"NUGC-3 Adherent人胃癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞!
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NUGC-3 Adherent人胃癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
SNK-1細胞系相關產(chǎn)品:CCD 966SK細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-2085細胞
KYSE 410細胞系相關產(chǎn)品:ZR7530細胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、786.O細胞
SK-MEL-28細胞系相關產(chǎn)品:HSF細胞、AQ-Mel細胞、4-1st細胞
細胞傳代方法:1:6傳代
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HSC-2細胞系相關產(chǎn)品:Hs-578-T細胞、EPC細胞、MPC-11細胞
OV433細胞系相關產(chǎn)品:HMO6細胞、SH-SY5Y細胞、RSC96細胞
TE671/RD細胞系相關產(chǎn)品:WB-F344細胞、NCIH345細胞、SNU739細胞
細胞生長特性:貼壁生長
NUGC-3 Adherent人胃癌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮樣
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在1-2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
MIN-6細胞系相關產(chǎn)品:SCC090細胞、DCS細胞、Caov-4細胞
Psi-2-DAP細胞系相關產(chǎn)品:EAC-E2G8細胞、IEC-6細胞、OKa-C-1細胞
SNU119細胞系相關產(chǎn)品:MDA1386細胞、MUTZ-3細胞、CL1-0細胞
H460細胞系相關產(chǎn)品:Karpas 299細胞、87MG細胞、MA 104細胞
NCI-SNU-16細胞系相關產(chǎn)品:IHH細胞、NTERA-2細胞、T98細胞
CHO cell clone K1細胞系相關產(chǎn)品:HCC-95細胞、SKNSH細胞、HCC9724細胞
Simpson細胞系相關產(chǎn)品:RERFLCMS細胞、TE-9細胞、UMRC-2細胞
Cor L88細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1573細胞、SW-900細胞、CV1細胞
BGC-823細胞系相關產(chǎn)品:Pa17C細胞、7404細胞、H-2106細胞
ECV細胞系相關產(chǎn)品:S91細胞、NCIH522細胞、H1954細胞
NCM356細胞系相關產(chǎn)品:MDCK II細胞、REC1細胞、AK細胞
Hs870T細胞系相關產(chǎn)品:JG細胞、NCI-H748細胞、SK-MEL-1細胞
HS-445細胞系相關產(chǎn)品:PC.3細胞、HLE-SRA-01/04細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞
NUGC-3 Adherent人胃癌細胞系
GLC-15細胞系相關產(chǎn)品:LLCMK2細胞、INS-1E細胞、He-La細胞
RPMI #8226細胞系相關產(chǎn)品:He La細胞、LICR-LON-HN6-R細胞、SKNBE-2細胞
BIC-1細胞系相關產(chǎn)品:BALB/c 3T3 clone A31細胞、SW-756細胞、ONS76細胞
BIC-1細胞系相關產(chǎn)品:BALB/c 3T3 clone A31細胞、SW-756細胞、ONS76細胞
SUDHL-2細胞系相關產(chǎn)品:LP-1細胞、SK-N-BE-2細胞、8226細胞
BALB/3T3 cl. A31細胞系相關產(chǎn)品:RCK-8細胞、HEK 293-F細胞、CTV-1細胞
J82 COT細胞系相關產(chǎn)品:TE-1細胞、Namalva細胞、NCIH196細胞
HMy2.CIR細胞系相關產(chǎn)品:P3X63 Ag8.653細胞、OCI/AML3細胞、MC-38細胞
Rainbow Trout Embryo細胞系相關產(chǎn)品:SupB15W細胞、BOWES細胞、TOG細胞
SW 620細胞系相關產(chǎn)品:H-650細胞、SKMEL2細胞、Hs695細胞
MCF7細胞系相關產(chǎn)品:CHG5細胞、GES-1細胞、L132細胞
B-104細胞系相關產(chǎn)品:COLO-320DM細胞、SaOS細胞、RMS 13細胞
KE-39細胞系相關產(chǎn)品:Hs706T細胞、SUP-B1細胞、T47D:A細胞
A375-S2細胞系相關產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、SU-DHL-16細胞、C8166細胞
RAEC細胞系相關產(chǎn)品:HCC2279細胞、NCIH2122細胞、HM06.A1細胞
MDAMB175VII細胞系相關產(chǎn)品:HCV-29細胞、CT-26細胞、WM451細胞
NBL_S細胞系相關產(chǎn)品:KCL22細胞、HEK.EBNA細胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細胞
PGLH7細胞系相關產(chǎn)品:CHL-11細胞、293 EBNA細胞、OACP4C細胞
High-5細胞系相關產(chǎn)品:NCIH446細胞、CL-40細胞、HCC-1359細胞
MUGCHOR1細胞系相關產(chǎn)品:no.11細胞、HCCC-9810細胞、WIL2S細胞
GM3569細胞系相關產(chǎn)品:P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDA-MB361細胞、KNS-81細胞
NCI-H1563細胞系相關產(chǎn)品:HO-8910PM細胞、U87MG細胞、FHCRC-11細胞
Panc-08.13細胞系相關產(chǎn)品:C4-I細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞、MCF 7細胞
RMG-1細胞系相關產(chǎn)品:V79-GalK1細胞、LOU-NH-91細胞、OSC-19細胞
OVCA420細胞系相關產(chǎn)品:H 9細胞、MGH-U1細胞、CEM-CCRF細胞
K-562細胞系相關產(chǎn)品:GFP-Olig2細胞、Colo205細胞、H3255細胞
TE354.T細胞系相關產(chǎn)品:S.B.細胞、HCC44細胞、RS1細胞
R1800[RA]細胞系相關產(chǎn)品:EFM-192A細胞、NCI H716細胞、NCI-SNU-398細胞
C3H10T1/2 clone8細胞系相關產(chǎn)品:COS-1細胞、MCF10A細胞、NCIH322細胞
MADB-106細胞系相關產(chǎn)品:MNNG/HOS Clone F-5細胞、MUTZ-1細胞、Caov-3細胞
CoCL2細胞系相關產(chǎn)品:HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、143BTK-細胞、J774A.1細胞
NALM-6細胞系相關產(chǎn)品:RCCJF細胞、NIH:OVCAR3細胞、MCF.7細胞
C-33 A細胞系相關產(chǎn)品:ST2細胞、KRC-Y細胞、VP 229細胞
Leukemia L1210細胞系相關產(chǎn)品:Normal Rat, August 3, 1983細胞、NCI.H226細胞、HCGC細胞
NIH3T3細胞系相關產(chǎn)品:MGH-U1細胞、266 Bl細胞、TE-4細胞
NCI-H520細胞系相關產(chǎn)品:Hs888T細胞、DC2.4細胞、HIEC-6細胞
HMC細胞系相關產(chǎn)品:CEM-CCRF (CAMR)細胞、624 MEL細胞、GM2132細胞
HEEpiC細胞系相關產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、BE(2)-C細胞、JCA1細胞
H-2073細胞系相關產(chǎn)品:Sf21細胞、KMB17細胞、Huh-7細胞
CF-1 MEF細胞系相關產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-62細胞、RM1細胞、NCI-H-82細胞
YES2細胞系相關產(chǎn)品:MDAMB175細胞、WM2664細胞、H-295R細胞
U138MG細胞系相關產(chǎn)品:HT3細胞、Y3.AG.1.2.3細胞、MSTO-211 H細胞
NUGC-3 Adherent人胃癌細胞系
786-O RCC細胞系相關產(chǎn)品:SMA 560細胞、Murine Carcinoma-38細胞、VK2/E6E7細胞
MAVER1細胞系相關產(chǎn)品:SNU-761細胞、HuNS1細胞、FF-WT-BJ細胞
293A細胞系相關產(chǎn)品:WC00044細胞、A-2058細胞、4175細胞
BT-474細胞系相關產(chǎn)品:T-47-D細胞、Ly10細胞、BC-028細胞
GP5d細胞系相關產(chǎn)品:SKES-1細胞、OCI-AML2細胞、Vero細胞
WM 239細胞系相關產(chǎn)品:PAEC細胞、DLD-1細胞、HCT8細胞
MOLT 3細胞系相關產(chǎn)品:BC-009細胞、OAW-42細胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞
HuH-1細胞系相關產(chǎn)品:NIH:OVCAR-8細胞、DHL10細胞、NCI-H2291細胞
MCF-10A細胞系相關產(chǎn)品:NALM6細胞、Human Embryo Kidney-2細胞、MCF7-CTRL細胞
C3H/10T1/2-clone8細胞系相關產(chǎn)品:MSF細胞、OVCAR-420細胞、MDA-330細胞
Jiyoye細胞系相關產(chǎn)品:ABC-1細胞、Human Foreskin Fibroblast細胞、PA12細胞
SNU119細胞系相關產(chǎn)品:MDA1386細胞、HITT15細胞、G519細胞
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