"RPMI-7951 Adherent人惡性黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞凍存復蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
RPMI-7951 Adherent人惡性黑色素瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
HCMEC(BL12-H)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR10細胞、NCI-H1404細胞、AMO-1細胞
LS-123細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 739.T細胞、HEK293-F細胞、H2330細胞
RMS13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM115-mel細胞、P3 NS1 Ag4細胞、SP2細胞
細胞傳代方法：１：２-１：４傳代，２天換液１次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs822T細胞、SNU-449細胞、U266 B1細胞
H-2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F10--RED細胞、H341細胞、GM04671細胞
MCF-12A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LSC-1細胞、SKHEP-1細胞、EB-2細胞
細胞生長特性：貼壁生長
RPMI-7951 Adherent人惡性黑色素瘤細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮細胞
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管爆裂。
BIU-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT 28細胞、COLO320DM細胞、MDA-MB-468-RED細胞
MKN 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCAEC細胞、COR-L279細胞、JEG-3細胞
MCF12A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EST50細胞、NCI-SNU-C2B細胞、GC-2細胞
CCD-841CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPF細胞、Tsup-1細胞、hTERT-RPE細胞
SNU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA436細胞、U-138MG細胞、U373-MG細胞
Mouse Colon 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTC1細胞、SNU-484細胞、MDA-231細胞
Vero-76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat Clone E6-1細胞、KMS26細胞、NCIH1694細胞
Hs 683細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RDES細胞、Hs606細胞、HuH-6細胞
RWPE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C 643細胞、SF-539細胞、NT2D1細胞
H2.35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNT-229細胞、CCD1112Sk細胞、Karpas 299細胞
GM07404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：639-V細胞、Pa017C細胞、OCI/AML-5細胞
I90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES 13細胞、SW1463細胞、INS-1細胞
OCI AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 839細胞、MOLP-8細胞、OVISE細胞
RPMI-7951 Adherent人惡性黑色素瘤細胞系
LU451細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J82 COT細胞、NCI-H1238細胞、MRC 5細胞
Jurkat E6.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1869細胞、H2291細胞、NCI522細胞
NOK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、RPMI 1846細胞、DoHH2細胞
NOK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、RPMI 1846細胞、DoHH2細胞
HOS TE 85細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293AD細胞、LI7細胞、MOVAS-1細胞
NCIH650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K7M2 wt細胞、T 24細胞、MDA-361細胞
LIXC-002細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B4G12細胞、MRC9細胞、M059J細胞
HEK-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTPA細胞、VAESBJ細胞、NCIH747細胞
Kasumi-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1623細胞、HL-60 Clone 15細胞、NCI-H1155細胞
OCI-AML-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-294T細胞、MHCC-97細胞、UMUC3細胞
RPMI 2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIMT細胞、HuLEC-5a細胞、H-735細胞
Karpas 299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-1細胞、AML-12細胞、RINm5F細胞
BpRcl細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR-8/SV neo細胞、NCI-H508細胞、ARH 77細胞
RC13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JF305細胞、BE2-C細胞、HSC5細胞
Tadarida brasiliensis 1 lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JCA-1細胞、SCC15細胞、P30/OHK細胞
SU86_86細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL-I細胞、Melan-a細胞、L-Wnt3A細胞
S3-HeLa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi-five細胞、RPTEC/TERT 1細胞、HNTEC細胞
SNU601細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE0030細胞、WiDr-TC細胞、KPNRTBM1細胞
E304細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SR-786細胞、3LL細胞、U138細胞
P3-X63-Ag8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H250細胞、JKT1細胞、SJSA細胞
NCIH2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCECs細胞、L23/P細胞、ECC1細胞
NH6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MonoMac6細胞、WERI細胞、HDQ-P1細胞
Anglne細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COC1/CDDP細胞、HO-8910 PM細胞、GM03573細胞
MOLT-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、HT 144細胞、NCIH1437細胞
Panc08.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M-1E8細胞、MEL-526細胞、NIH3T3-L1細胞
WiDr細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF細胞、TOV-112細胞、L cell細胞
Hmy.2 CIR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Balb/c3T3細胞、NE1細胞、KYSE 450細胞
Douglas Foster-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2227細胞、APRE-19細胞、NIH:OVCAR-3細胞
NCI-SNU-886細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJSA-1細胞、MGC-803細胞、R 2 C細胞
MC 116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM06141細胞、KFB細胞、MH-S細胞
Bac12F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RERF-LCMS細胞、WEHI 164細胞、H-28細胞
SK-N-DZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-1847細胞、EC109細胞、BEL 7405細胞
OV-2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPAM-WT細胞、MHCCLM3細胞、R1610細胞
NCIH1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-125細胞、EB-2細胞、Soleus clone 8細胞
NCI-HUT-596細胞系相關(guān)產(chǎn)品：675T細胞、A 253細胞、CWR22Rv1細胞
SKMEL-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-134細胞、AE 1201細胞、MV4II細胞
ID8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPI-2I細胞、RA 1細胞、FHs 74 Int細胞
NCI-HUT-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J HR-1細胞、RS(4;11)細胞、MF2059細胞
GM03320細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.OV.3細胞、675T細胞、L-02細胞
Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 12細胞、NCI-H810細胞、Hs 578.T細胞
ML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HARA-B細胞、H-526細胞、SGC996細胞
CCRF-CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-601細胞、ZR-75-1細胞、OCLY8細胞
RPMI-7951 Adherent人惡性黑色素瘤細胞系
AsPC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF12A細胞、HCT-8/V細胞、LSECs細胞
EAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373 MG細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞、Swiss-3T3細胞
SKG-3a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TALL1細胞、NIT-1細胞、Hs 604.T細胞
SW 527細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC-3細胞、H1435細胞、A375-S2細胞
CBRH7919細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP100細胞、MDA-PCa-2b細胞、BT 325細胞
H2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMC-HN-8細胞、NCI-HUT-520細胞、K562/ADP細胞
Panc05.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCPEpiC細胞、SW.620細胞、AtT20細胞
OVCAR-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R 1610細胞、Lieming Xu-2細胞、VSC4.1細胞
MFE 296細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK UT 1細胞、RPMI-7666細胞、NCI-SNU-1040細胞
SNU-119細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL7702細胞、P3-X63.Ag8.653細胞、MHCC-97細胞
UPCI-SCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L M (TK-)細胞、JB6Cl30細胞、MNNG-HOS (Cl#5)細胞
MCF12A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EST50細胞、P3-X63Ag8細胞、U2OS細胞
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