"KYSE-270 Adherent人食道鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項：細(xì)胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復(fù)蘇。那么，細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至７０%單層時收獲細(xì)胞，計數(shù)活細(xì)胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細(xì)胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細(xì)胞的損傷等等。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
KYSE-270 Adherent人食道鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代的一般方法：開始細(xì)胞傳代前，仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細(xì)胞(單層細(xì)胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細(xì)胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細(xì)胞，挑選生長狀態(tài)良好，細(xì)胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細(xì)胞；先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細(xì)胞瓶內(nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細(xì)胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL1細(xì)胞、HEK-293A細(xì)胞、MES 23.5細(xì)胞
V-79-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBZY 1細(xì)胞、C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞、A204細(xì)胞
COLO320-DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuO9細(xì)胞、RBMEC細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：５傳代
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2444細(xì)胞、IR 983F細(xì)胞、LC1細(xì)胞
HBEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RWPE-2細(xì)胞、SKO3細(xì)胞、GM03571細(xì)胞
SKLU01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 239細(xì)胞、MM-1S細(xì)胞、ATDC-5細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
KYSE-270 Adherent人食道鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長密度而定，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換；３)購買的復(fù)蘇細(xì)胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細(xì)胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
CBRH-7919細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MH-S細(xì)胞、J774A.1細(xì)胞、BT20細(xì)胞
Murine Thymic Epithelial Cell line 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-84細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞、PA I細(xì)胞
NCI-H2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATO III細(xì)胞、32D/cl3細(xì)胞、KAT-5細(xì)胞
EA. hy 926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM190PT細(xì)胞、THLE-2細(xì)胞、AU 565細(xì)胞
HCC-1500細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMES1細(xì)胞、Nb-2細(xì)胞、SW-1783細(xì)胞
Co 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO829細(xì)胞、JHH7細(xì)胞、NCIH1688細(xì)胞
JROECL21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OsA-CL細(xì)胞、HCMEC(BL12-H)細(xì)胞、EBC-1/original細(xì)胞
ANA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBE4細(xì)胞、Rat 2細(xì)胞、NCI-460細(xì)胞
SW-403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TF-1a細(xì)胞、HSC5細(xì)胞、Lewis-Lung細(xì)胞
LIPF155C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-114細(xì)胞、MonoMac6細(xì)胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞
OCILY-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8-653細(xì)胞、WM 239A細(xì)胞、Cor L51細(xì)胞
MFD-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAPC-4細(xì)胞、JHH-7細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞
H-1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUCEC細(xì)胞、RCSMC細(xì)胞、SkChA-1細(xì)胞
KYSE-270 Adherent人食道鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
MCF 7B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-111細(xì)胞、CCD 1112SK細(xì)胞、Hep 2細(xì)胞
Me Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB453細(xì)胞、SUM 159PT細(xì)胞、SW 1417細(xì)胞
ST-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 756細(xì)胞、HEK-293-H細(xì)胞、JOSK-M細(xì)胞
ST-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 756細(xì)胞、HEK-293-H細(xì)胞、JOSK-M細(xì)胞
Hs 274細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC-1細(xì)胞、TK-10細(xì)胞、AML 12細(xì)胞
FHC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HELA-GFP細(xì)胞、T-24細(xì)胞、S91細(xì)胞
HIBEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293A細(xì)胞、Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞、H2107細(xì)胞
A375-SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4-D6-P2T細(xì)胞、HepG2細(xì)胞、NCI-H165細(xì)胞
KMST-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DF-1細(xì)胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、NCIH441細(xì)胞
L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293S細(xì)胞、A375mel細(xì)胞、H4IIEC3細(xì)胞
BTI-TN5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HASMC細(xì)胞、NTera 2/cl.D1細(xì)胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞
786-O RCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA 560細(xì)胞、Murine Carcinoma-38細(xì)胞、VK2/E6E7細(xì)胞
PC3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMSC/hBMSCs細(xì)胞、KM12SM細(xì)胞、PNT-1A細(xì)胞
L-5178-Y-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPE-int細(xì)胞、SW260細(xì)胞、OUMS23細(xì)胞
NCIH128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞、EBTr (NBL-4)細(xì)胞、G361mel細(xì)胞
McA-RH8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN1細(xì)胞、PL-45細(xì)胞、Mel624細(xì)胞
CF PAC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSU-DLCL(2)細(xì)胞、NCI-H841細(xì)胞、TE12細(xì)胞
SJRH 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H498細(xì)胞、GA-10(Clone 4)細(xì)胞、HVSMC細(xì)胞
COS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OACP4C細(xì)胞、H-2172細(xì)胞、CL-34細(xì)胞
PANC 203細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE4細(xì)胞、WEHI-3細(xì)胞、L-WRN細(xì)胞
THP-1(ATCC)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J.E6-1細(xì)胞、BLO-11細(xì)胞、Vero 76細(xì)胞
Cloudman M3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dami細(xì)胞、Hs600T細(xì)胞、H1650細(xì)胞
RT-112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32-mel細(xì)胞、HeLa/DDP細(xì)胞、RCC10細(xì)胞
SKGT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 895 T細(xì)胞、SK LU 1細(xì)胞、TE 32細(xì)胞
HDMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs895.T細(xì)胞、GLC-82細(xì)胞、Karpas 422細(xì)胞
LNCaP FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H446細(xì)胞、SMC-1細(xì)胞、H1092細(xì)胞
HemECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Beta-TC-6細(xì)胞、H-1184細(xì)胞、COS-7細(xì)胞
IFRS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-423細(xì)胞、GM06141細(xì)胞、TE13細(xì)胞
U-373MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Astrocyte type I clone細(xì)胞、FU-97細(xì)胞、DoTc2 4510細(xì)胞
YES2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB175細(xì)胞、WM2664細(xì)胞、H-295R細(xì)胞
TK10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY70細(xì)胞、SK HEP-1細(xì)胞、NCI-H1651細(xì)胞
Evsa-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9S1細(xì)胞、C42細(xì)胞、NCI-H1703細(xì)胞
MT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-294-T細(xì)胞、BIU87細(xì)胞、DMS273細(xì)胞
N1E-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：87MG細(xì)胞、MDA-MB-175-VII細(xì)胞、AML193細(xì)胞
L5178YR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D10細(xì)胞、L M (TK-)細(xì)胞、NCIH748細(xì)胞
EVSAT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB49細(xì)胞、HCC0044細(xì)胞、PVEC細(xì)胞
OCI Ly10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-1細(xì)胞、HD-LM-2細(xì)胞、A2780-CP細(xì)胞
HeLa/S3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞、NCTC1469細(xì)胞、GP-293細(xì)胞
NCIH209細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-5細(xì)胞、Capan 1細(xì)胞、VE細(xì)胞
CAL-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-51細(xì)胞、My-La 2059細(xì)胞、NCI-747細(xì)胞
P388細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG1細(xì)胞、H-378細(xì)胞、NH-6細(xì)胞
NCI H747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKL細(xì)胞、HeLa-S3細(xì)胞、Colon 26細(xì)胞
KYSE-270 Adherent人食道鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
b.End3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu 6細(xì)胞、C1498細(xì)胞、8305-C細(xì)胞
RCC-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO-1細(xì)胞、OCI-Ly 18細(xì)胞、NCIH1355細(xì)胞
UMUC-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCAEC細(xì)胞、NS-20Y細(xì)胞、CTLL2細(xì)胞
SRA 01/04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN4細(xì)胞、CEM-0細(xì)胞、MC38細(xì)胞
HCC-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRMT-1細(xì)胞、Swiss 3T3細(xì)胞、OCI-Ly1細(xì)胞
KE39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT8810細(xì)胞、ChaGo K-1細(xì)胞、HBE 135-E6/E7細(xì)胞
ZYM-SVEC01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB-1細(xì)胞、HOS-143B細(xì)胞、KTCTL-140細(xì)胞
EoL-1-cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL細(xì)胞、H-1048細(xì)胞、SPCA-1細(xì)胞
MDA-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPC-A-1細(xì)胞、H87細(xì)胞、10RGB細(xì)胞
NIHOVCAR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL62891細(xì)胞、Panc_04_03細(xì)胞、KYSE 450細(xì)胞
H-1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSC 96細(xì)胞、ABC-1細(xì)胞、FRTL-5 Cl 2細(xì)胞
NCI-H2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATO III細(xì)胞、H-69細(xì)胞、KBM5細(xì)胞
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