCC0044細胞、PVEC細胞
OCI Ly10細胞系相關產(chǎn)品：SCL-1細胞、HD-LM-2細胞、A2780-CP細胞
HeLa/S3細胞系相關產(chǎn)品：Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞、NCTC1469細胞、GP-293細胞
NCIH209細胞系相關產(chǎn)品：LA-N-5細胞、Capan 1細胞、VE細胞
CAL-27細胞系相關產(chǎn)品：CAL-51細胞、My-La 2059細胞、NCI-747細胞
P388細胞系相關產(chǎn)品：KG1細胞、H-378細胞、NH-6細胞
NCI H747細胞系相關產(chǎn)品：NKL細胞、HeLa-S3細胞、Colon 26細胞
KYSE-270 Adherent人食道鱗狀細胞癌細胞系
b.End3細胞系相關產(chǎn)品：Calu 6細胞、C1498細胞、8305-C細胞
RCC-10細胞系相關產(chǎn)品：SKCO-1細胞、OCI-Ly 18細胞、NCIH1355細胞
UMUC-14細胞系相關產(chǎn)品：HCAEC細胞、NS-20Y細胞、CTLL2細胞
SRA 01/04細胞系相關產(chǎn)品：HN4細胞、CEM-0細胞、MC38細胞
HCC-15細胞系相關產(chǎn)品：MRMT-1細胞、Swiss 3T3細胞、OCI-Ly1細胞
KE39細胞系相關產(chǎn)品：HFT8810細胞、ChaGo K-1細胞、HBE 135-E6/E7細胞
ZYM-SVEC01細胞系相關產(chǎn)品：EB-1細胞、HOS-143B細胞、KTCTL-140細胞
EoL-1-cell細胞系相關產(chǎn)品：BRL細胞、H-1048細胞、SPCA-1細胞
MDA-330細胞系相關產(chǎn)品：SPC-A-1細胞、H87細胞、10RGB細胞
NIHOVCAR3細胞系相關產(chǎn)品：FL62891細胞、Panc_04_03細胞、KYSE 450細胞
H-1770細胞系相關產(chǎn)品：RSC 96細胞、ABC-1細胞、FRTL-5 Cl 2細胞
NCI-H2347細胞系相關產(chǎn)品：KATO III細胞、H-69細胞、KBM5細胞
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