"HT-1197 Adherent人膀胱癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會(huì)受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個(gè)說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HT-1197 Adherent人膀胱癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細(xì)胞因傳代而遲早會(huì)出現(xiàn)變異，有時(shí)因寄贈(zèng)、交換和購買，培養(yǎng)細(xì)胞從一個(gè)實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)運(yùn)到另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室，的策略是進(jìn)行低溫保存。這對于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要。現(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點(diǎn)。細(xì)胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時(shí)，細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài)，故可以長期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：凍存細(xì)胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細(xì)胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細(xì)胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細(xì)胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細(xì)胞。１ml凍存細(xì)胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)，細(xì)胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細(xì)胞/ml；培養(yǎng)細(xì)胞１２到２４小時(shí)，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細(xì)胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細(xì)胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細(xì)胞，并且進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)。細(xì)胞鋪板，細(xì)胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細(xì)胞/ml。細(xì)胞的分化：一個(gè)成年人全身細(xì)胞總數(shù)約１０１２個(gè)，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細(xì)胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細(xì)胞均來自一個(gè)受精卵細(xì)胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細(xì)胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細(xì)胞分化。細(xì)胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細(xì)胞的產(chǎn)生和分化，這個(gè)過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細(xì)胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細(xì)胞周期中G１期開始時(shí)一個(gè)確定的點(diǎn)G０點(diǎn)“逃逸”出細(xì)胞周期。旺盛生長分裂的細(xì)胞和各種分化了的細(xì)胞，它們的基因表達(dá)和代謝活動(dòng)各不相同。
COLO684細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP5d細(xì)胞、MDA134細(xì)胞、SNUC1細(xì)胞
Panc8.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04680細(xì)胞、Nb2a細(xì)胞、NCIH660細(xì)胞
My-La 2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-266 AR1細(xì)胞、H345細(xì)胞、MIMVEC細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：５-１：１０傳代，２天換液１次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
hUC-MSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH378細(xì)胞、CHO-ori細(xì)胞、MXI細(xì)胞
hUC-MSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH378細(xì)胞、CHO-ori細(xì)胞、MXI細(xì)胞
SW962細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375.S2細(xì)胞、HTR-8/SVneo細(xì)胞、3T6-Swiss albino細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
HT-1197 Adherent人膀胱癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
ND7/23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BA/F3細(xì)胞、LN229細(xì)胞、P3X63 Ag8細(xì)胞
MUS-M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE-37細(xì)胞、PCI-4M細(xì)胞、BNCL2細(xì)胞
624細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCMEC細(xì)胞、D10.G4.1細(xì)胞、CMT 64細(xì)胞
Reuber H-35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：STO細(xì)胞、Hs940-T細(xì)胞、PL 5細(xì)胞
Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-10細(xì)胞、JEG3細(xì)胞、HBVP細(xì)胞
Panc 4.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-3細(xì)胞、RTE細(xì)胞、NCI-H2452細(xì)胞
SMMC7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTLA4Ig-24細(xì)胞、C-6細(xì)胞、GM07404細(xì)胞
CFPAC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TMK1細(xì)胞、ACT-1細(xì)胞、JeKo-1細(xì)胞
Tn5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞、B16/F10細(xì)胞、RCC10RGB細(xì)胞
F98細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-CAR細(xì)胞、YES 2細(xì)胞、YAC-1細(xì)胞
AMC-HN-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL7405細(xì)胞、HMSC細(xì)胞、SKMES-1細(xì)胞
HT55細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 159PT細(xì)胞、UM-UC-14細(xì)胞、ML-2細(xì)胞
MCF7/WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB134VI細(xì)胞、MMAc-Serum Free細(xì)胞、C26細(xì)胞
HT-1197 Adherent人膀胱癌細(xì)胞系
HFT8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV 3細(xì)胞、Bac12F5細(xì)胞、CCD1095Sk細(xì)胞
CF Pac1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：bEND.3細(xì)胞、32D-Cl3細(xì)胞、HCC-1588細(xì)胞
KAT-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2030細(xì)胞、NCIH1993細(xì)胞、CMT93細(xì)胞
Rat 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMrSV5細(xì)胞、NCI-H1792細(xì)胞、ACT-1細(xì)胞
TE14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞、OVCAR10細(xì)胞、7404細(xì)胞
B16-F10-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.4細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞、NP69細(xì)胞
TMD8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH/DF-1細(xì)胞、H-1915細(xì)胞、SNU387細(xì)胞
SKNEP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-138MG細(xì)胞、U14細(xì)胞、BIC1細(xì)胞
Mink細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS 17/28細(xì)胞、SUIT2細(xì)胞、Human Microglia Clone 3細(xì)胞
MSB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIPF178C細(xì)胞、HGC-27細(xì)胞、KPL1細(xì)胞
D283MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lu99A細(xì)胞、HEK293S細(xì)胞、DoTc2細(xì)胞
JB6Cl30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLO-Y4細(xì)胞、H661細(xì)胞、DHL4細(xì)胞
VP 229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-680N細(xì)胞、BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞、UM-UC3細(xì)胞
H676B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM T4細(xì)胞、AN3細(xì)胞、ROS1728細(xì)胞
B16 BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOSC2細(xì)胞、HeLa/S3細(xì)胞、Jurkat-77細(xì)胞
NCI-H1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1sq細(xì)胞、NH-6細(xì)胞、OVCAR3細(xì)胞
MRC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh7.5細(xì)胞、SW 780細(xì)胞、ST2細(xì)胞
HSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-596細(xì)胞、Kasumi-1細(xì)胞、NCI-SNU-C2A細(xì)胞
NCIH810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2126細(xì)胞、NFHIOSE-29細(xì)胞、LS513細(xì)胞
P-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF/CD18細(xì)胞、184A1細(xì)胞、Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞
hEEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa017C細(xì)胞、A-2780細(xì)胞、MM.1S細(xì)胞
SCC VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3-CA細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞、MFE296細(xì)胞
COLO 205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-II-E細(xì)胞、SUM 102PT細(xì)胞、COLO_320DM細(xì)胞
Hs 604.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2073細(xì)胞、L(TK-)細(xì)胞、U266-B1細(xì)胞
LS-174T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-II-EC3細(xì)胞、NCIH1869細(xì)胞、SKCol1細(xì)胞
NCIH446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞、Ketr3細(xì)胞、HRA 19細(xì)胞
OV2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-Ag4/1細(xì)胞、HRC-99細(xì)胞、NCI-H727細(xì)胞
Sp2/0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1623細(xì)胞、LS180細(xì)胞、NCIH187細(xì)胞
Panc4.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMG-1細(xì)胞、EB2細(xì)胞、Melanoma 14細(xì)胞
SVHUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2052細(xì)胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞、NCI-H716細(xì)胞
PTK-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC97L細(xì)胞、SUDHL-1細(xì)胞、Ramos (RA 1)細(xì)胞
MCA-205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293 c18細(xì)胞、NCI-SNU-1040細(xì)胞、Nb2a細(xì)胞
C-33-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PVEC細(xì)胞、293c18細(xì)胞、NCI-H2107細(xì)胞
BEL/FU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOSC-2 cl3-43細(xì)胞、HBL1細(xì)胞、RT-BM細(xì)胞
DR2R 1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GNM細(xì)胞、DLD 1細(xì)胞、Panc2_03細(xì)胞
RAW264細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TYK-nu細(xì)胞、CD18細(xì)胞、HIEC6細(xì)胞
RERF-LC-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NH6細(xì)胞、H-211細(xì)胞、RBL-I細(xì)胞
Nthy-ori 3.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL 1-5細(xì)胞、LLC-PK(1)細(xì)胞、IPEC1細(xì)胞
MKN 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCAEC細(xì)胞、COR-L279細(xì)胞、JEG-3細(xì)胞
SUD4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNTEC細(xì)胞、T HEECs細(xì)胞、Hs688(A)T細(xì)胞
V79-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN5細(xì)胞、Tissue Culture-1細(xì)胞、HPAFII細(xì)胞
HSC 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P1-Raji細(xì)胞、YES2細(xì)胞、SNU368細(xì)胞
HT-1197 Adherent人膀胱癌細(xì)胞系
KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1299細(xì)胞、SUP-B15細(xì)胞、C6細(xì)胞
S37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE135-E6E7細(xì)胞、Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞、NCIH716細(xì)胞
GM02132C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR-8348細(xì)胞、GLC82細(xì)胞、MC57G細(xì)胞
210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32 [Human melanoma]細(xì)胞、QSG-7701細(xì)胞、NCIH650細(xì)胞
Panc10.05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUGCHOR1細(xì)胞、MLE-12細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-28細(xì)胞
SU 86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1.289細(xì)胞、HEK-293 c18細(xì)胞、Hs840_T細(xì)胞
ROS17/2.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI細(xì)胞、HOS TE 85細(xì)胞、SKNAS細(xì)胞
UO31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHH-CALL-2細(xì)胞、MV-4:11細(xì)胞、293 HEK細(xì)胞
SW 1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OB2細(xì)胞、SKMEL1細(xì)胞、U-2 OS細(xì)胞
TE12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH/DF#1細(xì)胞、SNU-5細(xì)胞、HCT FET細(xì)胞
HCC1937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL 21細(xì)胞、RPMI-1846細(xì)胞、H-1819細(xì)胞
624細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCMEC細(xì)胞、B-95-8細(xì)胞、RBL細(xì)胞
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