"SNU-16 Adherent人胃癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題。總結(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SNU-16 Adherent人胃癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序:依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰仨氂兴煌瑫r,務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應(yīng)后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
SK-MEL28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 606.T細胞、Hs863T細胞、FRTL-5 Cl 2細胞
Hs895T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、SK-N-AS細胞、MOLP2細胞
WSU-DLCL(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK細胞、V 79-4細胞、HCV 29細胞
細胞傳代方法:3-4天換液1次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HCC2218細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 819.T細胞、rHSC-99細胞、HCC-78細胞
H-2347細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anglne細胞、WM-239細胞、TCC Sup細胞
MMAc-SF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEB細胞、Kit-225-K6細胞、MB157細胞
細胞生長特性:懸浮聚集
SNU-16 Adherent人胃癌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮細胞
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應(yīng),造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
HT 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM4細胞、G361-mel細胞、SRA01/04 (HLE)細胞
SCL-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-266-4細胞、UCLA-SO-M20細胞、NCI-H647細胞
NOK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、RPMI 1846細胞、DoHH2細胞
SNU-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1648細胞、H-460細胞、TE-3A細胞
GH 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLCL9B10細胞、SP-2/0-AG14細胞、SU-DHL2細胞
High 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 327細胞、MA104細胞、MKN7細胞
OVMANA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-5細胞、LIXC-002細胞、PA317細胞
FRTL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPASMC細胞、HARA-B細胞、FDCP-1細胞
Z310細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI660細胞、NCI-H2122細胞、TE354.T細胞
HSCT6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LSECs細胞、BI-Mel細胞、SVGp12細胞
M20 [Human melanoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115細胞、MeT5A細胞、SUM 159細胞
H660細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE5細胞、MC3T3-E1(C4)細胞、UPCI-SCC-90細胞
GM02132細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-620細胞、VMM5A細胞、A549ATCC細胞
SNU-16 Adherent人胃癌細胞系
VMRCLCD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-5178-Y-R細胞、PaTu-8988s細胞、Astrocyte type I clone細胞
NCI-H211細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H22細胞、JG細胞、P3 (Jiyoye)細胞
WI-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD細胞、LMTK-細胞、OCI-AML3細胞
WI-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD細胞、LMTK-細胞、OCI-AML3細胞
W133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN 4細胞、UPCISCC090細胞、Sp2/0細胞
CAL 27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-4細胞、OCI Ly19細胞、H1373細胞
DMS 79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SH-SY5Y Parental細胞、Cates-1B細胞、HN6細胞
Pt K2 (NBL-5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NP69SV40T細胞、Cor L88細胞、NCIH1650細胞
P 815細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPCA1細胞、SNU354細胞、EU-3細胞
ME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE9細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、NCI-H2228細胞
no.11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE-2 [50.B1]細胞、THC-8307細胞、HCA-7細胞
HBSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 832(C).T細胞、SW1222細胞、CWR22R細胞
RT-112細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32-mel細胞、HeLa/DDP細胞、RCC10細胞
H1672細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIHA細胞、H-1437細胞、HS-695T細胞
OCM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV-173細胞、GM03320D細胞、Mv1.Lu細胞
HEK 293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT clone T15細胞、NCIH211細胞、SUM-52-PE細胞
UMR106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGW-nu細胞、Panc203細胞、Mouse INsulinoma 6細胞
High Five細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN-205細胞、SW-48細胞、D-341細胞
MDA-MB-175-VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1463細胞、KOSC2細胞、NB.4細胞
Vx-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuPT3細胞、GL-261細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞
UPCI-SCC-090細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U20-S細胞、R3/1細胞、OVMANA細胞
MDA-MB468細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 453細胞、A375S2細胞、U-343MG細胞
HCC-1937細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBMEC細胞、OE21細胞、MDAMB330細胞
SUM159細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DH-82細胞、GM02132C細胞、SK-RC 42細胞
RPE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Hepatocyte Line 5細胞、H-1793細胞、HFLS細胞
U-373 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-132細胞、Huh7.5.1細胞、GS9L細胞
CAMA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Microglia Clone 3細胞、PC3M-IE8細胞、WERI細胞
C8166-CD4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KRCY細胞、CAL 27細胞、SMMC 7721細胞
Simpson細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RERFLCMS細胞、TE-9細胞、UMRC-2細胞
Panc-02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC3細胞、LC-2 ad細胞、MARC-145細胞
aTC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115mel細胞、P31FUJ細胞、RCC-4細胞
B958細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774A.1細胞、C4-2 Bone metastatic細胞、NCI-H2195細胞
OLN93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Medical Research Council cell strain-5細胞、Panc 02.03細胞、SCC 15細胞
BEP2D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT102細胞、HFL-I細胞、LS-1034細胞
SU-DHL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WiDr-TC細胞、PC3-M細胞、MCA 38細胞
HCT15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-3J細胞、HuT 102細胞、OVCAR 8細胞
CBRH-7919細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MH-S細胞、J774A.1細胞、BT20細胞
BALL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wien 133細胞、HEH2細胞、UCLA-SO-M21細胞
87MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJA-B-1細胞、SK-RC 42細胞、GA10細胞
Human Embryo Kidney-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251-MG細胞、JROECL 21細胞、C-26細胞
Fox/NY細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR751細胞、HCS-2/8細胞、SNB-19細胞
Pt K1 (NBL-3)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat 77細胞、Hs-281-T細胞、Huh-7.5.1細胞
SNU-16 Adherent人胃癌細胞系
CAL-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 subline B78細胞、EA.hy 926細胞、MC-3T3-E1細胞
CCD-112 CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:266 Bl細胞、H211細胞、Panc-02細胞
AG 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos-RA1細胞、IAR20細胞、NCIH345細胞
HT 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM4細胞、G361-mel細胞、SRA01/04 (HLE)細胞
Mouse Podocyte Clone-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DSL-6A/C1細胞、HCEC-12細胞、U-251細胞
H-1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2 Secreting細胞、H125細胞、Bat lung細胞
UPCI:SCC90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat (clone E6-1)細胞、NCIH1155細胞、GM00637B細胞
OVCAR420細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SiHa細胞、MDA MB 134VI細胞、SF767細胞
WM-266-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2066細胞、SK-RC-39細胞、SPC-A1細胞
Anip-973細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D 407細胞、MKN74細胞、TE12細胞
KLM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE1細胞、HCC-2185細胞、Hut292細胞
NOK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、293-EBNA細胞、CAL 12細胞
"